六味糖克湯干預糖尿病腎病大鼠炎癥因子的研究

中圖分類號：R587.2；R692 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2025.14.011

文章編號：1006-1959（2025）14-0067-04

Abstract：ObectiveTvestgatethtsofLueangeeoctioolodcoseifaatoactodalfuctioatsi diabeticnepropathyethosFortyeanatsedolyividedintoopscudingatsinoalopdthaats werefed with high-fatsugardiet for4weeksand thenfasted for ^12h .The diabetic kidney disease （DKD） rat model was established by streptozotocin （STZ）.The rats were divided into DKD model group，DKD + AICAR group，DKD +low -concentration Chinese medicine group，and |DKD+high- concentrationCinesemedicinegoup.TheoalgroupndteDKDmodelgouperegivenitrapeioealijectioofoalsalinetheKD + （20號 AICARgroupwasgivenintraperitonealinjectionofadenosine-phosphate-activatedkinase（AMPK）activatorAICAR3Omg/kg，the DKD+low- concentrationChineseedicingroupasivenlowoncentrationChineseedicinendteD+igoncetrtionCineseedicinegoua givenhighoraieedatscdelsiod）etid urea nitrogen （BUN） were analyzed by automatic analyzer.The expresson of inflammatory factors TNF- ??α∝ and IL-6 was detected.Results Compared with the DKD model group，the FBG level inthe DKD+high-concentration Chinese medicine group was decreased（ Plt;0.01 ），but compared with the DKD + AICARgroup，therewasno significant difference（ Pgt;0 0.05）.Compared with theDKD model group，the Scrand BUNof theChinesemedicine group and the DKD + AICAR group were significantly decreased（ Plt;0.01 ），but there was no significant difference between DKD+high concentration Chinese medicine group and DKD + AICARgroup Pgt; 0.05）.Compared with theDKD model group，thelevelsof TNF- α_α∝α and IL-6 in the kidney tissues of the Chinese medicine group and the DKD + AICAR group were significantly down-regulated（P 0.05）.ConclusionLiuweiTangkedcoctioncanimprovethelevelsofblodgucosenalfunctionandinflammatoryactorsinDats. Kevwords：Diabetic nephroDathv： Inflammatorv factors：Liuwei Tangke decoction

據國際糖尿病聯盟估計，2045年糖尿病患者人數將增至6.3億。糖尿病腎病（DKD）作為糖尿病的微血管并發癥之一，已經是許多國家終末期腎臟病的主要原因。DKD發病機制錯綜復雜，但近年來，越來越多的研究表明炎癥反應在DKD的發生發展中具有重要作用[2-5]，其主要與腺苷-磷酸激活激酶（AMPK） ??PGC-1α 的激活有關。炎癥因子在AMPK信號傳導通路上的作用越來越被重視，尤其是IL-6、TNF- σ?α∝ 等炎癥因子通過調節AMPK信號通路而減輕炎癥反應可能成為治療DKD的新方法。傳統中醫藥在治療DKD，延緩腎功能進展，減少尿蛋白方面有明顯療效。本研究通過該動物實驗觀察研究六味糖克湯臨床經驗方對AMPK信號傳導通路中IL-6、TNF-α 等炎癥因子的影響作用，旨在為尋找治療DKD更加實用、有效、經濟的方法提供初步的理論基礎。

1資料與方法

1.1實驗動物及材料動物：選擇40只大鼠（45～50d），體重為 （200±10）_g 的雄性健康SD清潔級大鼠（購自中醫藥大學實驗動物中心）。試劑：AMPK激活劑AICAR（中醫藥大學動物實驗室提供）；雙抗體夾心ELISA盒（欣博盛，ERC001/R210602-001b）;中藥湯劑（知母 6g. 牛膝 10g. 黃芪 12g 山藥 15g 葛根 12g 麥冬 6g ），飲片購于市臨安區中醫院，由制劑室統一制成煎劑，置于 4^qC 保存備用。設備：AU2700型全自動生化分析儀（貝克曼公司，美國）。動物實驗嚴格遵守《實驗動物福利倫理審查指南》。

