促紅細胞生成素和血清瘦素水平與慢性腎衰病人療效的關系

【摘要】 目的 從CR1分子數量表達方面探討促紅細胞生成素和血清瘦素水平與慢性腎衰病人療效評價的關系。

方法 選擇40例慢性腎功能不全(CRF)貧血患者作為觀察組，每例皮下注射rhEPO 2000 U/ 次，每周2 次，共用6—8周;同時口服右旋糖酐鐵片0.5 g/次，3次/d。治療期間禁止輸血、透析、使用免疫抑制劑。另選同期接受健康檢查者36例作為對照。結果 rhEPO治療前觀察組外周血紅細胞上CR1分子的表達及血Hb的水平均顯著低于對照組(P<0.01)，治療后兩項指標均較治療前顯著升高(P<0.01)，但仍顯著低于對照組(P<0.01)，血清瘦素明顯降低(P<0.01)。結論 rhEPO 治療后在增加紅細胞上CR1分子表達和血Hb 水平的同時，尚可間接調節NK細胞和LAK細胞的功能，提高機體免疫系統的功能。

【關鍵詞】 慢性腎功能衰竭；促紅細胞生成素；瘦素

文章編號：1003-1383(2007)02-0134-02中圖分類號：R 692.5文獻標識碼：A

腎性貧血是慢性腎衰竭病人主要的臨床表現之一。隨著人類重組促紅細胞生成素(rhEPO)技術的發展，rhEPO已被廣泛應用于腎性貧血的治療中并取得很好的療效。瘦素是近年發現的一種脂肪細胞分泌的肥胖基因編碼的蛋白產物，造血干細胞在瘦素刺激下可發生增殖效應，與紅細胞生成素協同促進紅系生長［1］。也有研究表明紅細胞表面具有1型補體受體分子(CR1)，主要的免疫功能是消除循環免疫復合物(CIC)及病原體，將抗原提呈給淋巴細胞;增強T 淋巴依賴性反應;增強免疫調控作用及效應細胞樣作用［2］。因此研究紅細胞CR1分子的數量表達與慢性腎衰竭的關系具有重要意義。本文初步從CR1分子數量表達方面探討促紅細胞生成素和血清瘦素水平與慢性腎衰病人療效評價的關系。

對象與方法

1.對象 選擇在我院住院治療的40例慢性腎功能不全(CRF)并貧血患者作為觀察組，男24例，女16例，年齡19—72 歲，病程1—11 年。 其中原發病為慢性腎小球腎炎26例，狼瘡腎炎4例，腎結石5例，多囊腎3例，慢性腎盂腎炎2 例。血尿素氮(BUN)9.69—37.15 mmol/ L，平均19.03 mmol/ L，血清肌酐(Scr)164.2—840.9 μmol/ L，平均502.55 μmol/ L。均無感染、慢性失血及缺鐵等。另選同期健康體檢者36例作為對照組，男24例，女22例，年齡16—66 歲。兩組性別、年齡比較無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。

2.方法

(1)治療方案 觀察組患者均接受沈陽三生制藥股份有限公司生產的益比奧(成分為rhEPO)治療。每例患者皮下注射2000 U/ 次，每周2次，共用6—8周;同時口服右旋糖酐鐵片0.5 g/次，3 次/d。治療期間禁止輸血、透析和使用免疫抑制劑。

(2)紅細胞上CR1分子的測定 建立的ELISA法檢測紅細胞上CR1分子的表達。抽取靜脈血2 ml，以EDTA 抗凝，經PBS 洗滌3 次、戊二醛固定后，以PBS 配成2%的紅細胞懸液，取25 μl紅細胞懸液加入“V”形板各孔中，依次加入抗CR1單抗mAb、堿性磷酸酶標記的羊抗鼠IgG和底物單磷酸酚酞(PMP)，離心，吸取上層顯色液，加入到另一個干凈的“U”形板中測定A405值。實驗中以一抗的稀釋液(PBS/ BSA)作為空白對照，用綿羊紅細胞(無CR1分子)作為陰性對照。檢測結果以觀察組的A405值與空白對照A405值之差作為測定值。

