柱前衍生HPLC法分析煙葉水溶性多糖的單糖組成

，(1.，廈門；2.，廈門361005）

中圖分類號： 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1007-5119（2025）02-0052-08

Analysis of Monosaccharide Composition of Tobacco Water-soluble Polysaccharides by Pre-column Derivatization HPLC

ZHAO Yan12，HUANG Yanjun1，LIU Xiucai1， HUANG Huafa1， LIU Jiangsheng1， YE Zhonglil， ZHANG Tingguil，LIU Zechun1， XIE Wei1*，LI Yaoqun2* (1.TechnologyCenterofChinaTobaccoFujianIndustrialCo.，Ltd.，Xiamen36101，China;2.ColegeofChemistryandCheical Engineering， Xiamen University， Xiamen 3610o5， China)

Abstract:Adeterminationmethod was established forthe monosaccharide compositionandcontentof tobaco water-soluble polysacharides by1-phenyl-3-methyl-5-imdazolinone(PMP)pre-columnderivatizationhigh performance liquidchromatography. Completeacidhydrolysis method was employedtohydrolyze tobacco water-solublepolysaccharides，andthe hydrolysis products weresubjectedtoPMPderivatizationreaction.Thesignalofmonosaccharidederivativesof tobacowater-solublepolysaccharides afteracid hydrolysis was determinedbyreversephase high-performance liquidchromatography.Themethod wasusedto explorethe monosaccharidecompositionandcontentof tobaccowater-solublepolysaccharidesofdiferentregionsandtypes.Theoptimized detection conditions were as follows: 0 . 0 5 m o l / L phosphate( -NaOH，pH7.O) buffer (solvent A) and acetonitrile (solvent B) were chosen as the mobile phase of elution system at the isocratic elution condition ( 8 4 : 1 6 ) ，with Agilent Eclipse XDB-C18 column ( 2 5 0 m m×4 . 6 m m， ; theUV detection wavelength was 2 5 0 n m .Results showed that the linear relationship is good for the nine monosaccharides in the concentration range of 2 0 . 0-8 0 0 μ g / m L ，with the correlation coefficient .The limits of detection and quantification were 0.07-0.17 and 0 . 2 2 -0 . 5 6 μ g / m L ，respectively. The average recoveriesranged 8 2 . 3 % - 1 0 4 . 0 % in spiked samples.Thetobacowater-solubleposaccharideswerecomposedofmanose (Man)hamose(Rha)，galactose(Gal)aboe (Ara)，glucose(Glc)，glucuronicacid (GlcUA)，and galacturonicacid (GalUA)，with Glcand GalUA acounting forahigher proportion.There were significant differences inthe monosaccharidecompositionof tobaco water-soluble polysaccharides from variousregionsandtypes.Themethodisfast，simple，highlysensitive，andhasgoodrepeatability，thuscanbeused for monosaccharidecompositionanalysisof tobaccopolysaccarides.At thesametime，itprovidesabasisforfurtherresearchonthe structure of tobacco polysaccharides.

Keywords: tobacowater-solublepolysaccharides;pre-coumnderivatizatio;iquidchromatography;monosaccaridecoositon

多糖是不同類型的單糖殘基通過多種類型的糖昔鍵連接而成的天然聚合物，與卷煙感官品質(zhì)息息相關(guān)。卷煙燃燒時(shí)，糖分子斷裂產(chǎn)生甲酸、乙酸等酸性成分[1-2]，能夠調(diào)節(jié)煙氣pH，降低吸食刺激性[3-4]，但一些結(jié)構(gòu)多糖(淀粉、果膠等)熱解燃燒時(shí)會(huì)產(chǎn)生甲醛、苯系物等成分，含量過高會(huì)導(dǎo)致煙葉質(zhì)量及感官品質(zhì)下降[5]。多糖是卷煙香氣形成的重要前體物質(zhì)，在燃燒裂解過程中會(huì)產(chǎn)生醛酮類、呋喃類等致香成分[6-7]。煙葉多糖經(jīng)生物酶部分降解為小分子還原糖，加熱燃燒時(shí)與氨基酸發(fā)生美拉德反應(yīng)，可提升卷煙的焦糖香氣，改善雜氣[8-10]。煙葉多糖富含親水性羥基，具有良好的吸濕性，能夠改善煙葉的保潤性能[11-12]。此外還有研究[13-14]表明，煙葉多糖及改性的煙葉多糖具有顯著抗氧化、清除自由基等生物活性。Chang等[15]最新研究發(fā)現(xiàn)，煙葉多糖能夠通過影響細(xì)胞外泌體中miRNA的表達(dá)來調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)水平，進(jìn)而改善細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過度積累，說明煙葉多糖存在潛在的藥用和功能食品開發(fā)價(jià)值。

