ＶＥＧＦ基因體外轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究
2006-12-31 00:00:00鄭巖易成剛郭樹忠劉丹黃博夏煒潘華隋繼強(qiáng)
中國(guó)美容醫(yī)學(xué) 2006年9期
[摘要]目的：探討脂質(zhì)體介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCS)應(yīng)用于基因治療的可行性、安全性。方法：體外分離、培養(yǎng)、鑒定MSCs，PcDNA3．1(-)／VEGF165質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MSCs，轉(zhuǎn)染后用免疫熒光和ELISA檢測(cè)MSCs表達(dá)VEGF蛋白的情況，MTT檢測(cè)Mscs對(duì)VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的敏感性。 結(jié)果：骨髓中分離得到MSCs，流式細(xì)胞檢測(cè)顯示MSCs不表達(dá)CD34和CD45，但表達(dá)CD90。透射電鏡觀察可見細(xì)胞漿中含大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和分泌顆粒。VEGF基因轉(zhuǎn)染MSCs后第5天抗VEGF免疫熒光染色約90％的MSCs呈陽性，ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示PcDNA3．1(-)／VEGFl65質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組細(xì)胞培養(yǎng)上清液中VEGF含量明顯高于對(duì)照組，并于轉(zhuǎn)染后第5天達(dá)到峰值。MTT檢測(cè)結(jié)果顯示VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)染對(duì)Mscs增殖無影響。 結(jié)論：MSC可作為VEGF基因轉(zhuǎn)染的靶細(xì)胞用于基因治療。
[關(guān)鍵詞]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子；基因治療
[中圖分類號(hào)]Q813．1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A [文章編號(hào)]1008—6455(2006)09—998—03