1.2方法

1.2.1動物造模大鼠先予普通飼料喂養1周，根據隨機對照表分為正常對照組（8只），糖尿病腎臟病組（DKD組，32只），正常對照組以普通飼料喂養，DKD組使用高脂，高糖飼料喂養（脂高糖飼料配方：60% 普通大鼠飼料 .8% 蛋黃粉 ，10% 煉豬油 ，20% 蔗糖 .2% 膽固醇）喂養4周。4周后禁食 ^12h ，并使用鏈脲佐菌素（STZ）（以 0.1mmol/L，pH=4.4 檸檬酸緩沖液溶解新鮮配置）按劑量 40mg/kg 體重腹腔注射1次，于注射 ^72h 后取大鼠尾靜脈血測血糖，血糖 ?16.7mmol/L ，且尿量和飲水量明顯增多；代謝籠收集 24h 尿，測尿微量白蛋白，微量白蛋白/肌酐 為DKD大鼠造模成功。

1.2.2實驗分組正常組8只，DKD組分為4組，每組8只。DKD大鼠組分為：DKD模型組、 DKD+ AICAR（AMPK激活劑）組、 .DKD+ 低濃度中藥組、DKD+ 高濃度中藥組，正常組、DKD模型組分別給與腹腔注射生理鹽水， DKD+AICAR 組予AMPK激活劑AICAR 30mg/kg 腹腔注射， DKD+ 低濃度中藥組給予低濃度中藥喂養， DKD+ 高濃度中藥組給予高濃度中藥喂養。大鼠中藥給藥劑量依據人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值進行換算（1：6.25），并按臨床成人用藥量的4倍、1倍劑量給藥，分為中藥高 [5.69mg/（kg?d）] 、低 [1.49mg/（kg?d）] 劑量組，早晚各1次，連續灌胃4次。給藥 36h 后處死大鼠。檢測血清生化指標空腹血糖（FBG）、血肌酐（ （Scr） 1，尿素氮（BUN）]，ELISA法檢測大鼠腎組織勻漿上清液TNF- σ?α?α?α?α 、IL-6水平。

1.3統計學方法采用SPSS21.0統計軟件對數據進行分析，符合正態分布的計量資料以 表示，兩組間比較采用 t 檢驗，多組間比較采用單因素方差分析， Plt;0.05 表示差異有統計學意義， Plt;0.01 視為統計學意義顯著。

2結果

2.1各組大鼠FBG比較DKD模型組大鼠FBG與正常組比較，統計學意義顯著 （Plt;0.01）;DKD+ 高濃度中藥組與DKD模型組比較，統計學意義顯著（ Plt; 0.01），見表1。

2.2各組大鼠 Scr 和BUN比較與DKD模型組比較，中藥組和 DKD+AICAR 組大鼠的 Scr 和BUN均下降（ Plt;0.01 ）， DKD+ 高濃度中藥組與 DKD+ AICAR組比較無統計學差異（ P50.05 ，見表2。

表1各組大鼠FBG 比較（x+S，mmol/L）

注：與模型組比較， ?_Plt;0.01 。

表2各組大鼠Scr和BUN比較

注：與正常組比較， ^ΔPlt;0.01 ；與DKD模型組比較， ^*Plt;0.01，

2.3各組大鼠腎組織 TNF-α、IL-6 水平比較與DKD模型組比較，中藥組和 DKD+AICAR 組大鼠腎組織TNF- σ?α?α?α?α IL-6水平均較低（ Plt;0.01 ）； DKD+ 高濃度中藥組與 DKD+ AICAR組比較無統計學差異（ Pgt; 0.05），見表3。

表3各組大鼠腎組織TNF- ?∝ IL-6的表達 （20

注：與正常組比較， ^ΔPlt;0.01 ；與DKD模型組比較， ^*Plt;0.01 。

3討論

DKD是由多種因素引起的，包括機械應激、炎癥反應、氧化應激、TGF- _?β1 誘導、腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RAAS）激活和AGEs積累。并且有許多信號通路參與了自噬介導的mTOR信號通路、AMPK信號通路、 Wnt/β- 連環蛋白信號通路等的調控。六味糖克湯是在清代著名醫家張錫純玉液湯的基礎上加減而成，由知母、牛膝、黃芪、山藥、葛根、麥冬組成。

