NM23基因與非小細胞肺癌臨床病理學特征及18F-FDG PET/CT影像特征的相關性

摘要：目的" 比較非小細胞肺癌中NM23基因表達情況不同在其臨床病理學特征、18F-FDG PET/CT影像特征、生存時間的差異。方法" 選擇2018年1月～2022年 12月于新疆醫科大學附屬醫院病理確診為非小細胞癌的107例患者的術后標本，運用免疫組化方法檢測NM23表達情況，分為NM23低表達組（≤++）（n=64）與NM23高表達組（gt;++）（n=43），比較兩組的臨床病理學特征、18F-FDG FDG PET/CT圖像上影像特征、生存期方面的差異。結果" NM23低表達組與高表達組在性別、臨床分期、組織類型、分化程度、吸煙、PET/CT圖像上生長部位、生存時間的差異無統計學意義（Pgt;0.05），但在原發灶分期、PET/CT圖像上淋巴結轉移情況的差異有統計學意義（Plt;0.05）。結論" NM23基因在非小細胞癌患者T分期、淋巴結轉移方面支持其為抑癌基因。

關鍵詞：非小細胞肺癌；NM23基因；臨床病理學特征；正電子發射斷層顯像；生長部位；生存時間

Correlation between NM23 gene expression and the growth site and lymph node metastasis of non-small cell lung cancer in 18F-FDG PET/CT

XIA Luhua1， CHONG Le2， LI Hongyu3， GUO Peng1， DONG Zhanfei1， WANG Xinhua1， CHANG Cheng1

1Department of Nuclear Medicine，" 2Department of Ultrasound Medicine， 3Department of Breast Medicine， Tumor Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University， Urumqi 830011， China

Abstract： Objective To compare the differences in clinicopathologic features， 18F-FDG PET/CT imaging features and survival time among non-small cell lung cancer with different NM23 gene expression profiles. Methods A total of 107 postoperative specimens of patients diagnosed with non-small cell lung cancer at the Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University from January 2018 to December 2022 were selected as the research subjects. Immunohistochemistry was used to detect the expression of NM23， and the patients were divided into two groups： NM23 low expression group （≤++） with 64 cases and NM23 high expression group （gt;++） with 43 cases. The clinical and pathological characteristics， lymph node metastasis， tumor growth site under 18F-FDG PET/CT imaging， and survival period differences between the two groups were compared. Results The low-expression group and high-expression group of the NM23 gene showed no statistically significant differences in terms of gender， clinical stage， histological type， differentiation degree， smoking， PET/CT imaging location of tumor growth and survival time （Pgt;0.05）. There were statistically significant differences" in both the primary tumor stage and the presence of lymph node metastasis on PET/CT imaging （Plt;0.05）. Conclusion NM23 gene is supported as a tumor suppressor gene in non-small cell lung cancer patients in terms of T staging and lymph node metastasis.

Keywords： non-small cell lung cancer; NM23 gene; clinicopathological features; PET/CT; growth site; survival time

肺癌為全世界范圍內死亡率及發病率均較高的惡性腫瘤之一，其中小細胞肺癌（SCLC）約占15%，非小細胞肺癌（NSCLC）約占85%［1-3］。多種治療方式結合治療為肺癌的主要治療方法。隨著世界范圍內肺癌診治信息的快速傳播與交流，國際肺癌臨床診療規范的實施以及我國開展了多項肺癌臨床試驗與研究，我國肺癌的預防、診治、監測水平取得了很大的進步。肺癌細胞的轉移是一個復雜且精細的過程，受到多種基因的調控及癌細胞與宿主免疫細胞間的相互作用等多種因素的影響，探索與癌癥相關的基因表達情況與臨床病理學特征及生存情況有重大的意義，NM23基因在20世紀80年代作為一種癌癥轉移抑制基因被發現，在惡性腫瘤腫瘤如頭頸部惡性腫瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、惡性黑色素瘤等惡性腫瘤中，具有抑制癌細胞生長且促進癌細胞凋亡的能力［4-7］，但NM23與各類惡性腫瘤臨床病理學特征、轉移情況、生長部位及患者預后等方面的研究納入的指標不夠全面，樣本量也較少，還有待進一步詳細的研究［8］。本研究基于臨床信息及免疫組化結果比較了NM23基因在NSCLC中的不同表達情況與臨床病理學特征、淋巴結轉移情況、患者生存時間的相關性，以期為NSCLC患者診斷及治療提供更多有價值的信息。

