侯慧文
天津市農業生態環境監測與農產品質量檢測中心,天津300192
動物飼料是畜牧業生產發展的基礎,安全性高的動物飼料不僅能推動畜牧業良性健康發展,而且還能提高畜禽產品品質和養殖效益。飼料安全快速檢測技術,能縮短待檢飼料前期處理、試驗操作和結果查詢等各個環節所耗時間,且檢測結果靈敏度和特異性高、符合國家對飼料物質成分的檢測限。隨著農業技術的發展,飼料安全快速檢測技術還有許多便攜式儀器(如便攜式光度計、便攜式PCR 儀)或膠體金試紙條等,便于工作人員現場檢測,為飼料殘藥物留、致病菌、生物毒素及其他有害物質檢測提供技術保障。
免疫學檢測方法主要包括免疫沉淀法(IP)、電化學發光免疫分析法(ECLI)、放射免疫分析(RIA)和酶聯免疫吸附(ELISA)等,飼料安全快速檢測最常用的免疫學技術為ELISA,檢測原理為抗原或抗體固相化及抗原或抗體的酶標記,加入酶反應的底物后,底物被酶催化成有色產物,產物的量與樣品中待檢物質的量具有相關性,根據產物顏色深淺進行定性或定量判斷。ELISA 常用于飼料中生物毒素的檢測,李慧娟等[1]通過ELISA 對飼料中赭曲霉毒素A 進行檢測,赭曲霉毒素A 的添加回收率為88.4%~134.6%,且檢測結果符合國標GB 13078-2017《飼料中赫曲霉毒素A 含量的測定》,且該方法的樣品的前期處理簡單,大大縮短了檢測時長,是一種適用于飼料中赭曲霉毒素A 初篩的檢測方法。
聚合酶鏈式反應(PCR)是一種成熟、應用范圍廣的快速檢測技術,PCR 檢測原理是以DNA 片段為模板,在DNA 聚合酶和核苷酸底物共同參與下,通過變性-退火-延伸等不同溫度反應將DNA 擴增至足夠數量的檢測方法,適用于微量DNA 模板,且對待檢樣品純度要求不高。目前常用的PCR 檢測技術包括熒光定量PCR(Real-time qPCR)、環介導等溫擴增法(LAMP)和微滴式數字PCR(dd PCR),PCR 檢測技術常用于飼料中細菌微生物的檢測。阮靖華等[2]利用Real-time qPCR 對進境動物源性飼料中沙門氏菌進行檢測,結果發現Real-time qPCR檢測的進境動物源性飼料樣品的檢出率與國標法一致,檢測的可重復性好、定量準確高,由于試驗時間短,大大加快了飼料通關速度。
生物傳感器由生物感應元件和信號傳導器組成,是一種對生物物質敏感且能將這些物質濃度轉換為電信號進行檢測的儀器。根據生物感應元件所采用的生命物質可以劃分為細胞、組織、酶、微生物、免疫傳感器等傳感器。生物傳感器具有占地小、成本低、耗時短、特異性和靈敏度高的優點,但由于某些待檢樣品預處理難度較高,還需要進一步開發。生物傳感器不僅對飼料中阿維菌素(AVMs)、鏈霉素(STR)等藥物具有相對的檢測優勢,而且也可以用于檢測飼料中的生物毒素。周歷嵐等[3]通過表面等離子體振諧生物傳感器法(SPR)對玉米飼料中黃曲霉毒素進行檢測,發現SPR 對黃曲霉毒素的檢測限為0.78 ppb,且SPR 無需標記,具有能實時監測生物分子相互作用、可確定反應物種類和濃度、定量分析抗原抗體的結合狀態等優勢和快速、靈敏、準確等優點,但是配套的設備儀器費用高,操作較為復雜,在我國的應用范圍較小。
基因芯片技術結合微電子光刻技術和DNA 化學合成技術檢測飼料,其檢測原理是將各種基因寡核苷酸在物體表面點樣,并將DNA 片段進行PCR擴增和標記,再與寡核苷酸樣品雜交,以雜交信號的篩選實現對待檢樣品物質的檢測。這是一種飼料及食品安全的新型檢測技術,主要用于檢測飼料及食品中的微生物[4]。
飼料安全快速檢測技術,不僅可以在短時間內檢測飼料中藥物殘留、微生物、生物毒素污染情況,還能對飼料成分和安全性進行檢測,和傳統檢測方法相比,縮短了檢測時間,其檢測結果的可靠性和靈敏度也較高,是未來飼料安全檢測的發展方向。隨著科學技術的發展和快速檢測技術的普及,我國飼料業的安全性也會逐步提高,為畜牧業提供更安全健康的飼料產品。