基于高分辨率熔解曲線分析技術鑒別丹參及其混偽品
2024-10-16 00:00:00趙景瑩張玉娟柳展基趙方洲湯慧麗王憲昌朱彥威田北京韓金龍鄔爽高春華單成鋼
山東農業科學 2024年9期
摘要：本研究旨在建立一種基于高分辨率熔解曲線（high resoluLion melting，HRM）技術高效鑒別丹參及其混偽品的方法。研究采用硅膠吸附柱法純化基因組DNA，并針對鼠尾草rDNA ITS2區序列設計特異性引物，通過依次對引物濃度、DNA模板濃度、退火溫度和循環次數進行系統優化，建立了ITS2熔解曲線模型，并采用HRM技術對不同來源丹參及其混偽品（甘西鼠尾草、云南丹參和鼠尾草）進行鑒別。結果表明，在最適引物濃度為2.5-10.0 umol/L，DNA模板濃度為26.95-53.90 ng／uL，退火溫度為58℃，循環數為35-45時可獲得穩定、均一、特異的PCR擴增曲線。該方法通過對比熔解溫度（Tm）即可實現對丹參與甘西鼠尾草、云南丹參及鼠尾草的真偽鑒別，在丹參及其偽品的快速檢測方面具有獨特的優勢。
關鍵詞：高分辨率熔解曲線；分子鑒定；丹參；偽品
中圖分類號：S567.5+3 文獻標識號：A 文章編號：1001-4942（2024）09-0116-08
