具有PDZ結合基序的轉錄共激活因子對乳腺癌細胞增殖和遷移能力的影響及其機制

[摘要］目的探究具有 PDZ 結合基序的轉錄共激活因子（TAZ）對乳腺癌細胞增殖和遷移能力的影響及其分子機制。方法體外培養人乳腺癌細胞MCF7和BT549，分別將其分為 A～J 組和 a～j 組，并分別轉入質粒pcDNA3.1、TAZ、PLKO.1、shTAZ、TAZ + PLKO.1、TAZ + shGLUT3、WT pGLUT3 + pcDNA3.1、WT pGLUT3 + TAZ、pGLUT3mutation + pcDNA3.1 和 pGLUT3 mutation + TAZ。通過細胞克隆形成實驗和Transwell遷移實驗檢測 A～F 組和 a{～f 組細胞克隆形成率和遷移率，通過RT-qPCR實驗檢測 A～D 組和 a～d 組細胞TAZ下游 相對表達水平，通過蛋白質免疫印跡（WB）實驗檢測 A～F 組和 a～f 組GLUT3蛋白表達情況。通過JASPER數據庫預測TAZ-轉錄增強締合域（TEAD）與GLUT3的結合位點，通過雙熒光素酶報告基因實驗檢測G～J 組和 g～j 組細胞相對熒光素酶活性。結果細胞克隆形成實驗結果顯示，B組與A組相比、b組與a組相比，細胞克隆形成率顯著升高 （t=23.04，25.97，Plt;0.05）;L 組與C組相比、d組與c組相比、F組與E組相比、f組與e組相比，細胞克隆形成率顯著降低， （t=9.76～42.68，Plt;0.05） 。Transwell遷移實驗結果顯示，B組與A組相比、b組與a組相比，細胞遷移率顯著升高 （t=30.85，29.44，Plt;0.05） ；D組與C組相比、d組與c組相比、F組與E組相比、f組與e組相比，細胞遷移率顯著降低 （t=12.40～33.08，Plt;0.05） 。雙熒光素酶報告基因實驗結果顯示， H 組與G組相比、h組與 g 組相比，相對熒光素酶活性顯著升高 （F=138.73，222.10，t_LSD=11.09，25.81，Plt;0.05） 。RT-qPCR實驗結果顯示，B組與A組相比、b組與a組相比，細胞中 相對表達水平顯著升高 _t=15.80 、14.53，Plt;0.05 ;D組與C組相比、d組與c組相比細胞中 相對表達水平顯著降低 .Plt;0.05? 。WB實驗結果顯示，B組與A組相比、b組與a組相比，細胞中GLUT3蛋白相對表達水平顯著升高（ ?_t= 2.22、6.50， Plt;0.05 ）;D組與C組相比、d組與c組相比、F組與E組相比、f組與e組相比，細胞中GLUT3蛋白相對表達水平顯著降低 （t=2.67～8.00，Plt;0.05） 。結論TAZ可能通過TEAD結合到GLUT3的啟動子區域，上調GLUT3表達，從而促進乳腺癌細胞增殖和遷移。

[中圖分類號] R737.9 [文獻標志碼] A

Effect of transcriptional coactivator with PDZ-binding motif on proliferation and migration of breast cancer cells and its mechanismWANG Lin， ZHAO Gaoxiang（Schol of Basic Medicine，Qingdao University，Qingdao ，China）