本研究 DKD+ 高濃度中藥組FBG低于DKD模型組，這說明六味糖克湯有明顯降低血糖的作用，這是由于中藥中含有多種有效成分。如山藥多糖對 α- 淀粉酶活力有抑制作用，山藥皂昔、黃酮類成分可以抑制agd酶 ?_?α- 淀粉酶和二肽基肽酶 IV（DPP-4） ，具有降血糖活性。山藥能顯著降低腸道微生物群的多樣性，促進T2DM大鼠益生菌（尤其是產SCFA的細菌）的生長，并增強結腸組織中GPR43受體的表達，從而增加血清中GLP-1和PYY的含量，并發揮降血糖作用8。葛根素可通過激活AMPK通路調節自噬，拮抗鎘引起的rPT細胞凋亡，并可修復受損的胰腺 β 細胞。黃酮與多糖等化學物質可大量釋放，避免胰島素 β 細胞受到免疫性損害，避免出現胰島素抵抗[9，10]

高宏宇等研究顯示，降低腎病綜合征小鼠血清中炎癥因子水平可減輕腎臟損傷，而黃芪可通過抑制炎癥因子的分泌減輕腎病綜合征小鼠機體內的炎癥反應。知母的主要活性成分肉豆蔻素（Sar）對糖尿病大鼠足細胞損傷有預防作用1，知母中含有的木質素類成分，可以有效抑制炎癥，具有較好的抗炎作用；麥冬皂苷可能通過活化AMPK，抑制 Akt/mTOR 通路，促進心肌組織自噬[13]。葛根素可以保護細胞免受氧化應激[4，可通過減少葡萄糖和脂質代謝紊亂來降低妊娠糖尿病大鼠TNF- σ?α∝ 的表達并改善胰島素抵抗[15]。葛根還能夠抑制信號通路相關蛋白的活化和炎癥介質的釋放，進而發揮抗炎作用[。本研究中 DKD+ 高濃度中藥組的 Scr 和BUN均下降，并且與DKD ⁺ AICAR組相當水平，這說明六味糖克湯可延緩腎功能進展。可能是通過上述作用機理改善腎功能、抑制炎癥反應。

在糖尿病腎病發病過程中炎癥因子參與多個信號通路的傳導[]TNF- σ?α∝ 是炎癥中樞信號通路，通常被多種應激刺激激活，包括糖尿病、肥胖和氧化應激[8]TNF- σ?α∝ 的激活可以誘導許多細胞因子的轉錄，如MCP-1和白細胞介素系統[19]。巨噬細胞的激活也在DN炎癥損傷中起著關鍵作用2。M1巨噬細胞產生大量促炎細胞因子 iNOS，TNF-α，MCP-1 和其他促炎介質，從而放大炎癥，導致DN發病過程中進一步損傷2。本研究發現，在糖尿病腎臟大鼠腎組織上清液中的腎臟促炎細胞因子IL-6和TNF- σ?α∝ 隨著STZ誘導而增加，而六味糖克湯干預后則降低，這些發現表明六味糖克湯可能通過負向調節作用來減少IL-6和TNF- σ?α?α?α?α 的表達，并且高濃度六味糖克湯干預后更加明顯。

綜上所述，六味糖克湯可以有效降低血糖、改善腎功能，抑制炎癥反應，防止DN的進展。這些發現為臨床使用六味糖克湯治療DN提供了基礎。但仍需要進一步的研究來闡明六味糖克湯在改善DN的發生和發展中的抗炎和抗纖維化作用的精確機制。

參考文獻：

[1]MatobaK，TakedaY，NagaiY，etal.Unravelingtheroleofinflammation in the pathogenesis of diabetic kidney disease[J].Int J Mol Sci，2019，20（14）：3393.

[2]Jiang H，Shao X，Jia S，et al.The mitochondria -targeted metabolic tubular injury indiabetic kidney disease[J].Cell Physiol Biochem，2019，52（2）：156-160.

