“ＤＮＡ粗提取”實驗的改進

摘 要 以雞血為原材料，材料難得，操作復雜，效果不佳，嘗試以鯉魚魚白、洋蔥、香蕉等為原材料，簡化操作步驟，逐步解決了課本實驗中的一些問題，獲得了比較理想的實驗效果。

關鍵詞 DNA粗提取 實驗材料 實驗方法

中圖分類號Q-34

文獻標識碼B

《生物》(必修)課本中有\"DNA的粗提取與鑒定”這一實驗，經過一段時間的教學，我們發現此實驗材料獲取困難，操作復雜，而且學生做完后往往比較迷茫，不能理解整個實驗的過程及目的。對此我們教研組的老師進行了討論和研究，并組織學生進行研究性學習，對該實驗進行了一定的改進，效果較為理想。

1 以鯉魚魚白(精巢)為實驗材料

實驗原理與課本相同，具體的實驗步驟如下。

①魚白漿狀液的制備。取80 g鮮魚白(750 g以上的雄鯉魚2條)，洗凈，加入1000mL蒸餾水，用攪拌機攪拌1～2min，制成均勻漿狀液(可供10個班使用)。

②DNA的溶解。取5 mL(2人／組用量)魚白漿狀液，加入2 mol／L的氯化鈉溶液約40 mL，用玻璃棒向一個方向攪拌，混合均勻。

③析出含DNA的黏稠物：沿燒杯壁緩緩加入蒸餾水，邊加邊用玻璃棒輕輕攪拌，過濾，得到DNA的黏稠物。

④提取含雜質較少的DNA。將黏稠物放入小燒杯，加入冰酒精，混勻后可以使DNA沉淀、濃縮，形成含雜質較少的絲狀物，利用玻璃棒的吸附作用，緩緩旋轉玻璃棒將其卷起。

⑤DNA的鑒定。采用課本中所述方法。

與課本實驗相比，用鯉魚魚白做實驗材料，1個年級(10個班)只需要2條鯉魚即可夠用。但由于杭州人不太吃鯉魚，所以比較難買到。

實驗的操作步驟有所減少，僅需加1次蒸餾水和一次過濾。整個實驗操作較課本實驗簡單，但仍比較多，在學生實驗時，一般從步驟④開始，實驗的整體性有所欠缺，學生不能清楚地了解實驗的整個過程。

就實驗結果而言，該方法得到的DNA量較多。然后用二苯胺試劑鑒定，能夠觀察到比較理想的實驗現象，實驗效果比較明顯。

2 以洋蔥、香蕉為實驗材料

鑒于以上方法的優缺點，我們設想是否能在植物中尋找一種易得的原材料，操作簡便，所用試劑簡單易找，得到的結果具有說服力，一般中學都能開展，有利于推廣和普及的材料及方法。

我們比較了多種植物染色體的數量，發現洋蔥、香蕉中DNA含量較多，且經濟實惠。同時結合大學中的相關研究方法：DNA提取前用SDS(十二烷基磺酸鈉)處理材料，可使蛋白質變性，有利于提取DNA。經過進一步的查閱，我們發現日常生活中用的洗潔精就含有該成分。因此，我們設計了以下實驗。

洗潔精可以溶解細胞的細胞壁，破壞細胞膜，同時洗潔精中含有的SDS能使蛋白質變性。

具體的實驗步驟如下。

①制取研磨液。每組稱取洋蔥10 g(或取一段約2 cm長的去皮香蕉，用溫水浸泡2～3 min)，剪碎，放入研缽中，加入1～2滴洗潔精和2～5 mL蒸餾水，充分研磨。研磨均勻后用紗布過濾至燒杯中。

②提取DNA。向燒杯內加1 g氯化鈉固體，混合均勻。沿燒杯壁緩慢加入95％的冰酒精，一邊加酒精一邊用玻璃棒緩慢地沿一個方向輕輕攪拌。當酒精加入量約為50 mL時開始有絲狀物(即DNA)出現，并隨著酒精量的增加而逐漸增加，緩慢攪拌使絲狀物吸附在玻棒上。

③DNA的鑒定。采用課本中所述方法。

用洋蔥、香蕉做此實驗，材料易得，價格便宜。

實驗步驟簡單，僅3步即可完成，一節課內學生可以完成全部操作。就實驗結果而言，兩者所得到的DNA量都比較多，用洋蔥做材料所得到的DNA容易收集，用香蕉做材料所得到的多為DNA碎片，難收集；用二苯胺試劑鑒定，兩者現象均十分明顯，實驗效果較好。