[ABSTRACT]ObjectiveTo explore theefectof thetranscriptionalcoactivator with PDZ-binding motif（TAZ）onthe pro liferationand migrationof breastcancercellsand itsmolecularmechanism.MethodsHuman breastcancercells MCF7and BT549 were cultured in vitro and divided into groups A-J and a-j ，respectively. The cells were transfected with pcDNA3.1， TAZ，PLKO.1， shTAZ，TAZ+PLKO.1，TAZ + shGLUT3，WT pGLUT 3+ pcDNA3.1，WT pGLUT3+TAZ，pGLUT3 mutation+ pcDNA3.1，and pGLUT3 mutation + TAZ. Colony-forming assay （CFA） and Transwell assay were used to determine plating efficiency and migration rate in groups A-F and a一f. Quantitative reverse transcription PCR（RT-qPCR） was used to measure the relative expression of GLUT3 mRNA downstream of TAZ in groups A-D and a-d . The GLUT3 protein expression level in groups A-F and a-f was measured using Western bloting （WB）. The binding site of TAZ transcription enhanced association domain（TEAD）and GLUT3 was predicted using the JASPER database，and the relative luciferase activityof cells in groups G-J （204號 and g-j Was measured using dual luciferase reporter（DLR）assy.ResultsThe resultsof theCFA showed thatthe plating eficiency was significantly higher in groups B/b than in groups A/a （t=23.04，25.97，Plt;0.05） ，and significantly lower in groups D/ d and F/f than in groups c/c and E/e （t=9.76-42.68，Plt;0.05） . The results of the Transwell assay showed that the cell migration rates were significantly higher in groups B/b than in groups A/a （t=30.85，29.44，Plt;0.05） ，and significantly lower in groups D/d and F/f than in groups C/c and E/e ′=12.40-33.08，Plt; 0.05）.The results of the DLR assay showed that the relative luciferase activity was significantly higher in groups H/h than lin groups G/g ?F=138.73，222.10，t_LSD=11.09，25.81，Plt;0.05） .The RT-qPCRresults showed that the relative expresion levels of GLUT3 mRNA were significantly higher in groups B/b than in groups A/a （t=15.80，14.53，Plt;0.05） ，and significantly lower in groups D/d than in groups C/c ？ ′=4.33，4.11，Plt;0.05） .The results of the WBshowedthattherelative expressionlevelsofGLUT3 were significantlyhigherin groups B/bthanin groups A/a （2號 （t=2.22，6.50，Plt;0.05） ，and significantly lower in groups D/d and F/f than in groups C/c and E/e （ t=2.67-8.00 Plt;0.05 ） ConclusionTAZ may bind to the GLUT3promoterregion through TEAD toupregulateGLUT3 expression，thus promoting the proliferation and migration of breast cancer cells.

[KEY WORDs]Breast neoplasms；Transcriptional coactivator with PDZ-binding motif proteins;Glucose transporter type 3; Cell movement；Cell proliferation；In vitro techniques

乳腺癌是女性中最常見的惡性腫瘤之一[1]，該疾病在分子層面和組織層面表現出顯著的異質性。近幾年研究表明，Hippo通路的失調與乳腺癌的轉移和發生發展密切相關[2-4]，具有PDZ 結合基序的轉錄共激活因子（TAZ）作為該通路下游的關鍵效應分子發揮重要作用[5]。進一步研究表明，TAZ能與轉錄增強締合域（TEAD）家族形成復合物結合到基因增強子上，調節RNA聚合酶I以促進或抑制靶基因的表達，從而影響腫瘤細胞的代謝活動[6-8]。多項研究結果表明，腫瘤細胞中葡萄糖轉運蛋白（GLUT）的表達水平會在缺氧或炎癥微環境的影響下發生變化[9-1]。其中GLUT3以高親和力和強大的運輸能力攝取葡萄糖，在多種腫瘤組織中呈現高表達，參與腦膜瘤、乳腺癌等的增殖和遷移等生物學過程[12-13]，然而目前對TAZ與GLUT3之間的調控關系及其對乳腺癌的具體作用機制尚不清楚。本研究旨在通過探究TAZ對乳腺癌細胞的增殖和遷移能力的影響及其具體分子機制，為乳腺癌的治療提供新方向。

1材料與方法

1.1 實驗材料

人乳腺癌細胞MCF7和BT549購自美國菌種保藏中心，DMEM培養基購自美國Hyclone公司，鏈霉素、青霉素以及胎牛血清購自美國Gibco公司，轉染試劑Lipofectamine3000 和H400O 購自北京英格恩生物科技有限公司，Trizol試劑購自山東思科捷生物技術有限公司，逆轉錄酶試劑盒購自上海碧云天生物技術有限公司，高保真PCR試劑盒購自日本TOYOBO公司，限制性內切酶以及T4連接酶購自美國ThermoScientific公司，質粒小提試劑盒購自天根生化科技（北京）有限公司，BCA定量試劑盒購自南京諾唯贊生物科技股份有限公司，ECL發光液購買于上海雅酶生物醫藥科技有限公司，GLUT3抗體購自美國SantaCruz公司，β-肌動蛋白（ β actin）抗體以及二抗購自美國CST公司，雙熒光素酶報告基因試劑盒購自上海碧云天生物技術有限公司。

