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一株鴨疫里默氏桿菌病診斷治療

2025-07-25 00:00:00周沛袁翠平何彩美謝永平賀會利
中國動物保健 2025年5期
關(guān)鍵詞:氏桿菌菌落平板

鴨疫里默氏桿菌病是由鴨疫里默氏桿菌(Riemerellaanatipestifer,RA)引起的一種水禽急性接觸性敗血傳染病,主要感染鴨、鵝和火雞等禽類。鴨疫里默氏桿菌病主要危害1\~8周齡的幼禽,成年禽類通常不易感。該病可通過飲水、飼料以及帶菌成年禽類等多種途徑傳播,具有極高的發(fā)病率,死亡率可達 5%~75% ,且患病幼禽常表現(xiàn)為發(fā)育不良[1。隨著水禽養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,該病的防控日益受到重視。然而,由于鴨疫里默氏桿菌病的血清型眾多,且各型之間缺乏交叉免疫保護,疫苗防控效果有限,因此藥物治療仍是關(guān)鍵手段。本研究以廣西靈山某鵝場為研究對象,通過細菌分離培養(yǎng)和藥敏試驗等方法,分析了該場鴨疫里默氏桿菌病的耐藥特性,為其臨床合理用藥提供了科學(xué)依據(jù)。

1方法

1.1病料

2025年廣西靈山某種鵝養(yǎng)殖場發(fā)生了大規(guī)模雛鵝死亡的情況。雛鵝在10日齡左右出現(xiàn)死亡,技術(shù)員進行小鵝瘟疫苗緊急接種,同時使用氟苯尼考、多西環(huán)素進行治療,治療后情況未出現(xiàn)好轉(zhuǎn),截至35日齡時死亡率達到 68.2% 出現(xiàn)坡腳、包心包肝等癥狀。養(yǎng)殖戶送檢生病雛鴨,無菌采集病鴨肝臟、脾臟、腎臟、腦等組織器官,置于4℃條件下低溫保存。

1.2檢測試劑

巧克力平板培養(yǎng)基購于環(huán)凱生物科技有限公司,胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)、胰蛋白酶大豆肉湯(TSB)、麥康凱培養(yǎng)基(MAC)、LB營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基購自青島海博生物科技有限公司;100bpDNAMarker和2 × Rapid TaqPlusMasterMix購于諾唯贊生物科技有限公司;藥敏試紙片購自杭州微生物試劑有限公司。

1.3檢測引物序列信息

參考NCBI中鴨疫里默氏桿菌(RA)、鵝星狀病毒(GAstV)和鵝細小病毒(GPV)等保守基因,合成引物,引物序列如表1所示。

1.4細菌分離鑒定

使用接種環(huán)無菌采集肝臟內(nèi)部以及腦部細菌接種于巧克力平板和MAC平板上,置于 5% CO2 、 37°C 條件下的溫箱培養(yǎng)24h后,觀察菌落形態(tài),挑選純化后的單菌落進行革蘭氏染色,觀察細菌形態(tài)。

1.5病料PCR檢測

將收集的組織病料充分研磨,取上清,將組織上清和

表1引物序列信息表
* 基金項目:基本科研業(yè)務(wù)費專項(桂科專項25-5)

培養(yǎng)的細菌菌液一起進行DNA提取,按照Taq酶說明書要求進行PCR擴增,擴增后的產(chǎn)物進行 2% 瓊脂糖電泳。

1.6細菌藥物敏感性測定

參照《獸醫(yī)微生物學(xué)實驗指導(dǎo)》圓紙片擴散法以及抗微生物藥物敏感性試驗執(zhí)行標(biāo)準(CLSI)進行細菌藥物敏感性測定,檢測對獸醫(yī)常用17種抗生素的敏感性。

2結(jié)果分析

2.1細菌分離培養(yǎng)