(3)血Hb水平的測定 采用日本Sysmex KX221型血液分析儀測定，試劑為其配套產品。

(4)血清瘦素水平的測定 于晨7時左右空腹取血2 ml，標本離心后，將血清保存-20℃以下備用。血清瘦素水平的測定采用放射免疫分析法。

3.統計學處理 計量資料以-±s表示，采用t檢驗。

結果

rhEPO治療前觀察組外周血紅細胞上CR1分子的表達及血Hb的水平均顯著低于對照組(P<0.01)，治療后兩項指標均較治療前顯著升高(P<0.01)，但仍顯著低于對照組(P<0.01)，血清瘦素明顯降低(P<0.01)。提示CRF患者紅細胞上CR1的表達降低并存在明顯的貧血，應用rhEPO治療后對CR1的表達及Hb和血清瘦素的水平均有顯著改善。

討論

紅細胞CR1分子具有許多重要的生物學功能:①具有Ⅰ因子輔因子活性(FICA)和C3/C5轉化酶衰變加速作用(DAA)，可調節兩條補體途徑的激活;②補體調理的抗原物質可經補體受體與巨噬細胞結合，促進吞噬且有利于巨噬細胞對抗原信息的傳遞，刺激其他免疫細胞而擴大免疫效應;③通過免疫黏附對CIC具有強大的輔助消除作用;④紅細胞主要的免疫功能是消除CIC及病原體，將抗原提呈給淋巴細胞;增強T淋巴依賴性反應;增強免疫調控作用及效應細胞樣作用。本研究證實，CRF患者紅細胞上CR1分子的表達降低，但用rhEPO治療后具有較明顯的提高，說明CRF患者存在EPO生成不足。而EPO生成的減少，可能與患者的腎功能受損有關。紅細胞上CR1分子表達的降低可導致其RCIA功能下降，清除CIC的能力隨之下降，而致血中CIC濃度增高，并沉淀在相應組織中。而大量CIC 在腎小球基底膜的沉積，可加劇腎臟的炎癥反應而使腎功能進一步受損，形成惡性循環。應用rhEPO治療后，紅細胞上CR1 分子的表達顯著提高，同時血Hb的水平也明顯升高，充分說明rhEPO對CRF患者治療的效果。另外，rhEPO治療后在增加紅細胞上CR1分子表達和血Hb水平的同時，尚可間接調節NK細胞和LAK細胞的功能，提高機體免疫系統的功能。

瘦素是一種蛋白質激素，主要在腎臟清除［3，4］：其主要生理功能是感受機體的營養狀況，通過調節食欲和能量代謝來調節體質量。當體質量增加時，脂肪組織分泌瘦素增多，通過調節下丘腦神經內分泌軸，促進食欲的神經肽Y(NPY)分泌減少，引起食欲下降；此外瘦素還可促進能量消耗，導致體質量減輕，兩者共同作用實現對體質量的調節［5，6］。慢性腎功能衰竭時血瘦素水平升高，高瘦素血癥抑制食欲，增加能量消耗，造成尿毒癥患者瘦體質量(1ean body mass)減輕，并可能引起營養不良，進一步加重慢性腎衰竭患者的病情。本研究表明經EPO 治療后，CRF患者的血清瘦素水平明顯降低，血Hb 水平增高。認為可能是：①rhEPO治療后腎功能改善，瘦素是由腎小球濾過而部分清除。②高瘦素可能可以增加rhEPO治療的敏感性，血清瘦素與rhEPO有相互協同的作用。而消耗部分血清瘦素。③高血清瘦素可能有刺激骨髓紅細胞生成的作用。慢性腎功能衰竭病人經EPO治療后CR1水平明顯升高，高血清瘦素對CR1有無直接作用，尚缺乏證據。有待于進一步研究與探索。但動態定量檢測CRF患者紅細胞上CR1分子的表達和血清瘦素水平，對判定病情的發展及療效確有一定的臨床參考價值。

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