1.2 質粒構建

TAZ質粒由本實驗室構建，首先通過PCR擴增得到TAZ基因目的片段cDNA，而后用限制性內切酶切割目的片段和載體質粒并用T4連接酶連接，最后轉入宿主細菌中，進行篩選并鑒定以后，按照質粒小提試劑盒說明書提取質粒。TAZ基因的引物序列：F： 5^′ -CGGGATCCGCCACCATGAATC-CGGCCTCGGCGC- 3^′ ， R：5^′ -TCGACTCGAGCAG-CCAGGTTAGAAAGGGCTCAC- 3^′ 。pcDNA3.1、PLKO.1、shTAZ、shGLUT3、WT pGLUT3 以及pGLUT3mutation質粒由生工生物工程（上海）股份有限公司構建。

1.3 細胞分組及處理

人乳腺癌細胞MCF7和BT549置于含有 10% 胎牛血清、 青霉素和 100g/L 鏈霉素的DMEM培養基（DMEM完全培養基），于 、含體積分數 0.05CO₂ 的細胞培養箱中培養。當細胞密度達到 60%～70% 時，將MCF7細胞分為 A～F 組，將BT549細胞分為 a～f 組，使用Lipofectamine3000向細胞內轉染相應的質粒。A組和a組轉染pcDNA3.1，B組和b組轉染TAZ，C組和c組轉染PLKO.1，D組和d組轉染shTAZ，E組和e組轉染TAZ以及PLKO.1，F組和f組轉染TAZ以及shGLUT3。轉染后第 6～8 小時時各組細胞更換新的DMEM完全培養基，轉染 ^48h 時收集細胞進行后續實驗。

1.4 細胞克隆形成實驗檢測各組細胞克隆形成率

將 A～F 組和 a～f 組細胞按每孔約300個細胞密度接種于6孔板中，加入 3mL DMEM完全培養基，置于 、含體積分數 0.05CO₂ 的細胞培養箱中培養。每隔 3～5d 更換一次培養基，持續培養2～3 周。當6孔板中出現肉眼可見的克隆時終止培養，棄去培養基，每孔以 4% 多聚甲醛固定 ¹h ，適量結晶紫溶液染色 20～40min 后，肉眼計數克隆細胞數并計算克隆形成率。克隆形成率 （克隆細胞數/接種細胞數） ×100% 。

1.5Transwell遷移實驗檢測各組細胞遷移率

Transwell小室鋪基質膠，置于細胞培養箱中孵育 。使用DMEM完全培養基養基重懸 A～F 組以及 a～f 組細胞，使細胞懸液中細胞密度為 5× 10⁸ 個/L。向上層Transwell小室內加入 200μL 細胞懸液，下層24孔板內加入 600μL DMEM完全培養基，置于 、含體積分數 0.05CO₂ 細胞培養箱中培養 48h 。取出Transwell小室，以 4% 多聚甲醛避光固定 ，適量結晶紫溶液染色 20min 。普通倒置顯微鏡下進行拍照，觀察各組遷移細胞數并計算細胞遷移率。細胞遷移率 = （遷移細胞數/接種細胞數） ×100% 。

1.6實時熒光定量PCR（RT-qPCR）實驗檢測各組細胞 相對表達水平

使用Trizol試劑提取 A～D 組細胞中的總RNA，并按照逆轉錄試劑盒說明書將總RNA逆轉錄得到cDNA。以cDNA作為模板進行RT-qPCR，程序設置： 95°C 預變性 30s;95°C 變性 15s，60^°C 退火/延伸 30s ，循環40次。以 β actin為內參基因，采用 2^-ΔΔCT 方法計算目的基因的相對表達水平。引物名稱及序列見表1。