1" 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月～2022年12月于新疆醫科大學附屬醫院NM23表達陽性的107例NSCLC患者臨床病例資料，其中女性26例，男性81例，年齡53～74（62.37±5.53）歲；病理類型：鱗癌53例，腺癌54例。納入標準： NSCLC患者術后標本，經病理明確診斷為NSCLC；有NM23基因免疫組化檢測結果者；簽署了留取標本知情同意書。排除標準：病理診斷為SCLC及其他類型肺腫瘤標本及肺良性疾病標本。本研究通過醫院倫理學審批［倫理審批號（K-2022021）］。

1.2" 方法

1.2.1" 實驗儀器" 顯微鏡攝像裝置（102M型）；攤片烤片機（Slidetec HEAT型）；CO2培養箱（HH.CP-160型）；全自動石蠟切片機（CUT 6062型）；醫學圖像分析系統（EPSON STYLUS PHOTO 915型）。

1.2.2" 實驗試劑" "NM23鼠抗人單克隆抗體（北京奧維亞生物技術有限公司），免疫組織化學試劑盒、PBS緩沖液、NM23抗體稀釋液、粘片劑（福州邁新生物技術開發有限公司）。

1.2.3" 實驗要求" 陰性（-）對照，使用磷酸（PO4-）鹽緩沖液一抗；陰性對照（-）為對比相同染色條件下的陽性（+）樣片，以上操作均嚴格按照操作說明書進行。

1.2.4" 實驗方法" "S-P免疫組化，NSCLC石蠟切片EnVision法。

1.2.5" 實驗判定方法" "分析NM23在NSCLC中的表達差異，根據評分分為NM23低表達組（n=64）與NM23高表達組（n=43）。評分依據：①陽性細胞數量評分：腫瘤細胞中出現棕黃色顆粒為陽性（陰性為0分，lt;25%為1分，25%～50%為2分，51%～75%為3分，gt;75%為4分）。②細胞染色程度標準：NSCLC肺癌細胞（不著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分）。NM23低表達組：①+② ≤7分； NM23高表達組：①+② gt;7分。

1.2.6" 患者18F-FDG PET/CT檢查方法" "PET/CT（飛利浦GEMINI TF PET/CT）；顯像劑：18F-FDG顯像劑；空腹血糖≤6.0 mmol/L，注射顯像劑前禁食至少6 h，注射18F-FDG顯像劑量為0.1 mCi/kg體質量；顯像劑注射完成后要求患者安靜平臥45～60 min；檢查體位取仰臥位；掃描范圍為頭頂至大腿根部；檢查時間約20 min，圖像數據傳輸后在 Medex 工作站觀察圖像。

1.3" 統計學分析

采用SPSS27.0軟件進行統計學分析，計數資料以n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以Plt;0.05為差異有統計學意義。

2" 結果

2.1" 臨床病理學特征比較

NM23基因低表達≤（++）組與NM23高表達gt;（++）組在性別、臨床分期、組織類型、分化程度、吸煙情況的差異均無統計學意義（Pgt;0.05）；但原發灶分期的差異有統計學意義（Plt;0.001，表1）。

2.2" 18F-FDG PET/CT圖像上生長部位比較

NM23基因低表達組與NM23基因高表達組在NSCLC生長在右肺上、中、下葉的表達差異、以及肺癌生長在左肺上葉與下葉表達情況差異均無統計學意義（Pgt;0.05，表2）。

