2016年我國部分地區屠宰場豬流感血清學調查

徐 琦,吳佳俊,訾占超,張 遠,宋曉暉,楊 林

(中國動物疫病預防控制中心,北京 朝陽 100125)

豬流感(SI)即豬流行性感冒是由豬流感病毒(SIV)引起的一種急性、熱性、高密度接觸性呼吸道傳染病,是規模化養豬場普遍存在且難以根除的豬群發性疾病之一。目前,豬群中主要存在經典H1N1亞型、歐洲類禽H1N1亞型以及H1N2、H3N2亞型豬流感病毒,其中歐洲類禽H1N1亞型流感病毒在中國、歐洲各國以及其他地區的豬群中已成為主要流行毒株。 此外,H1N7、H4N6、H9N2、H5N1、H3N3、H3N1和H2N3等亞型病毒也在豬體內分離到[1-2]。2009年大流行流感病毒(pdm/09)在人群中暴發后,以非常驚人的速度傳播,造成了上百萬人感染,至少導致18 000人死亡,對全球人類健康和生命安全造成了嚴重威脅。之后,該病毒很快就在豬群中分離到,并且不斷發生著基因重排和基因突變[3-4]。由于豬作為人流感病毒和禽流感病毒共同易感宿主,被認為是流感病毒基因重排的“混合器”,一直以來在病毒的適應性變異和新毒株產生中擔任著重要角色,對豬流感病毒的監測在公共衛生領域也具有重大而深遠的意義。為了解我國屠宰場豬群中流感病毒的感染與流行情況,本研究對2016年我國25個屠宰場進行血清學調查工作,為有效防控豬流感提供依據。

1 檢測方法

2016年,從全國選取25個屠宰場,采集血清樣品729份,分別以2009年甲型 H1N1(pdm/09)、歐洲類禽 H1N1(EA H1)、經典 H1N1(經典H1)、新型三源重排 H1N1(ReH1)、H3N2(H3)、H9N2(H9)亞型豬流感滅活病毒作為標準抗原,其中ReH1為近年我國豬群中的三源重排病毒分離株,其聚合酶基因(PB2、PB1、PA)和核蛋白基因(NP)來自pdm/09,表面基因(HA和NA)和基質蛋白基因(M)來自EA H1,非結構蛋白基因(NS)來自北美三源重排豬流感病毒。所有血清用受體破壞酶進行處理,以去除血清中的非特異性抑制因子。根據相應抗原的HA效價配制4 HAU的抗原,以完全抑制4 HAU抗原的血清最高稀釋倍數作為HI效價。HI效價大于或等于1∶10倍稀釋判定為陽性[5]。

2 結果

2.1 2016年我國屠宰場血清樣品不同亞型流感病毒抗體的檢測結果 本次檢測顯示,我國屠宰場中H1亞型抗體平均個體陽性率普遍高于H3和H9亞型,在檢測的4個項目H1亞型豬流感中,EA H1抗體平均個體陽性率最高(見表1)。

2.2 場陽性率 25個屠宰場中,場陽性率最高的是pdm/09(76%),最低為H3(44%),說明pdm/09在商品豬群中比較普遍,其他5種豬流感抗體場陽性率分布在44%～64%之間,在商品豬群中也占有一定的存在比例(見表1)。

表1 2016年我國屠宰場不同亞型流感病毒血清學監測平均個體陽性率和場陽性率/%

2.3 我國各地區屠宰場豬群不同亞型流感病毒抗體陽性率 在行政地區劃分中,所檢測豬流感血清抗體平均個體陽性率,華南地區最高,平均為42.02%,其中 pdm/09抗體平均個體陽性率高達71.28%,ReH1抗體平均個體陽性率為53.19%,而H9亞型豬流感抗體平均個體陽性率僅為1.06%;西北地區整體豬流感HI抗體平均個體陽性率最低,為1.93%,沒有檢測到經典H1抗體陽性(見表2,圖1);整體上與我國國家經濟發展趨勢相對應,抗體陽性率較高的地區(華南、華東和華北)也是經濟發展最為活躍的地區,同時抗體陽性率最低的西北地區也是我國經濟發展較為薄弱的地區。