單糖是構(gòu)成植物多糖的基本單元，決定植物多糖的帶電性質(zhì)、官能團(tuán)以及空間構(gòu)象，進(jìn)而影響其溶解度、流變性及生物活性，單糖組成及其含量差異還可用于多糖的功能解析[16-17]。富含糖醛酸的多糖與抗氧化、抗炎活性呈正相關(guān)[18-19]，而阿拉伯糖、木糖、甘露糖和半乳糖可能與巨噬細(xì)胞免疫刺激活性相關(guān)[20]，多糖側(cè)鏈的中性單糖如半乳糖、葡萄糖和木糖對腸道益生菌增殖存在貢獻(xiàn)[21]。因此分析煙葉多糖的單糖組成，對于煙葉的高附加值產(chǎn)品開發(fā)具有深遠(yuǎn)意義。

目前植物多糖中單糖組成的測定主要有氣相色譜法、離子色譜法以及液相色譜法[22]。氣相色譜法基于糖醇乙酸酯的衍生化反應(yīng)，但不能對糖醛酸直接衍生化，衍生步驟較為復(fù)雜且易產(chǎn)生副產(chǎn)物，易對目標(biāo)譜峰造成干擾[23-25]。液相色譜法基于PMP衍生化反應(yīng)，可將多糖水解后的單糖衍生為具有紫外吸收性質(zhì)的PMP衍生物，反應(yīng)條件溫和，不易產(chǎn)生異構(gòu)體，產(chǎn)物穩(wěn)定，方法更具普適性[26-29]，可用于煙葉多糖的單糖組成分析。

本研究首次采用柱前衍生高效液相色譜法，以9種不同產(chǎn)地及類型煙葉為材料，對其水溶性多糖的單糖組分和含量差異進(jìn)行探究，以期為煙葉多糖的構(gòu)效研究和功能品質(zhì)評價(jià)提供參考。

材料與方法

1.1材料、試劑和儀器

材料：如表1所示。包括2022年云南楚雄、湖南永州郴州、貴州遵義銅仁、福建龍巖永定、遼寧丹東生產(chǎn)的烤煙，品種為云煙87；福建三明尤溪烤煙，品種為翠碧1號；湖北恩施的白肋煙、云南保山的香料煙及曬黃煙。

試劑：單糖標(biāo)準(zhǔn)品半乳糖醛酸（GaIUA）、葡萄糖醛酸（GlcUA）、D-甘露糖(Man）、D-核糖(Rib）、L-鼠李糖(Rha）、D-無水葡萄糖(Glc）、D-半乳糖（Gal)、D-木糖(Xyl）、L-阿拉伯糖（Ara），麥克林， 9 9 % ，HPLC級；無水乙醇（國藥，分析純）；三氟乙酸(國藥，分析純)；鹽酸(國藥，分析純);氫氧化鈉(阿拉丁，分析純）；1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(國藥，PMP，分析純)；甲醇(百靈威，色譜純)；乙腈(百靈威，色譜純)；磷酸二氫鉀(阿拉丁，色譜純)；三氯甲烷(國藥，分析純)。

儀器設(shè)備：Agilent1260高效液相色譜儀（美國Agilent公司），電子天平（德國賽多利斯公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國Heidolph公司），離心機(jī)（德國Sigma公司），超純水儀（美國Millipore公司）；SYG-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州億通分析儀器制造有限公司）；MultiReax渦旋振蕩器（德國Heidolph公司)；電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏有限公司）。