2.3" "18F-FDG PET/CT圖像淋巴結轉移情況

NM23基因低表達組與NM23基因高表達組在NSCLC淋巴結轉移情況差異有統計學意義（Plt;0.001，表3）， 18F-FDG PET/CT在NSCLC中淋巴結轉移圖像（圖1）。

2.4" 生存時間比較

NM23基因低表達組與NM23基因高表達組在NSCLC患者生存時間的差異無統計學意義（Pgt;0.05）。

2.5" NM23表達的NSCLC患者術后病理圖

術后證實NM23基因表達陽性的NSCLC病理圖，每張切片分別隨機選擇5個低倍（×200）和高倍視野（×400）（圖2）。

3" 討論

有學者在鼠黑色素瘤cDNA庫中發現了NM23基因［9］，其具有轉移抑制潛能［10-14］，研究NM23基因的抑癌作用是非常重要的，尤其應關注其與LC臨床病理學特征及預后情況方面的價值。本研究結果顯示，NSCLC中NM23基因高與低表達組在原發灶分期（T1～T2期vs T3～T4期）、淋巴結轉移情況（轉移vs 未轉移）的差異有統計學意義，在腫瘤生長部位及30月生存時間方面的差異無統計學意義。

本研究顯示，NM23基因低表達組與NM23基因高表達組在原發灶分期，即T分期上差異有統計學意義，這與既往研究［15］報道的NM23基因高表達與T分期呈負相關關系的研究結果一致。NM23基因表達越高，癌灶越小；NM23基因表達越低，癌灶越大，說明NM23基因在癌癥發生發展過程中起抑制作用。淋巴結轉移一般被認為是癌癥轉移的階段性標志，NSCLC轉移首先浸潤的是淋巴結，然后才是血行轉移至其他部位，了解淋巴結的轉移情況不僅為NSCLC患者選擇治療方案的重要參考依據，也是判斷患者預后情況的重要指標。以往研究發現NM23蛋白的升高表達與多種惡性腫瘤的轉移能力降低相關，尤其在淋巴結轉移方面［16-18］，本研究顯示NM23的高表達能夠抑制淋巴結的轉移，這與既往研究［19-20］結果一致。

一項薈萃分析顯示，NM23可能被用作NSCLC的預后指標，該研究發現NM23陽性的NSCLC患者的5年生存率高于NM23陰性患者，NM23陽性的NSCLC患者的5年腫瘤轉移率比NM23陰性患者低，NM23是有利的NSCLC預后的正面指標，NM23表達與NSCLC的進展相關［21］，這與另一項研究［22］結果一致，NM23表達可以作為NSCLC可靠且獨立的預后指標。本研究結果顯示，NM23表達與NSCLC生存時間的差異無統計學意義，與其研究結果不一致，可能與隨訪時間不夠長，樣本量較小，患者自身基礎情況、術后治療方案差異、術后患者心理情況等有關，或與NSCLC自身特點相關，在早期就可出現血行轉移，對預后情況影響較大。

國內外學者對NM23基因的持續研究，充分肯定了NM23基因在腫瘤轉移抑制方面的重要作用［23-25］。本研究結果支持NM23基因為NSCLC抑癌基因，其抑制細胞增殖及轉移的能力可能與PI3K/AKT/mTOR信號通路受到抑制有關［26-29］。

本研究創新之處在于加入了NM23表達情況在18F-FDG PET/CT圖像上生長部位的比較，結果顯示NM23表達情況與腫瘤生長的部位不相關。后續研究中將會深入探索NM23基因與其他基因聯合表達情況與LC臨床病理學特征、淋巴結轉移、生長部位、生存情況的研究，為尋找新的腫瘤標志物及靶基因奠定理論基礎。但由于受免疫組化獲得的信息及臨床病理學特征有限，本研究僅納入NM23基因作為研究目的基因，很多可能引起NSCLC患者淋巴結轉移的其他高風險基因沒有被納入研究，本研究的局限性為僅納入了單一的NM23基因表達情況不同時與NSCLC患者的病理學特征、淋巴結轉移、生存時間的比較情況。