病料分離細菌在巧克力平板上生長良好,在MAC平板上不生長,細菌菌落為白色、呈現(xiàn)濕潤圓形菌落,大小在1mm左右。革蘭氏染色發(fā)現(xiàn),細菌為革蘭氏陰性細菌,兩級濃染短桿菌,初步判斷為鴨疫里默氏桿菌。

圖1分離細菌形態(tài)學(xué)觀察

2.2PCR檢測結(jié)果

PCR檢測發(fā)現(xiàn),對組織研磨上清以及細菌菌液均出現(xiàn)527bp條帶,判定為鴨疫里默氏桿菌感染陽性,鴨星狀病毒和鴨細小病毒陰性。

圖2病料檢測PCR結(jié)果圖

2.3藥敏試驗結(jié)果

藥敏試驗發(fā)現(xiàn),RA對阿莫西林、氨芐西林、頭孢吡肟、慶大霉素、卡那霉素、阿奇霉素、鏈霉素、新霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明和甲氧芐氨嘧啶11種藥物不敏感,對大觀霉素、氟苯尼考、諾氟沙星和磺胺甲噁唑4種藥物中度敏感,對氯霉素和頭孢他啶2種藥物敏感。但因氯霉素為獸藥禁用藥物,因此選用頭孢他啶作為治療首選藥物。

結(jié)語

水禽養(yǎng)殖業(yè)在廣西家禽養(yǎng)殖中占有十分重要的位置,鵝養(yǎng)殖又在水禽養(yǎng)殖業(yè)占有很大比重,廣西鵝養(yǎng)殖主要集中在玉林、北海等地,飼養(yǎng)的主要品種有合浦鵝、獅頭鵝等[2]。在臨床診斷中,因為大腸埃希菌和鴨疫里默氏桿菌感染鵝都可能會導(dǎo)致有纖維素性滲出,出現(xiàn)“包心包肝”癥狀,為了區(qū)別兩種病原,采用MAC平板進行鑒別,大腸埃希菌在MAC平板上生長出粉紅色菌落,而鴨疫里默氏桿菌在MAC平板上不生長,在細菌培養(yǎng)階段就可以快速對兩種病原進行區(qū)分,可以加快診斷以及治療速度,減少細菌診斷誤判情況的出現(xiàn)。

鴨疫里默氏桿菌病及其繼發(fā)感染的防控需要采取綜合管理措施3。首先,應(yīng)選用與當(dāng)?shù)亓餍芯暄逍拖嗥ヅ涞囊呙邕M行免疫接種;其次,通過飼喂?fàn)I養(yǎng)均衡的優(yōu)質(zhì)日糧,并添加微生態(tài)制劑和必需微量元素,全面提升禽群抵抗力;同時,要嚴格做好養(yǎng)殖環(huán)境的衛(wèi)生管理,包括日常定期消毒和疫情發(fā)生時的強化消毒;此外,針對當(dāng)前抗生素濫用導(dǎo)致的耐藥性問題,建議在臨床用藥前先進行藥敏試驗,根據(jù)結(jié)果選擇敏感藥物進行精準治療。這種系統(tǒng)化的防控策略能有效控制疫病的發(fā)生和傳播。

參考文獻:

[1]呂澤昊,韓姍姍,秦立廷,等.3株鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定和耐藥性分析[J].中國獸醫(yī)雜志,2023,59(06):87-92.

[2]周英寧,郝潔,韋英益,等.廣西地區(qū)鴨疫里默氏桿菌的分離鑒定與藥敏試驗分析[J].當(dāng)代畜牧,2018,(33):35-39.

[3]黃海蓮,潘明輝,李烈東,等.一例鴨疫里默氏桿菌病的診斷報告[J].廣西畜牧獸醫(yī),2019,35(04):161-162.收稿日期:2025-03-28

作者簡介:周沛(1976一),女,漢族,助理獸醫(yī)師。研

究方向:動物疫病防控。*通訊作者:賀會利(1987一),女,漢族,碩士,高級獸

醫(yī)師。研究方向:動物疫病防控與病原分子生物學(xué)。

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