肉蓯蓉（口父）咀飲片最佳規格優選研究

【摘要】目的：優選肉蓯蓉（口父）咀飲片最佳規格。方法：將肉蓯蓉制備成不同規格（口父）咀飲片，以肉蓯蓉傳統厚片作為對照組，對比（口父）咀飲片性狀、休止角、煎出率及毛蕊花糖苷和松果菊苷轉移率。結果：除“排列成波狀環紋”特征外，（口父）咀飲片保留了傳統飲片的其他性狀特征。（口父）咀規格為5 mm和8 mm立方塊的休止角相近且較小，這表明其具有較好的流動性。（口父）咀規格為8 mm的立方塊與傳統飲片的質量屬性較為接近，且均一性顯著優于傳統飲片。對15批次的傳統飲片與（口父）咀飲片進行比較發現，8 mm立方塊的肉蓯蓉（口父）咀飲片與傳統飲片質量屬性基本一致。結論：8 mm的立方塊可達到較佳的流動性、均一性、質量屬性一致性，適宜于做肉蓯蓉（口父）咀飲片規格。

【關鍵詞】肉蓯蓉；（口父）咀飲片；煎出率；轉移率；毛蕊花糖苷；松果菊苷

【DOI編碼】10.3969/j.issn.1674-4977.2024.05.014

【基金項目】淮北市科技計劃（指導性）項目（2021HK039）：肉蓯蓉精微飲片制備工藝與質量評價研究。

Study on the Optimal Specification of Herba Cistanches Fuju Pieces

DAI Lei1， XUE Qingping2， GUO Zhijun2， GAO Ting2， YUAN Ke2

（1.Huaibei Food and Drug Inspection Center， Huaibei 235000， China； 2.China Resourrces Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co.， Ltd.， Huizhou 516007， China）

Abstract： Objective： To select the best specification of Herba Cistanches fuju pieces. Methods： Herba Cistanches was manufactured into different sizes of fuju pieces. The optimal piece is obtained through compared the property， angle of repose， decocting rate and the diversion rate of echinacoside and acteoside with the traditional Herba Cistanches pieces. Results：fuju pieces retains every characteristic of traditional herba pieces， except the characteristic of arranged in a wavy ring pattern. The angle of reposeof two cube speices， which has the length of slide 5 mm and 8 mm， respectively， is similar and small， which indicated ideal mobility. The cube with a length of slide of 8 mm has a quality attribute that is closer to traditional decoction pieces， and its uniformity is significantly better than that of traditional herbal. Compared with 15 batches of traditional decoction pieces， the quality attributes of corresponding batches of 8 mm cubic pieces of Cistanche pieces are basically the same as those of traditional pieces. Conclusion：8 mm cubic blocks can achieve better fluidity， uniformity， and consistency in quality attributes， making it suitable for making the best Herba Cistanches fuju pieces among different pieces.

Keywords： Herba Cistanches； fuju piece； decocting rate； diversion rate； acteoside； echinacoside

肉蓯蓉始載于《神農本草經》，具有補腎陽、益精血、潤腸通便的功效，一直以來作為滋補類中藥被應用于臨床。《中華人民共和國藥典》2020年版（以下簡稱《中國藥典》）規定肉蓯蓉來源于列當科植物肉蓯蓉或管花肉蓯蓉的干燥帶鱗葉的肉質莖。肉蓯蓉藥材的規格通常為直徑2～8 cm，長3～15 cm。根據《中國藥典》“0213炮制通則”規定，肉蓯蓉在炮制過程中呈不規則厚片，厚片為2～4 mm，切制完成的肉蓯蓉片大多以直徑為2～8 cm，厚度為2～4 mm的大厚片為主[1]。這種傳統飲片大小不均，質量差異較大，在臨床調劑時難以把控，而且煎煮時有效成分難以均勻溶出，導致每副湯劑質量差異較大。此外，也有相關研究報道肉蓯蓉不同部位之間化學成分含量差異較為明顯，不同部位體外清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基的能力也各有不同[2]，使得肉蓯蓉傳統飲片在臨床療效上較難得到保證。而在提高臨床療效的方法中，中藥（口父）咀飲片是一種遵循中醫藥理論和中藥傳統炮制方法，從源頭上選用優質藥材，經過特色加工炮制而制成的利用率高、質量均一、療效穩定，便于調劑與制劑，保留傳統飲片鑒別特征的傳承創新型飲片。