表2 2016年我國各地區屠宰場豬群不同亞型豬流感病毒的抗體陽性率/%

圖1 2016年我國各地區屠宰場豬群不同亞型豬流感病毒的抗體陽性率

3 分析與討論

3.1 H1亞型 本次監測結果顯示,我國商品豬群中,H1亞型的抗體陽性率相對較高,其中EA H1抗體平均個體陽性率最高(28.12%),說明EA H1豬流感病毒仍為我國商品豬群中的優勢毒株,但pdm/09和ReH1抗體平均個體陽性率均超過22%,已經非常接近EA H1的抗體陽性率,暗示pdm/09和ReH1豬流感病毒在我國商品豬群中的占比已逐漸上升。其中華南地區H1亞型抗體平均個體陽性率超過60%,結合華南地區的氣候環境和混養特點,提醒我們應高度關注華南地區豬群中流感病毒的流行和新毒株的產生。

3.2 H3亞型 目前H3N2作為流感主要亞型之一仍分布在豬群中,并且與其他譜系的流感病毒發生著重排,但是近年來鮮有關于H3N2疫情大規模暴發的報道[6-7]。我國自1969年從臺灣豬群中分離到H3N2亞型流感病毒以來,H3N2亞型流感病毒已在豬群中建立了穩定的譜系。在此次監測中,我國商品豬群H3N2亞型豬流感抗體平均個體陽性率為7%,25個場中有14個場未檢出H3N2豬流感抗體陽性,其他場平均個體陽性率在3.33%～43.33%之間。各地區H3N2亞型豬流感抗體平均個體陽性率為1.05%～14.4%,其中西北地區最低,華北地區最高。說明H3N2亞型豬流感病毒仍持續性存在于我國商品豬群中。

3.3 H9亞型 自1999年香港報道從豬群中分離到4株H9N2亞型流感病毒后,豬群中分離到H9N2亞型流感病毒的報道逐漸增多,說明H9N2亞型流感病毒已突破宿主種間屏障,傳入到豬群和人群中,并不斷發生著抗原漂移和基因重組[8-9]。在此次監測中,我國商品豬群H9N2亞型流感病毒抗體平均個體陽性率為7.41%,所監測25個場中有12個場未檢測H9N2亞型流感病毒抗體陽性,其余場抗體平均個體陽性率在2.94%～46.67%之間,其中華東和華中地區H9N2亞型流感病毒HI抗體陽性率相對較高。2002年遼寧、廣東、山東及重慶豬血清中出現 H9亞型流感抗體,陽性率分別為7.3%、6.8%、5.1% 和 1.6%[10];2013-2014 年間我國部分省份豬群中H9N2亞型流感病毒的抗體陽性率為1.36%～2.05%[11-12],表明H9N2亞型豬流感病毒在我國豬群中持續存在,應加強對該亞型豬流感病毒的監測與防控。

3.4 應高度關注豬群中pdm/09與EA H1的重排現象 自2009年pdm/09在人群中暴發后,很快就在豬群中分離到,并且不斷發生著基因重排和基因突變。一旦pdm/09病毒在流行中獲得了較高的致病力,則很可能會引起一場更為嚴重的災難;豬群中pdm/09和EA H1發生重排的報道已非常多見,且重排方式多樣化[13-14],不同的重排方式可能導致不同的致病性和傳播性的改變。值得注意的是,EA H1的HA基因在近30年已經很少有感染到人的病例,如果帶有這個基因的重排病毒獲得pdm/09所賦予的傳播能力進而感染到人,人群由于免疫缺陷就可能發生大規模的流行[15]。

