高效液相色譜法測定女貞子含量的不確定度分析

金鳳華 黃秋紅

(合肥市食品藥品檢驗中心，安徽 合肥238000)

1 分析方法和測量參數概述

1.1 方法依據：

《中國藥典》2015 版附錄一部，《中國藥典》2015 版附錄四部通則0512 高效液相色譜法。

1.2 儀器：梅特勒電子天平型號：XPE-205，儀器編號：YQ1604。

安捷倫高效液相色譜儀型號：Agilent1260，儀器編號：YQ1640。

1.3 方法概述：供試品溶液制備：取本品粉末（過三號篩）約0.5g，精密稱定，置具錐形瓶中，精密加入稀乙醇50ml,稱定重量，加熱回流1 小時，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，分別作為供試品溶液1 和供試品溶液2。對照品溶液的制備：取特女貞苷對照品適量,精密稱定，分別至20ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻；再分別精密量取上述溶液5ml 至10ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。作為對照品溶液1 和對照品溶液2。

2 被測量X 與輸入量的函數關系（數學模型）

X%:樣品中特女貞苷的含量。

fs:對照品稀釋倍數；ft：供試品稀釋倍數。

Mt:樣品質量，g；Ms:對照品質量，g。

At：供試品峰面積；As：對照品峰面積。

Q：樣品中水分的含量，Q= 8.0%。

P：對照品純度，%。

3 不確定度分量的識別和評定

按照女貞子含量與輸入量的函數關系式，特女貞苷含量的不確定度來源于：

A 類不確定度：測量的重復性。

B 類不確定度：

（1）天平稱量（包括樣品的稱量和對照品的稱量）

（2）稀釋定容（包括樣品的稀釋定容和對照品的稀釋定容）

（3）儀器測量的重復性

4 量化不確定度來源

為使重復性測定引入的不確定度可信，平行稱取十份樣品，稱量結果見表1。

表1 平行十份樣品稱量數據

4.1.3 由于實驗室環境相對獨立，稱量操作迅速及時，所以環境溫度、濕度在短時間內變化甚微，對稱量結果影響可以忽略不計。故稱取501.6mg 樣品的相對標準不確定度：

4.1.4 配置供試品溶液的不確定度：

據檢定證書50mL A 級移液管的允許差±0.03 mL,按矩形分布處理：

為使重復性測定引入的不確定度可信，平行稱取對照品兩份，稱量結果見表2。

表2 平行2 份對照品稱量數據

4.2.3 由于實驗室環境相對獨立，稱量操作迅速及時，所以環境溫度、濕度在短時間內變化甚微，對稱量結果影響可以忽略不計。故稱取9.16mg 對照品的相對標準不確定度：

4.2.4 配置對照品溶液的不確定度：

據檢定證書20mL A 級容量瓶的允許差±0.03mL,按矩形分布處理：

表4 重復性實驗結果數據

5 合成相對標準不確定度評定

6 擴展不確定度評定

7 測量結果不確定度的報告與表示

在95%的置信概率情況下，包含因子k=2，測量結果為：

8 測量不確定度統計分量圖與結論

從不確定度分量上圖可見，各樣品之間的稱量和樣品制備的稀釋體積不確定度是特女貞苷含量測定不確定度主要來源，高效液相色譜檢測的不確定度很小。因而，要求分析人員要熟練掌握測定的各個操作技術，同時還要熟練掌握樣品制備作過程中的各項要領，并嚴格按照規定的檢測條件進行測定。