1.7 蛋白質免疫印跡（WB）實驗

轉染 ^48h 的A組 ～F 組、a組 ～f 組細胞以PBS清洗2次，細胞裂解液提取細胞總蛋白，BCA法檢測各組的蛋白濃度，SDS-PAGE電泳并轉至PVDF膜， 5% 脫脂奶粉室溫封閉 ¹h ，加人GLUT3一抗于 4^°C 下置于搖床孵育過夜。加人二抗室溫孵育 ，用ECL發光液曝光并使用化學發光系統讀取蛋白條帶。使用ImageJ軟件分析目的蛋白條帶及內參 β -actin條帶灰度值，并計算目的蛋白的相對表達水平。目的蛋白相對表達水平 °leddash 目的蛋白條帶灰度值/β-actin條帶灰度值。

1.8 雙熒光素酶報告基因實驗

在JASPER網站對TAZ-TEAD與GLUT3啟動子之間的結合位點進行預測。將擴增的GLUT3基因啟動子序列（CACAGAATTCCG）插入pGL3-basic載體中以構建野生型質粒WTpGLUT3，然后將GLUT3的啟動子突變序列（CGTATAGTCC-AG）插入到pGL3-basic載體當中以構建突變型質粒pGLUT3mutation。而后將培養至細胞密度為60%～70% 的MCF7和BT549細胞分別分為 G～J 組和 g～j 組，使用H4000向細胞內轉染相應的質粒。G組和 g 組轉染WT pGLUT3 和 pcDNA3.1，H組和 h 組轉染WTpGLUT3和TAZ，I組和i組轉染pGLUT3 mutation 和 pcDNA3.1，J組和j組轉染pGLUT3mutation和TAZ。將上述各組細胞置于 、含體積分數 0.05CO₂ 的細胞培養箱中培養 ^48h ，而后按照雙熒光素酶報告基因試劑盒說明書檢測，并計算各組細胞的相對熒光素酶活性值。

1.9 統計學處理

數據分析使用GraphPadPrism8.3.O軟件，計量資料以 表示，兩組間比較采用配對 Ψ_t 檢驗；多組間比較采用單因素方差分析，進一步組間兩兩比較采用LSD- ?t 檢驗。以 Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1TAZ對乳腺癌細胞增殖和遷移的影響

A組和B組細胞克隆形成率分別為 （2.33± 0.67）% 和 （21.67±1.67）% ，細胞遷移率分別為（26.92±3.41）% 和 （82.58±6.03）%， B組細胞克隆形成率和細胞遷移率均顯著高于A組 、30.85，Plt;0.05） 。a和 b 組細胞克隆形成率分別為（1.86±0.70）% 和 （21.89±2.01）% ，細胞遷移率分別為 （28.25±2.05）% 和 （88.50±3.28）%， b組細胞克隆形成率和細胞遷移率顯著高于a組（ ζ=25.97 ！29.44， Plt;0.05） 。C和D組細胞克隆形成率分別為（13.22±1.02）% 和 （1.44±0.20）% ，細胞遷移率分別為 （77.50±4.00）% 和 （38.00±1.56）% ，D組細胞克隆形成率和細胞遷移率顯著低于C組 χ=24.42 、12.40，Plt;0.05） 。c和d組細胞克隆形成率分別為（11.67±1.00）% 和 （1.55±0.69）% ，細胞遷移率分別為 （85.58±2.26）% 和 （44.42±0.52）%， d組細胞克隆形成率和細胞遷移率顯著低于c組（ Φ_t=16.34 、33.08，Plt;0.05） 。見圖1、2。

2.2TAZ對GLUT3mRNA和蛋白相對表達水平的影響

A和B組細胞中 的相對表達水平分別為 4.83±1.00，6.89±0.37，GLU JT3蛋白相對表達水平分別為 0.56±0.12，0.83±0.15，B 組上述指標顯著高于A組 （t=15.80，2.22，Plt;0.05） 。a和b組細胞中 的相對表達水平分別為 3.84±1.00，5.65±0.33 ，GLUT3蛋白相對表達水平分別為 0.56±0.12，0.90±0.10，b 組上述指標顯著高于a組 （t=14.53，6.50，Plt;0.05） 。C和D組細胞中 的相對表達水平分別為1.04±1.00，0.23±0.37，GL UT3蛋白相對表達水平分別為 0.77±0.06，0.37±0.12，D 組上述指標顯著低于C組 （t=4.33，4.00，Plt;0.05） 。c和d組細胞中 的相對表達水平分別為 1.17± 1.01，0.23±0.31 ，GLUT3蛋白相對表達水平分別為 0.83±0.15，0.37±0.12，d 組上述指標顯著低于c組 （t=4.11，3.21，Plt;0.05） 。見圖3。