中藥（口父）咀飲片規格大小主要依據藥材的藥用部位、質地特征及臨床應用情況等方面進行分類[3]。例如，傳統的（口父）咀飲片規格描述為“如大豆”“如麻豆”“粗末”等[4]。肉蓯蓉屬于特殊的肉質莖類藥材，干燥后的藥材塊大、體長，使用現代切制技術適宜切制成絲或丁的規格，這樣既能提高肉蓯蓉的利用率又使其質量均一，且保留了傳統飲片的性狀鑒別特征。

本研究以肉蓯蓉傳統飲片為橋接，將肉蓯蓉（口父）咀成不同規格的絲和塊，以飲片性狀、休止角、煎出率及毛蕊花糖苷和松果菊苷轉移率為評價指標，對肉蓯蓉（口父）咀飲片最佳規格進行優選，同時對傳統飲片和（口父）咀飲片的均一性和質量屬性一致性進行比較，以期為肉蓯蓉（口父）咀飲片的規格選擇和加工生產提供參考。

1材料

1.1儀器

Thermo U3000 HPLC；XBridge C18（250.0 mm×4.6 mm，5μm）色譜柱；SQW系列數控往復式切藥機（康華制藥機械有限公司）；AM300S-型切割式碾磨儀（螞蟻源科學儀器有限公司）；DL-60J型智能超聲清洗器（上海五月儀器儀表有限公司）；QM-Q5-H30DW型電蒸鍋（長沙市全民電器有限公司）；MS204S型萬分之一電子分析天平（梅特勒托利多）；XPE26型百萬分之一電子天平（梅特勒托利多）。

1.2試藥

松果菊苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號111670-201907，純度91.80%），毛蕊花糖苷對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號111530-201914，純度95.2%），甲醇（色譜純）；娃哈哈純凈水；其余試劑均為分析純。

肉蓯蓉藥材由課題組采自內蒙古阿拉善、內蒙古巴彥淖爾和甘肅酒泉地區，經安徽中醫藥大學劉守金教授鑒定為肉蓯蓉的干燥帶鱗葉的肉質莖。

2方法

2.1樣品制備方法

取肉蓯蓉藥材均分成7份，每份約500 g，除去雜質，洗凈，潤透，分別切制成傳統飲片和（口父）咀飲片，傳統飲片以2～4 mm的厚片為主，（口父）咀飲片分別切制成寬×厚為2 mm×2 mm、2 mm×4 mm、4 mm×4 mm的絲及邊長分別為5 mm、8 mm、10 mm的立方塊。

2.2主成分測定

參照《中國藥典》，以苯乙醇苷類代表成分毛蕊花糖苷及松果菊苷2個成分為指標進行測定[1]。

2.2.1色譜條件與系統適用性試驗

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按表1中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為330 nm。理論板數按松果菊苷峰計算應不低于3000。HPLC圖譜見圖1。

2.2.2對照品溶液的制備

取松果菊苷對照品、毛蕊花糖苷對照品適量，精密稱定，加50%甲醇溶液制成1 mL各含松果菊苷、毛蕊花糖苷0.2 mg的混合溶液，即得。

2.2.3供試品溶液的制備

取本品粉末（過四號篩）約1 g，精密稱定，置于100 mL棕色量瓶中，精密加入50%甲醇溶液50 mL，密塞，搖勻，稱定重量，浸泡30 min，超聲處理40 min（功率：250 W，頻率：35 kHz），放冷，再稱定重量，加50%甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續濾液，即得。

2.2.4線性關系考察

精密吸取毛蕊花糖苷對照品溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL，置于5個10 mL容量瓶中，分別加甲醇定容至刻度。精密吸取松果菊苷對照品溶液0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL，置于5個10 mL容量瓶中，分別加50%甲醇溶液定容至刻度，按“2.2.1”方法測定，并記錄相應峰面積。