3.5 應該加強對豬流感預防控制的重視程度 我國豬流感疫病防控工作比較落后,防控形勢比較嚴峻。如果出現單純性流感疫情,豬場往往通過短時間大量注射抗生素控制,或由于此病可自愈視情況而不作處理。我國需要防控的其他豬烈性傳染病種類比較多,所以豬流感病毒本身經常不被重視甚至忽視。目前的防控主要由各省市地區疫控單位以豬流感疫情監測的形式,同時國內有關機構如農業相關專業院校、國家有關科研院所開展流行病學調查和致病機理研究等科研工作對此病毒的防控作為指導。具體到場站、散養戶中基本沒有使用疫苗進行免疫,一般駐場獸醫或技術人員只是通過日常生產和飼養管理達到普遍的預防作用。在疫苗免疫預防上,西方國家獸藥市場已經有商品化的疫苗,如Schering-Plough動物保健公司的Max-iVac-Flu(H1N1亞型豬流感病毒),Intervet公司的 Maxi-VacExcell(H1N1亞型-H3N2亞型豬流感滅活疫苗)等,并且已經投入市場很長一段時間,實際使用效果也有市場檢驗。我國只有2015年由華中農業大學、武漢科前動物生物制品有限責任公司、武漢中博生物股份有限公司和中牧實業股份有限公司等4家單位共同研制的豬流感病毒H1N1亞型滅活疫苗(TJ株)被農業部批準為二類新獸藥,這是我國首個獲得此證書,并用于防控豬流感病毒的滅活疫苗,目前使用情況尚待觀察。對比來說我國豬流感的預防工作基本上處于起步階段,鑒于流感的公共衛生意義和生豬行業在我國國民經濟中的地位,應該加強對豬流感預防控制的重視程度。

參考文獻:

[1] Brown I H.The epidemiology and evolution of influenza viruses in pigs[J].Veterinary Microbiology,2000,74(1-2):29-46.

[2] Ma W,Kahn R E,Richt J A.The pig as a mixing vessel for influenza viruses:Human and veterinary implications[J].Journal of Molecular Genetic Medicine,2009,3(1):158-166.

[3] Trifonov V,Khiabanian H,Rabadan R.Geographic dependence,surveillance,and origins of the 2009 influenza A(H1N1)virus[J].N Engl J Med,2009,361(2):115-119.

[4] Vijaykrishna D,Poon L L,Zhu H C,et al.Reassortment of pandemic H1N1/2009 influenza A virus in swine[J].Science,2010,328(5985):1 529.

[5] GB/T 27535-2011.豬流感HI抗體檢測方法[S].

[6] Ngo L T,Pham V P,Nguyen H T,et al.Isolation of novel triplereassortant swine H3N2 influenza viruses possessing the hemagglutinin and neuraminidase genes of a seasonal influenza virus in Vietnam in 2010[J].Influenza Other Respir Viruses,2012 Jan,6(1):6-10.

[7] Gagnon C A,Fontaine G,Tremblay D,et al.(2009)Characterization of a Canadian Mink H3N2 Influenza A Virus Isolate Genetically Related to Triple Reassortant Swine Influenza Virus[J].Journal of Clinical Microbiology,2009 Ma,47(3):796-799.

[8] Dong G,Luo J,Zhang H,et al.Phylogenetic diversity and genotypical complexity of H9N2 influenza A viruses revealed by genomic sequence analysis[J].Public Library of Science,2011 Feb 28,6(2):e17212.

[9] Fusaro A,Monne I,Salviato A,et al.Phylogeography and Evolutionary History of Reassortant H9N2 Viruses with Potential Human Health Implications.[J].Journal of Virology,2011,85(16):8 413-8 421.

[10] 李海燕,于康震,楊煥良,等.中國豬源H5N1和H9N2亞型流感病毒的分離鑒定[J].中國人獸共患病學報,2004,26(1):1-6.

[11] 劉麗萍,喬傳玲,楊煥良,等.2012年～2013年我國養豬重點省份豬流感的血清學調查[J].中國預防獸醫學報,2014,36(6):431-434.

[12] 隋金鈺,楊大為,楊煥良,等.我國部分省份豬群中流感病毒血清學抗體的調查[J].中國預防獸醫學報,2016,38(1):11-14.

[13] Vijaykrishna D,Poon L L M,Zhu H C,et al.Ressortment of pandemic H1N1/2009 influenza A virus in swine[J].Science,2010,328(5985):1 529.

[14] Huachen Z,Boping Z,Xiaohui F,et al.Novel reassortment of Eurasian avian-like and pandemic/2009 influenza viruses in swine:infectious potential for human[J].J Virol,2011,85(20):10 432-10 439.

[15] 高靈茜,崔夢一,樊曉暉.豬流感病毒基因池中的新成員:新甲型H1N1流感病毒基因片段的存在及潛在威脅[J].中國人獸共患病學報,2016,32(9):832-837.