2.3 TAZ-TEAD對GLUT3基因啟動子區域的靶向作用

JASPER數據庫預測TAZ-TEAD與GLUT3的結合位點序列為CACAGAATTCCG。雙熒光素酶報告基因實驗結果顯示， G～J 組細胞相對熒光素酶活性值分別為 0.96±0.21，5.96±0.67，0.96± 0.15，1.00±0.17 ，各組細胞相對熒光素酶活性比較差異具有顯著性 （F=138.73，Plt;0.05） ；其中，H組相對熒光素酶活性顯著高于G組 （t_LSD=11.09，Plt; 0.05），I組與J組的相對熒光素酶活性無顯著差異L （Pgt;0.05） 。 g～j 組細胞相對熒光素酶活性值分別為 1.03±0.21?6.27±0.51?1.06±0.15?1.00±0.20 各組比較差異具有顯著性 （F=222.10，Plt;0.05） ;其中， h 組相對熒光素酶活性顯著高于 Φ_g 組 Δ_tLSD= 25.81， ，i組與j組比較無顯著差異（ Pgt; 0.05）。

2.4GLUT3在TAZ調控乳腺癌細胞增殖和遷移中的作用

E、F組細胞中GLUT3蛋白相對表達水平分別為 ，細胞克隆形成率分別為0 （16.22±0.51）% ！ （7.76±0.80）% ，細胞遷移率分別為 （72.08±2.88）%.（24.67±2.50）%，F 組上述指標均顯著低于E組 （t=8.00～42.68，Plt;0.05） 。e、f組細胞當中GLUT3蛋白的相對表達水平分別為0.83±0.06，0.60±0.10 ，細胞克隆形成率分別為0 （22.55±2.03）% 、 （9.78±1.07）% ，細胞遷移率分別為 （93.92±1.28）% 1 （40.00±2.22）% f組上述指標均顯著低于e組 Ω_t=2.67～29.88 。見圖4～6 。

3討論

乳腺癌作為全球發病率最高的惡性腫瘤之一，也是女性癌癥致死率最高的病種之一。研究表明，20%～30% 的乳腺癌患者在確診和原發腫瘤治療后可能發生轉移，而遠處重要器官的轉移是導致患者預后不良和死亡的主要原因[14-15]。Hippo 信號通路在乳腺癌的發生發展和轉移中具有重要作用，該通路下游的關鍵效應分子TAZ是一種轉錄共激活因子，在人類惡性腫瘤發生發展中發揮關鍵作用，受到Hippo 通路的負向調控[16-17]。TAZ 因缺乏DNA結合結構域，需要通過與TEAD結合從而發揮其轉錄調控功能[18-19]。多項研究發現，TAZ的激活能夠誘導腫瘤干細胞的形成，顯著促進腫瘤細胞的增殖和轉移，在腫瘤發生發展的多個階段發揮重要的作用[20]。在乳腺癌干細胞中，TAZ缺失能夠顯著抑制乳腺癌細胞的轉移性生長[21]；敲低TAZ能夠調節細胞內肌動蛋白細胞骨架，從而抑制乳腺癌細胞遷移[22]；去泛素化酶2可通過直接去泛素化作用激活TAZ，促進乳腺癌的轉移[23]。上述研究均表明TAZ能夠促進乳腺癌的發生發展，本研究在此基礎上進一步探究TAZ促進乳腺癌細胞增殖和遷移的分子機制。