1.2 方法

1.2.1煙葉多糖的提取采用水提醇沉法[30]。稱取煙絲 2 0 0 g ，按料液比 于冷凝回流裝置中用 $1 0 0 \\ { ^ { \\circ } C }$ 熱水浸提 3 h ，重復(fù)2次，合并兩次所得的濾液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮至 5 0 0 m L （濃縮溫度為 ，轉(zhuǎn)速 ，將濃縮后的溶液 8 0 0 0 r / m i n 條件下離心 ，去除沉淀，取上清液。向上清液中采用慢加快攪的方法緩慢加人無水乙醇至乙醇體積分?jǐn)?shù)達(dá)到 60 % ， 靜置 ， 4 5 0 0 r / m i n 離心 ，收集沉淀。將沉淀采用 9 5 % 乙醇洗滌2次，無水乙醇洗滌1次，收集沉淀， 烘干即得煙葉水溶性多糖。

1.2.2煙葉多糖的水解為提高水解程度，采用完全酸水解法[31]。取 5 m g / m L 的煙葉水溶性多糖溶液 1 m L 于耐壓水解瓶中，加入 2 m o l/ L 的鹽酸甲醇溶液 ，密封，于烘箱 加熱 1 6 h ，氮?dú)獯蹈珊螅尤?2 m o l/ L 三氟乙酸溶液 ，密封后于烘箱中 $1 2 0 \\ { ^ { \\circ } C }$ 加熱1h后取出，冷卻，氮?dú)獯蹈桑磸?fù)加入甲醇吹干去除殘留的三氟乙酸，加水 1 m L 復(fù)溶， 保存。

1.2.3PMP衍生物的制備精確稱取各單糖標(biāo)準(zhǔn)品各 ，加適量水溶解后轉(zhuǎn)移至 1 0 0 m L 容量瓶，分別配制成 1 m g / m L 的單一和混合單糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，使用前根據(jù)試驗(yàn)需求用超純水稀釋，配制成不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

取一定濃度的單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液或煙葉水溶性多糖酸解液 1 m L 于離心管中，加入 0 . 3 m o l / L N a O H 溶液 1 m L ，使單糖堿化，加入 0 . 5 m o l / L PMP甲醇溶液 1 m L ，混合均勻后置于 水浴反應(yīng) 3 0 m i n 取出，冰水浴冷卻 1 0 m i n ，加人 HC1中和，調(diào)至 p H= 7 ，加入 3 m L 三氯甲烷萃取多余的PMP，渦旋混勻， 4 0 0 0 r / m i n 離心 3 m i n ，移棄下層，重復(fù)萃取3次，取上層水相即為PMP衍生物，過 濾膜，待測。

1.2.4HPLC分析 采用Agilent1260 高效液相色譜系統(tǒng)。檢測條件：色譜柱EclipseXDB-C18（ ；進(jìn)樣量 1 0 μ L ；流動(dòng)相為 磷酸鹽緩沖液( ，pH7.0）：乙腈 = 8 4 : 1 6 等度洗脫；檢測波長 ：流速 1 m L/ m i n ；柱溫 0

2結(jié)果

2.1檢測條件的優(yōu)化

如圖1(a)所示，通過優(yōu)化單糖衍生化時(shí)間，對比了 1 0 、 3 0 、 5 0 、 7 0 、 9 0 m i n 衍生化時(shí)間的混合單糖總色譜峰面積，發(fā)現(xiàn) 3 0 m i n 時(shí)峰面積已達(dá)到最大，因此確定最佳衍生化時(shí)間為 3 0 m i n 。設(shè)置磷酸鹽和乙腈的流動(dòng)相比例分別為 8 3 : 1 7 ，8 4 : 1 6 ， 8 5 : 1 5 ，如圖1(b)所示，在流動(dòng)相比例為 8 3 : 1 7 時(shí)，Xyl和Ara的分離度不佳，色譜峰注Note：1，PMP；2，Man；3，Rib；4，Rha；5，GlcUA；6，GalUA；7，Glc；8，Gal；9，Xyl；10，Ara。