[3]Wei PZ，Szeto CC.Mitochondrial dysfunction in diabetic kidney disease[J].Clin Chim Acta，2019，496：108-116.

[4]FlemmingN，PernoudL，ForbesJ，etal.Mitochondrial dysfunctionin individuals with diabetic kidney disease：a systematic review[J].Cells，2022，11（16）：2481.

[5]Sherkhane B，Kalvala AK，Arruri VK，et al.Renoprotectivepotential of myo-inositol on diabetic kidney disease：focus on therole of the PINK1/Parkin pathway and mitophagy receptors[J].J Biochem Mol Toxicol，2022，36（6）：e23032.

[6]Massolini BD，Contieri SSG，Lazarini GS，et al.Therapeutic renin inhibition in diabetic nephropathy-a review of the physiological evidence[J].Front Physiol，2O2O，11：190.

[7]樊乃境，王冬梅，高悅，等.山藥蛋白肽對免疫能力低下小鼠 的免疫調節作用[].食品與發酵工業，2020，46（6）：101-107.

[8]HardingJL，PavkovME，Magliano DJ，etal.Global trends in diabetescomplications：areview of current evidence[J].Diabetologia，2019，62：3-16.

[9]趙曉龍，賈天琦，滕巖.玻璃體注射康柏西普聯合激光光凝術治療增殖性糖尿病視網膜病變的效果及對視力功能的影響[].臨床誤診誤治，2022，35（11）：98-101.

[10]Ikio Y，Sagari A，Nakashima A，etal.Efficacyofcom-bined hand exercise intervention in patients withchemotherapy-induced peripheral neuropathy：A pilotrandomized controlled trial [J].Supportive Care in Cancer，2022，30（6）：4981-4992.

[11]高宏宇，張國英，劉秋菊，等.沙利度胺減輕腎病綜合征小鼠 腎臟纖維化[].基礎醫學與臨床，2021，41（9）：1291-1296.

[12]Du Y，Xu BJ，Deng X，et al.Predictive metabolic signatures for the occurrence and development of diabetic nephropathy and the intervention of Ginkgo biloba leaves extract based on gas or liquid chromatography with mass spectrometry].J Pharm Biomed Anal，2019，166：30-39.

[13]饒小娟，吳毓敏，王彥，等.麥冬皂苷介導AMPK/Akt/mTOR 通路對糖尿病大鼠心肌細胞自噬的影響.中國循證心血管醫 學雜志，2018，10（11）：1362-1367.

[14]XiongFL，Sun XH，Gan L，et al.Puerarin protectsrat pancreatic islets from damage by hydrogen peroxide[J].EurJPharmacol，2006，529（1-3）：1-7.

[15]XuW，TangM，WangJ，etal.Anti-inflammatoryactivitiesof puerarin in high-fat diet-fed rats with streptozotocin-induced gestational diabetes mellitus[J].Mol Biol Rep，2020，47（1O）：7537- 7546.

[16]楊建宇，李楊，范竹雯，等.道地藥材懷牛膝的研究近況[].光 明中醫，2020，35（5）：786-789.

[17]Xie W，Burke B.Nuclear lamins and diabetes melitus [J]. STEMedicine，2020，2（5）：e73.

[18]HaraguchiR，KoharaY，MatsubayashiK，etal.Newinsights into the pathogenesis of diabetic nephropathy：proximal renal tubules are primary target of oxidative stressin diabetic kidney [J].Acta Histochem Cytochem，2020，53（2）：21-31.

[19]Akinnuga AM，Siboto A，Khumalo B，et al.Ameliorative effects of Bredemolic acid on markers associated with renal dysfunction ina diet-induced Prediabetic rat model [J].Oxid Med Cell Longev，2020，2020：2978340-2978312.

[20]Chen T，Cao Q，Wang Y，et al.M2 Macrophagesin Kidney Disease：Biology，Therapies，and Perspectives[J].KidneyInt， 2019，95（4）：760-773.

[21]Samsu N.Diabetic Nephropathy：Challenges in Pathogenesis，Diagnosis，and Treatment[J].BioMed ResInt，2021，2021： 1497449.

收稿日期：2024-04-29；修回日期：2024-06-03

編輯/肖婷婷