本研究首先在 A～F 組和 a～f 組中分別轉入質粒pcDNA3.1、TAZ、PLKO.1、shTAZ、TAZ + PLKO.1、TAZ + shGLUT3，其中TAZ質粒的空載對照為pcDNA3.1，shTAZ和shGLUT3質粒的空載對照為PLKO.1。通過細胞克隆形成實驗以及Transwell遷移實驗檢測各組細胞的增殖和遷移能力，結果顯示，與A組和a組相比較，過表達TAZ的B組和b組中細胞的克隆形成率和遷移率增加；與C組和c組相比較，敲低TAZ的D組和d組中細胞的克隆形成率和遷移率降低，說明TAZ上調能夠促進乳腺癌細胞的增殖和遷移。

為了探究TAZ影響乳腺癌細胞增殖和遷移的具體機制，本研究通過JASPER網站預測并篩選出TAZ-TEAD下游的靶基因可能為GLUT3。相關研究報道顯示，Yes相關蛋白（YAP）可以通過調節GLUT3/AMPK信號通路促進結直腸癌細胞的增殖和遷移[24]，GLUT3的過表達可通過調節腫瘤微環境促進三陰性乳腺癌轉移[25]，這些研究均表明GLUT3的表達水平在乳腺癌的遷移過程中起著至關重要的作用。本研究通過RT-qPCR實驗對TAZ與GLUT3之間的靶向作用關系進行驗證，結果顯示，與A組和a組相比，過表達TAZ的B組和b組中GLUT3表達水平明顯上調；與C組和c組相比，敲低TAZ的D組和d組中GLUT3表達水平明顯下調，提示GLUT3為TAZ下游靶基因，TAZ可能通過上調GLUT3的表達促進乳腺癌細胞遷移。為了進一步探究GLUT3和TAZ之間的關系，本研究進行了雙熒光素酶報告基因實驗，結果顯示，轉染質粒WTGLUT3＋TAZ的H組和h組細胞相對熒光素酶活性相比于其對照組G組和 Φ_g 組顯著升高，而轉染質粒pGLUT3mutation + TAZ的J組和j組細胞相對熒光素酶活性則與其對照組I組和i組無顯著差異。這些結果提示TAZ可以通過TEAD結合到GLUT3的啟動子區域，從而促進GLUT3的表達。

為了進一步明確GLUT3在TAZ調節乳腺癌細胞增殖和遷移過程中的作用，本研究在過表達TAZ的同時敲低GLUT3，以證明TAZ是否通過調節GLUT3表達從而促進乳腺癌細胞的增殖和遷移。實驗結果顯示，與E組和e組相比，F組和f組中敲低GLUT3會顯著抑制TAZ過表達引起的乳腺癌細胞增殖和遷移。上述結果提示，TAZ能夠通過上調GLUT3表達來促進乳腺癌細胞遷移，表明GLUT3在TAZ促進乳腺癌細胞的遷移過程中發揮重要作用。

綜上所述，TAZ可能通過TEAD從而結合到GLUT3的啟動子區域，上調GLUT3表達，進而促進乳腺癌細胞增殖和遷移。本研究在一定程度上揭示了TAZ促進乳腺癌發生發展的新型分子機制，有望為乳腺癌的臨床治療提供潛在的治療靶點和新的研究方向。

作者聲明：趙高翔、王琳參與了研究設計；趙高翔、王琳參與了論文的寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發表該論文，且均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻]

[1]GRADISHAR W J，MORAN M S，ABRAHAM J，et al. Breast cancer，version 3.2O24，NCCN clinical practice guidelines in oncology[J]. J Natl Compr Canc Netw， 2024，22（5） ： 331-357.

[2]EMANUELLE PEREIRA SANTOS V， LUIZ DE FRANCA NETO P，EDA DE OLIVEIRA ISIDIO B，et al. An overview about biomarkers in breast cancer： Insights into the diagnostic and prognostic significance[J]. Clin Chim Acta，2025，567： 120030.

[3]WEI C R，WANG Y，LI X Q. The role of Hippo signal pathway in breast cancer metastasis[J].Onco Targets Ther，2018， 11：2185-2193.

[4]CALSES P C， CRAWFORDJJ， LILL JR， et al. Hippo pathway in cancer： Aberrant regulation and therapeutic opportunities[J]. Trends Cancer，2019，5（5）：297-307.