發(fā)生重疊現(xiàn)象；當(dāng)流動(dòng)相比例為 8 5 : 1 5 時(shí)，各個(gè)單糖的色譜峰分離完全，但分析時(shí)間過長達(dá) ；流動(dòng)相比例為 8 4 : 1 6 時(shí)，各個(gè)單糖的色譜峰分離度較好，分析時(shí)間在 5 0 m i n 以內(nèi)，滿足分析檢測的要求。此外，果糖( 作為酮糖，其羰基較其他醛糖的醛基更穩(wěn)定，難以與PMP發(fā)生衍生化反應(yīng)[22.32-33]，因此本研究未對果糖進(jìn)行分析。

2.2煙葉水溶性多糖單糖組成成分的確定

將混合單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液與酸解后的煙葉水溶性多糖分別進(jìn)行衍生化反應(yīng)，經(jīng)HPLC檢測，如圖2所示，在混合單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖中，空白PMP色譜峰的保留時(shí)間在 1 1 . 7 m i n ，位于各單糖譜峰保留時(shí)間之前，不會(huì)對目標(biāo)單糖色譜峰造成干擾，9種目標(biāo)單糖組分能夠?qū)崿F(xiàn)基線分離。煙葉水溶性多糖與9種單糖標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖對比后發(fā)現(xiàn)，所提取的煙葉水溶性多糖由Man、Rha、GlcUA、GalUA、Glc、Gal、Ara共7種單糖組成，說明所建立的方法能夠提供煙葉水溶性多糖的單糖組成信息。

2.3方法的線性范圍和檢測限

將不同濃度的9種混合單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液經(jīng)衍生化反應(yīng)后進(jìn)樣測定，以單糖濃度 ( x ) 和峰面積 ( y) 作線性方程，以信噪比 = 3 對應(yīng)的濃度計(jì)算得到檢出限，以信噪比 對應(yīng)的濃度計(jì)算得到定量限。如表2所示，9種單糖的線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99，檢出

圖29種混合單糖標(biāo)準(zhǔn)品與翠碧1號煙葉水溶性多糖的HPLC色譜圖

限范圍為 ，表明所建立的方法具有較高的靈敏度。

2.4 方法精密度

取混合單糖標(biāo)準(zhǔn)品衍生液連續(xù)測定6次，記錄各單糖色譜峰的峰面積，代入線性方程并計(jì)算各單糖含量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。結(jié)果表明，Man、Rib、Rha、GlcUA、GalUA、Glc、Gal、Xyl、Ara含量的RSD值分別為 0 . 2 0 % 、 0 . 3 0 % 、 0 . 9 4 % 、0 . 4 6 % 、 0 . 2 5 % 、 0 . 2 4 % 、 0 . 3 2 % 、 0 . 1 1 % 、 0 . 1 9 % 表明該方法精密度良好。

2.5實(shí)際樣品重復(fù)性

平行移取龍巖云煙87煙葉水溶性多糖溶液6份，經(jīng)完全酸水解和衍生化反應(yīng)進(jìn)行測定，計(jì)算各單糖含量的RSD值。Man、Rha、GlcUA、GalUA、Glc、Gal、Ara含量的RSD值分別為 4 . 8 % 、 5 . 2 % ！6 . 2 % 、 2 . 2 % 、 5 . 6 % 、 5 . 2 % 、 4 . 3 % ，表明該方法應(yīng)用于煙葉水溶性多糖實(shí)際樣品具有良好的重復(fù)性。

2.6 方法穩(wěn)定性

取衍生后的混合單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別在0、4、8、16h進(jìn)樣測定，計(jì)算各單糖含量的RSD值。結(jié)果表明，Man、Rib、Rha、GlcUA、GalUA、Glc、Gal、Xyl、Ara含量的RSD值分別為 2 . 2 % 、 2 . 5 % 、

3 . 8 % 、 1 . 3 % 、 0 . 9 2 % 、 2 . 9 % 、 2 . 1 % 、 2 . 8 % 、 1 . 8 % 表明單糖衍生產(chǎn)物在 1 6 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7實(shí)際樣品再現(xiàn)性