2.2.5精密度試驗

精密吸取毛蕊花糖苷和松果菊苷對照品溶液，分別連續進樣6次，測定毛蕊花糖苷和松果菊苷峰面積的RSD。

2.2.6穩定性試驗

精密吸取同一供試品溶液，按“2.2.1”的方法操作測定，每隔4 h測定1次，測試至24 h，計算毛蕊花糖苷和松果菊苷峰面積的RSD。

2.2.7重復性試驗

按照供試品溶液制備方法操作，分別制備供試品溶液6份，按照“2.2.1”的方法操作測定，根據毛蕊花糖苷和松果菊苷峰面積計算其RSD。

2.2.8加樣回收率試驗

精密稱量已知毛蕊花糖苷和松果菊苷含量的供試品溶液6份，加入毛蕊花糖苷對照品和松果菊苷對照品溶液各1 mL，按“2.2.1”的方法測定，計算回收率。

2.2.9休止角測定

2.2.10煎出率測定

取肉蓯蓉（口父）咀飲片50 g，置于1000 mL圓底燒瓶，加入10倍飲片量的水，浸泡30 min，煎煮45 min，用200目濾布趁熱過濾，藥渣再加8倍飲片量的水，煎煮30 min，用200目濾布趁熱過濾，合并濾液；減壓濃縮（60℃）成浸膏，冷凍干燥，即得肉蓯蓉凍干粉，煎出率按照以下公式進行計算[5]：

2.2.12觀察指標

記錄不同規格（口父）咀飲片與傳統飲片的出膏率、毛蕊花糖苷和松果菊苷總轉移率，并采用加權評分方法評價煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷總轉移率，煎出率測定權重系數取0.5，毛蕊花糖苷和松果菊苷總轉移率權重系數取0.5。

3結果與分析

3.1主成分測定方法學考察結果

采用“2.2.1”色譜條件，毛蕊花糖苷和松果菊苷的色譜分離度均大于1.5，方法學考察結果見表2。此方法精密度、穩定性、重復性、回收率良好，分離效果好，可用于肉蓯蓉飲片及凍干粉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量測定。

3.2傳統飲片與（口父）咀飲片性狀結果比較

由表3可知，除“排列成波狀環紋”特征外，（口父）咀飲片均具有傳統飲片的性狀特征。

3.3傳統飲片與（口父）咀飲片不同規格結果分析及（口父）咀規格優選

由表4可知，不同規格（口父）咀飲片休止角均低于傳統飲片，（口父）咀規格越小飲片休止角越小。規格為5 mm立方塊，休止角最小，為30°，其次8 mm立方塊為31.2°，其他規格大于35°。與傳統飲片相比，（口父）咀規格越小煎出率越高，規格為2 mm×2 mm絲時，煎出率最高，為63.61%，2 mm×4 mm絲為60.33%，其次為5 mm立方塊，為60.18%，其他規格低于60%，（口父）咀規格為8 mm立方塊時，與傳統飲片基本一致。飲片毛蕊花糖苷和松果菊苷總含量、凍干粉毛蕊花糖苷和松果總含量及轉移率無顯著規律。

與煮散飲片追求較高干膏率和有效成分煎出量不同[6]，（口父）咀飲片以與傳統飲片煎出率和轉移率保持一致為原則。采用加權評分方法，通過對比不同規格間（口父）咀飲片煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷總轉移率評分。結果顯示，規格為8 mm立方塊（口父）咀飲片總分與傳統飲片較為一致。因此，該規格可作為肉蓯蓉（口父）咀飲片最佳規格。

3.4傳統飲片與（口父）咀飲片質量均一性比較分析

將同一批次傳統飲片和（口父）咀飲片按臨床調劑7副為一個療程進行隨機取樣7次，分別對7次飲片的水分、煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷總含量及轉移率進行比較，由表5可知，7次傳統飲片水分、煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷總含量及轉移率的RSD值均大于（口父）咀飲片，且（口父）咀飲片的RSD值均小于2%。由此可知，8 mm立方塊的肉蓯蓉（口父）咀飲片均一性優于傳統飲片。