綜上所述，本研究認為NM23基因的高表達在NSCLC原發灶大小、淋巴結轉移方面發揮著抑制作用，能夠為NSCLC的臨床診治工作提供有用的信息，未來NM23可能在NSCLC的診斷和預后中作為一種有價值的生物標志物。

參考文獻：

［1］" "程傳龍， 韓" 闖， 房啟迪， 等. 基于時空地理加權回歸模型探索肺癌發病的環境影響因素［J］. 山東大學學報： 醫學版， 2023， 61（4）： 95-102.

［2］" "王澤洲， 鄭" 瑩. 1990年至2020年間全球及我國肺癌的發病流行趨勢及防控措施［J］. 診斷學理論與實踐， 2023， 22（1）： 1-7.

［3］" " 朱小瓊， 蔣棟銘， 沈佳瑩， 等. 不同人類發展指數國家肺癌發病率和死亡率分析［J］. 上海預防醫學， 2023， 35（4）： 305-13.

［4］" " 邱" 鵬. ERK2、nm23、MMP9的表達在乳腺病變中的意義［J］. 醫學理論與實踐， 2022， 35（17）： 2997-9.

［5］" " 周" 紅， 周江洪. 卵巢癌組織中DR-NM23的表達及對細胞增殖和轉移的影響［J］. 現代檢驗醫學雜志， 2022， 37（1）： 114-8.

［6］" "楊百路， 李紫艷， 張艷薇， 等. Claudin-1、E-cad、CyclinD1和nm23在不同分化肺腺癌中的表達及臨床意義［J］. 中國當代醫藥， 2021， 28（32）： 37-9， 44， 241.

［7］" " 章" 琴， 黃" 慶. 卵巢癌患者癌組織中nm23-H1和N-cad的表達及臨床意義［J］. 分子診斷與治療雜志， 2021， 13（10）： 1705-8.

［8］" "Tang M， Wang SM， Wei YL， et al. Inhibition effects of Yuxiao San combined with cisplatin on transplanted tumor growths via upregulation of nm-23 and downregulation of K-ras in Lewis lung cancer mice［J］. Oncol Lett， 2019， 17（1）： 1267-73.

［9］" " Li DL， Li WQ， Tian C， et al. Prognostic and clinicopathological significance of nm23-H1 expression in non-small cell lung cancer： a meta-analysis［J］. Medicine， 2022， 101（39）： e30815.

［10］ Lu ZS， Liu B， Kong DM， et al. NSUN6 regulates NM23-H1 expression in an m5C manner to affect epithelial-mesenchymal transition in lung cancer［J］. Med Princ Pract， 2024， 33（1）： 56-65.

［11］" Wong KM， Song JX， Wong YH. CTCF and EGR1 suppress breast cancer cell migration through transcriptional control of Nm23-H1［J］. Sci Rep， 2021， 11（1）： 491.

［12］" Yu LT， Wang XD， Zhang WH， et al. The multiple regulation of metastasis suppressor NM23-H1 in cancer［J］. Life Sci， 2021， 268： 118995.

［13］" Kim B， Lee KJ. Activation of Nm23-H1 to suppress breast cancer metastasis via redox regulation［J］. Exp Mol Med， 2021， 53（3）： 346-57.

［14］" Guo S， Liu L， Li Y， et al. Correlation between nm23-H1 expression and transvaginal color Doppler ultrasound performance after radiotherapy for cervical cancer［J］. Transl Cancer Res， 2022， 11（5）： 1354-61.