[5]ZHANG ZQ， LUO ZY， HUANG H Z， et al. YAP/TAZ inhibitor-based drug delivery system for selective tumor accumulation and cancer combination therapy[J]. Biomacromolecules ， 2025，26（1） ：266-278.

[6] CHEN L M， CHAN S W， ZHANG X Q， et al. Structural basis of YAP recognition by TEAD4 in the hippo pathway[J]. Genes Dev，2010，24（3）：290-300.

[7] ZANCONATO F，FORCATO M，BATTILANA G，et al. Genome-wide association between YAP/TAZ/TEAD and AP-1 at enhancers drives oncogenic growth[J]. Nat Cell Biol，2015， 17（9）：1218-1227.

[8]KOO J H， GUAN K L. Interplay between YAP/TAZ and me tabolism[J]. Cell Metab，2018，28（2）：196-206.

[9]TUFAIL M，JIANG C H，LI N. Altered metabolism in cancer：Insights into energy pathways and therapeutic targets[J]. Mol Cancer，2024，23（1） ：203.

[10] WU W Z，BAI Y P. Endothelial GLUTs and vascular biology [J].Biomed Pharmacother，2023，158：114151.

[11] ANCEY P B， CONTAT C，MEYLAN E. Glucose transporters in cancer---From tumor cells to the tumor microenvironment[J].FEBS J，2018，285（16） ：2926-2943.

[12] ZHANG P，MISKA J，HEIMBERGER A B. GLUT3 regulates alternative macrophage signaling through a glucose transport-independent role[J].J Clin Invest，2023，133（21）： e174540.

[13］YU D M，ZHAO JW，LEE E E，et al. GLUT3 promotes macrophage signaling and function via RAS-mediated endocytosis in atopic dermatitis and wound healing[J]. J Clin Invest， 2023，133（21） ：e170706.

[14] RAGHAVENDRA A S， IBRAHIM N K. Breast cancer brain metastasis：A comprehensive review[J]. JCO Oncol Pract， 2024，20（10）：1348-1359.

[15]SUNMS，YUNYY，LIUHJ，etal.Brain metastasisinde novo breast cancer：An updated population-level study from SEER database[J]. Asian J Surg，2022，45（11）：2259-2267.

[16]JUAN W C，HONG WJ.Targeting the hippo signaling pathway fortissue regeneration and cancertherapy[J].Genes（Basel），2016，7（9）：55.

[17]KODAKA M，HATA Y. The mammalian Hippo pathway： Regulation and function of YAP1 and TAZ[J].Cell Mol Life Sci，2015，72（2）：285-306.

[18]HANSENCG，MOROISHIT，GUANKL.YAPandTAZ： Anexus forHippo signaling and beyond[J].Trends Cell Biol， 2015，25（9）：499-513.

[19]IBAR C，IRVINE K D. Integration of hippo-YAP signaling withmetabolism[J].DevCell，2020，54（2）：256-267.

[20] HONG A W，MENG Z P，GUAN KL. The Hippo pathway inintestinal regeneration and disease[J].Nat Rev Gastroenterol Hepatol，2016，13（6）：324-337.

[21]BARTUCCIM，DATTILOR，MORICONIC，etal.TAZis required formetastaticactivityand chemoresistanceof breast cancer stem cells[J].Oncogene，2015，34（6）：681-690.

[22]CHOI H S，JANG HJ，KRISTENSEN MK，et al. TAZ is involved in breast cancer cell migration via regulating actin dynamics[J].FrontOncol，2024，14：1376831.

[23] ZHANG Z K，DU JJ，WANG S，et al. OTUB2 promotes cancer metastasisvia hippo-independentactivation ofYAPand TAZ[J].Mol Cell，2019，73（1）：7-21.

[24]JIANGL H，ZHANGJW，XU Q X，et al. YAP promotes the proliferation and migration of colorectal cancer cells through the Glut3/AMPK signaling pathway[J]. Oncol Lett， 2021，21（4）：312.

[25]TSAI TH，YANGCC，KOU TC，etal.Overexpression of GLUT3 promotes metastasis of triple-negative breast cancer bymodulating the inflammatory tumor microenvironment[J]. JCellPhysiol，2021，236（6）：4669-4680.

（本文編輯李京蔓厲建強）