選定3家不同實(shí)驗(yàn)室測定同一批次龍巖云煙87煙葉水溶性多糖樣品，樣品平行測定3次，計(jì)算各單糖含量的RSD值，Man、Rha、GlcUA、GalUA、Glc、Gal、Ara含量的RSD值分別為 6 . 7 % 、6 . 4 % 、 4 . 9 % 、 3 . 8 % 、 6 . 4 % 、 8 . 7 % 、 7 . 0 % ，表明該方法再現(xiàn)性較好。

2.8 實(shí)際樣品加標(biāo)回收率

取 5 m g / m L 煙葉水溶性多糖酸解液，分別加入高、中、低3個(gè)濃度水平的混合單糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)衍生化后測定樣品加標(biāo)后的單糖組成含量，如表3所示，樣品添加不同濃度后的回收率范圍在 8 2 . 3 %～1 0 4 . 0 % 之間，在相同濃度水平下的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于 8 % ，說明所建立的柱前衍生HPLC法適用于煙葉水溶性多糖的單糖組成分析。

2.9 不同品種煙葉水溶性多糖樣品的單糖組成分析

測定結(jié)果表明(表4)，不同品種煙葉水溶性多糖具有相似的單糖組成，包括Glc、Gal、Ara等中性糖，同時(shí)含較高比例的GalUA及少量的GlcUA，說明煙葉水溶性多糖包含中性多糖與酸性多糖(果膠類多糖)組分，但其相對含量存在明顯差異。從不同產(chǎn)地的云煙87煙葉水溶性多糖單糖組成結(jié)果分析，發(fā)現(xiàn)云南、湖南、貴州、福建等產(chǎn)地的Glc含量均達(dá)到 以上，其中福建云煙87的Glc含量最高，達(dá) 1 4 3 . 2 m g / g ，而遼寧云煙87的Glc含量最低，僅為 8 7 . 6 m g / g ；湖南云煙87和云南云煙87的GaIUA較其他產(chǎn)地的更低，說明其酸性多糖含量更低，而遼寧云煙87的GaIUA相對比例較高(含量達(dá) 7 8 . 7 m g / g ），與Glc含量相當(dāng)，預(yù)示煙葉水溶性多糖的單糖含量差異可能與不同產(chǎn)地的生態(tài)環(huán)境、氣候及土壤有關(guān)[34]。對比不同品種烤煙煙葉水溶性多糖(翠碧1號和云煙87)發(fā)現(xiàn)，翠碧1號的Glc與Gal含量高于云煙87，但二者的GaIUA含量基本持平，推測翠碧1號煙葉水溶性多糖是以葡聚糖為主的雜多糖(Glc的含量大于50 % )[35]。通過比較不同類型(烤煙云南云煙87、白肋煙鄂煙1號、香料煙巴斯馬及曬黃煙云曬1號）煙葉水溶性多糖發(fā)現(xiàn)，Glc的含量從高到低依次為：

云南云煙 8 7 > 香料煙 曬黃煙 白肋煙，云煙87與香料煙水溶性多糖的GaIUA的含量幾乎相當(dāng)，曬黃煙和白肋煙水溶性多糖的GaIUA相對更低，白肋煙的單糖總含量最低，其GaIUA含量占較高比例，推測白肋煙水溶性多糖中的酸性多糖占比較高[36]，這可能與煙葉品種的基因型、調(diào)制方式差異有關(guān)[37-39]

3討論

目前煙草糖類研究多側(cè)重于總糖和還原糖，對煙葉多糖的單糖組成分析研究較少，本研究通過優(yōu)化衍生化反應(yīng)時(shí)間和流動(dòng)相條件，成功建立了柱前衍生HPLC法測定煙葉多糖單糖組成的方法，能夠同時(shí)滿足2種糖醛酸與7種中性糖的測定。與舒俊生等[40]的研究相比，本方法可定性檢測的單糖種類更多，分離度更佳；與柱前衍生-氣相色譜法[41]相比，本方法的衍生過程更加簡單，耗時(shí)較短，且方法靈敏度更高。但因Fru無法與PMP發(fā)生衍生化反應(yīng)，本研究方法尚未能實(shí)現(xiàn)對Fru的檢測。