3.5傳統飲片與（口父）咀飲片質量一致性評價比較

為使（口父）咀飲片能夠承載中藥飲片的安全、有效等質量屬性，以傳統飲片制備的標準湯劑為橋接，開展（口父）咀飲片與傳統飲片質量一致性評價研究。通過本草考證、文獻調研、產地及市場考察，確定肉蓯蓉藥材的道地產區和主產區，然后進行樣品收集，每個產區收集樣品不少于3批，合計收集15批。分別將不同批次肉蓯蓉藥材炮制成傳統飲片和（口父）咀飲片，對其飲片得率、煎出率及毛蕊花糖苷和松果菊苷轉移率進行測定。由表6可知，15批次傳統飲片的得率在95.1%～98.00%之間，均值為96.54%，煎出率在48.34%～61.88%之間，均值為55.93%，轉移率在43.5%～84.30%之間，均值為65.88%。15批次（口父）咀飲片的得率在81.80%～97.70%之間，均值為91.40%，煎出率在52.20%～59.39%之間，均值為58.46%，轉移率在60.5%～72.80%之間，均值為68.15%。由此可見，8 mm立方塊的肉蓯蓉（口父）咀飲片與傳統飲片質量屬性較為一致。

4討論

（口父）咀一詞應用歷史悠久，本義為“含味”，有“以口嚙咀”“以口咬細”之義。通過考證，（口父）咀為將藥物加工為麻豆大以便于煎煮及后續生產的一種炮制方法。中藥飲片雖經過千年的演化，但至今在加工和使用過程中仍以簡陋、粗放的形式呈現。同批次間飲片體積、重量及質量屬性差異大，調劑不便利，煎煮不透徹，究其原因是飲片規格的選擇不合理及缺乏科學的評價方法。（口父）咀飲片是對傳統炮制方法的創新應用，從“形”上進行優化，將傳統飲片化大為小，使其具有利用率高、質量均一、療效穩定、便于調劑與制劑等優勢，同時保留傳統飲片性狀的特征，極大地提高了其流動性，并有效解決傳統飲片存在的問題。

肉蓯蓉屬體積較大類中藥材，通過研究發現其上中下部位間質量差異較大。基于此，本研究首先以肉蓯蓉傳統飲片為橋接，開展（口父）咀規格優選。肉蓯蓉內在成分較多，主要有苯乙醇苷、環烯醚萜、木脂素及多糖成分等，其中苯乙醇苷類成分松果菊苷和毛蕊花糖苷是《中國藥典》規定的指標成分，也是肉蓯蓉的有效成分，在抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、改善記憶等方面均有較好的作用[7-10]。以煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷的轉移率為內在成分評價指標，保證（口父）咀飲片與傳統飲片質量屬性的一致性。其次，以休止角評價飲片的流動性，有利于開發（口父）咀飲片相應的調劑設備，使后期的臨床調劑實現自動化和智能化，為醫院和患者提供更大的便利。此外，相較于煮散飲片和配方顆粒，（口父）咀飲片不會喪失原飲片的性狀鑒別特征，而是在保留傳統飲片性狀特征的基礎上，確保其煎出率和活性成分轉移率與傳統飲片相當而開發設計的一種新型規格飲片，旨在便于飲片的鑒別與監管工作，同時確保飲片的用法用量維持穩定，從而為臨床應用提供更加可靠、便捷的解決方案。

結果表明，不同規格（口父）咀飲片除“排列成波狀環紋”特征外，均保留了傳統飲片的性狀特征。此外，一般認為休止角越小，摩擦力越小，流動性越好，不大于30°是較理想狀態[11-12]。與傳統飲片相比，（口父）咀飲片休止角均小于傳統飲片，其中規格為5 mm和8 mm立方塊休止角較為一致，流動性較為理想。首先，煎出率、毛蕊花糖苷和松果菊苷的轉移率表征參數的評分結果顯示，（口父）咀規格為8 mm的立方塊與傳統飲片的質量屬性較為接近。其次，分別對肉蓯蓉傳統飲片和（口父）咀飲片進行均一性評價，結果顯示8 mm的立方塊均一性顯著優于傳統厚片。此外，收集多批次不同產區肉蓯蓉藥材制備成傳統飲片和（口父）咀飲片進行質量一致性評價顯示，8 mm立方塊的肉蓯蓉（口父）咀飲片與傳統飲片質量屬性基本一致。

綜上所述，8mm的立方塊規格在肉蓯蓉（口父）咀飲片的制備中展現出優異的流動性、高度的均一性以及質量屬性的一致性，適宜于做肉蓯蓉（口父）咀飲片規格。

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【作者簡介】

代磊，男，1979年出生，主管中藥師，研究方向為中成藥中藥飲片的檢驗檢測。

通信作者：薛青蘋，男，1992年出生，工程師，研究方向為藥材資源與中藥飲片炮制質量，1770748545@qq.com。

（編輯：侯睿琪）