［15］ Han W， Ma J， Cao F， et al. The role of NM23 in patients with colorectal cancer： a systematic review and meta-analysis［J］. J Huazhong Univ Sci Technol Med Sci， 2017， 37（1）： 1-10.

［16］" Hung CY， Wang YC， Chuang JY， et al. Nm23-H1-stabilized hnRNPA2/B1 promotes internal ribosomal entry site （IRES）-mediated translation of Sp1 in the lung cancer progression［J］. Sci Rep， 2017， 7： 9166.

［17］" Ai C， Ma GZ， Deng YF， et al. Nm23-H1 inhibits lung cancer bone-specific metastasis by upregulating miR-660-5p targeted SMARCA5［J］. Thorac Cancer， 2020， 11（3）： 640-50.

［18］" Chuang CH， Wang LY， Wong YM， et al. Anti-metastatic effects of isolinderalactone via the inhibition of MMP-2 and up regulation of NM23-H1 expression in human lung cancer A549 cells［J］. Oncol Lett， 2018， 15（4）： 4690-6.

［19］" Sheng Y， Xu MF， Li CY， et al. Nm23-H1 is involved in the repair of ionizing radiation-induced DNA double-strand breaks in the A549 lung cancer cell line［J］. BMC Cancer， 2018， 18（1）： 710.

［20］" Wu CN， Zhuang YW， Zhou JY， et al. Nm23-H1 inhibits hypoxia induced epithelial-mesenchymal transition and stemness in non-small cell lung cancer cells［J］. Biol Chem， 2019， 400（6）： 765-76.

［21］Min SH， Zheng QQ. Clinicopathological and prognostic significance of NM23 expression in patients with non-small cell lung cancer： a systematic review and meta-analysis［J］. Medicine， 2021， 100（47）： e27919.

［22］ You JC， Chang R， Liu B， et al. Nm23-H1 was involved in regulation of KAI1 expression in high-metastatic lung cancer cells L9981［J］. J Thorac Dis， 2016， 8（6）： 1217-26.

［23］" Kim B， Lee JJ， Shin JS， et al. Nm23-H1 activator phenylbutenoid dimer exerts cytotoxic effects on metastatic breast cancer cells by inducing mitochondrial dysfunction only under glucose starvation［J］. Sci Rep， 2021， 11（1）： 23549.

［24］" Izzo L， Messineo D， Cello PD， et al. Correlation between onco-suppressors PTEN and NM23 and clinical outcome in patients with T1 breast cancer［J］. In Vivo， 2021， 35（1）： 169-74.

［25］" 董海北， 郭雯雯， 丁云鶴， 等. HMGB1通過ZEB1調控非小細胞肺癌放療敏感性的機制研究［J］. 徐州醫科大學學報， 2022， 42（8）： 553-7.

［26］" 張" 凱， 劉培培， 張" 松， 等. PTPN12低表達參與調控肺癌H1299細胞凋亡的作用及對放療敏感性的影響［J］. 實用癌癥雜志， 2022， 37（8）： 1241-5.

［27］" 鄭" 藝， 胡" 芃， 張洪波， 等. BTG2對非小細胞肺癌放療敏感性的影響及其機制［J］. 山西醫科大學學報， 2021， 52（9）： 1091-6.

［28］" 李" 賀. 非小細胞肺癌患者癌組織中BRCA1和p53表達與放療敏感性的相關性［J］. 臨床醫學， 2023， 43（2）： 1-4.

［29］" 魏文海， 李興芳， 趙" 瓊， 等. PI3K/Akt/mTOR信號通路抗非小細胞肺癌的機制及中藥干預研究進展［J］. 中國實驗方劑學雜志， 2023， 29（23）： 218-26.

（編輯：林" 萍）

基金項目：新疆維吾爾自治區科技支疆項目計劃（指令性）項目（2022E02050）

作者簡介：夏露花，博士，副主任醫師， E-mail： xialuhuahua@163.com

通信作者：常" 誠，主治醫師， E-mail： chch011@126.com