與以往關(guān)于煙葉多糖單糖組成的研究比較，許春平等[2]采用堿提法提取的烤煙煙葉多糖富含GlcUA、Man和Ara等單糖，楊琛琛[42]經(jīng)超聲輔助提取純化的烤煙煙葉多糖組分1以Man、Ara、Gal及Rib為主，并含少量的GalUA和Rha，而白肋煙煙葉多糖包含Man、Gal、Rib、Glc等單糖，不含GalUA。Chang等[15]采用熱水浸提法( 提取的煙葉多糖主要以Glc、Gal、Ara為主。本研究所提取的烤煙煙葉多糖主要由Glc、GaIUA、

Gal、Ara、Rha等組成，白肋煙煙葉多糖主要由GalUA、Gal、Rha等組成，與前人研究結(jié)果存在差異，這可能與煙葉品種、生長環(huán)境及多糖的提取工藝有關(guān)，GaIUA是構(gòu)成煙葉果膠同聚半乳糖醛酸（Homogalacturonan，HG)結(jié)構(gòu)單元線性鏈的單糖，低酯化的HG果膠易與細(xì)胞壁中的 形成“雞蛋-盒子\"交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[43]，短時(shí)間或相對較低溫度的提取條件下果膠不易釋放，而本研究采用沸水連續(xù)浸提法，有利于細(xì)胞壁內(nèi)果膠多糖交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)的水解，這可能是本研究所提取煙葉多糖中GaIUA相對比例較高的原因。單糖組成比例與煙葉結(jié)構(gòu)存在一定的相關(guān)性，煙葉多糖包含果膠、纖維素等大分子細(xì)胞壁物質(zhì)，其單糖組成包含糖醛酸與中性糖等多種單糖，朱曉蘭等[44]研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)果膠酶處理后的煙葉，Ara、Gal、Rha的比例增加，纖維素酶處理后的Glc含量提高，酶處理后苯丙氨酸轉(zhuǎn)化產(chǎn)物均明顯提高，說明煙葉結(jié)構(gòu)性多糖經(jīng)酶解后產(chǎn)生的Ara、Gal、Rha及Glc等中性單糖對煙葉品質(zhì)可能具有正面作用。基于本研究不同煙葉多糖的單糖組成特性，可進(jìn)一步探究不同類型及產(chǎn)地?zé)熑~多糖的熱裂解行為，有望實(shí)現(xiàn)煙草風(fēng)味品質(zhì)的精準(zhǔn)高效調(diào)控。

4結(jié)論

本研究建立了柱前衍生高效液相色譜法測定不同產(chǎn)地及類型煙葉水溶性多糖中常見單糖組成的方法。

(1)采用紫外檢測器，以磷酸鹽緩沖液和乙腈為流動(dòng)相，經(jīng)EclipseXDB-C18色譜柱以 8 4 : 1 6 的體積比等度洗脫，在優(yōu)化后的衍生條件下，同時(shí)分離得到9種單糖組分，在 2 0 . 0～8 0 0 μ g / m L 的線性范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù) ，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在 8 % 以內(nèi)，回收率為 8 2 . 3 % ～ 1 0 4 . 0 % 。所建立的方法具有較好的靈敏度和分辨性，滿足煙葉水溶性多糖單糖組成分析的檢測需求。

(2)考察不同產(chǎn)地及類型煙葉水溶性多糖的單糖組成，發(fā)現(xiàn)煙葉水溶性多糖主要由Glc、GalUA、Rha、Gal、Ara組成，同時(shí)含有少量的Man和GlcUA，不同產(chǎn)地及類型的煙葉水溶性多糖相對含量存在差異，該方法為進(jìn)一步分析煙葉多糖結(jié)構(gòu)與功能的構(gòu)效關(guān)系提供了技術(shù)支撐

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