TIPE2在IMN中的變化及其與巨噬細胞極化相關細胞因子及IL-17/IL-10的關聯研究

摘 要 目的：搜集IMN病例標本，檢測TIPE2的表達水平，研究其與IMN引起巨噬細胞極化相關細胞因子及IL-17/IL-10的關聯。方法：選取IMN患者60例為IMN組，招募健康受試者50例為對照組。2組TIPE2水平按文獻方法測定，TNF-α、IL-2、IL-17和IL-10水平采用ELISA法檢測。結果：IMN組血和尿β2-微球蛋白含量、尿蛋白指標均高于對照組、肌酐水平低于對照組（P<0.001）、而TIPE2、TNF-α、IL-2水平和IL-17/IL-10比值顯著高于對照組（P<0.001）；TIPE2水平與TNF-α、IL-2、IL-17/IL-10值均呈正相關（P<0.001）。結論：本研究可為臨床治療及藥物研發提供新的方向，為基礎分子參與的免疫調節提供依據。

關鍵詞 特發性膜性腎病 TIPE2 巨噬細胞極化 IL-17 IL-10

中圖分類號：R692.9 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2024）09-0083-03

引用本文 潘京， 薛國輝， 桂菲， 等. TIPE2在IMN中的變化及其與巨噬細胞極化相關細胞因子及IL-17/IL-10的關聯研究[J]. 上海醫藥， 2024， 45（9）： 83-85； 126.

基金項目：江西省衛生健康委員會科技計劃項目（202140258）

Changes of TIPE2 level in patients with idiopathic membranous nephropathy and its association with cytokines related to macrophage polarization and IL-17/IL-10

PAN Jing， XUE Guohui， GUI Fei， WANG Lu， LIU Dan

（Laboratory Department， the First People’s Hospital of Jiujiang， Jiujiang 332000， China）

ABSTRACT Objective： To collect idiopathic membranous nephropathy （IMN） case samples， determine the expression level of TIPE2 and study its association with macrophage polarization-associated cytokines and IL-17/IL-10 induced by IMN. Methods： Sixty cases of patients with IMN were selected as a IMN group， and 50 cases of healthy subjects were recruited as a control group. The level of TIPE2 were determined by a literature method， while the contents of TNF-α， IL-2， IL-17 and IL-10 by ELISA. Results： Serum and urinary b2-microglobulin contents and urinary protein indexes were higher and creatinine content was lower in the IMN group than the control group （P<0.001）， and TIPE2， TNF-α， IL-2 levels and IL-17/IL-10 value were significantly higher in the IMN group than the control group （P<0.001）. TIPE2 level was positively correlated with the TNF-α， IL-2 levels and IL-17/IL-10 ratio （P<0.001）. Conclusion： This study can provide a new direction for clinical treatment and drug development and a basis for immune regulation involving basic molecules.

KEY WORDS idiopathic membranous nephropathy； TIPE2； macrophage polarization； IL-17； IL-10

特發性膜性腎?。╥diopathic membranous nephro- pathy，IMN）是一種器官特異性自身免疫性足細胞病。IMN會給機體帶來很大的危害，比如長時間的蛋白尿，30%可自發緩解，40%的患者可進展為終末期腎病[1]。如果得不到控制，很容易導致患者出現腎衰竭，嚴重時患者病情加重或者死亡。但目前關于IMN的發病機理并不明確，大量研究表明IMN的發生與免疫系統環境的紊亂有關。腫瘤壞死因子-a誘導蛋白8（tumor necrosis factor-alpha-induced protein eight-like，TIPE）家族是最新發現的與免疫、炎癥和腫瘤相關的調節因子[2]，TIPE2是TIPE家族最受關注和研究最為深入的成員，有多個研究提示TIPE2參與了免疫調控，如巨噬細胞極化及Th細胞活化。巨噬細胞參與固有免疫，可分為M1型和M2型，M1型巨噬細胞激活適應性免疫應答，發揮專業抗原呈遞細胞作用，殺滅病原微生物，破壞惡性腫瘤細胞等[3]，M2型巨噬細胞可下調適應性免疫應答，抗炎能力較低，參與寄生蟲感染、腫瘤進展等[4]。此外，近年來輔助性T細胞17（T helper cell 17，Th17）在自身免疫性和腎臟疾病中的作用備受關注。而參與細胞免疫的IL-17是一類主要由Th17細胞分泌的細胞因子，多種試驗表明，IL-17在較多腎炎患者腎組織和骨髓以外的血液中的表達增加[5]。白介素-10（interleukin-10，IL-10）是一種負性免疫調節因子，能調節T細胞生長與分化，主要由Th2細胞、單核細胞、角質細胞和活化B細胞產生[6]。本課題旨在搜集IMN病例標本，檢測TIPE2的表達水平，研究其與IMN引起巨噬細胞極化相關分子及IL-17/IL-10的關聯關系，為分子免疫提供新的依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年1月—2022年11月就診于江西省九江市第一人民醫院經腎活檢病理結果顯示IMN的患者60例為IMN組，同時選取健康受試者50例為對照組。納入標準：①確診為IMN患者；②無服用糖皮質激素、免疫抑制劑及細胞毒藥物史。排除標準：①患有自身免疫性疾病、急慢性感染性疾病、惡性腫瘤、病毒性肝炎、高血壓病、糖尿病等慢性??；②嚴重腎功能不全。

1.2 方法

根據第3版鄒萬忠主編《腎活檢病理學》，結合臨床表現、實驗室檢查及影像學檢查對臨床患者進行診斷。2組受試者TIPE2水平按文獻方法[7]測定、血清TNF-a、白介素-2（interleukin-2，IL-2）、IL-10和IL-17水平采用ELISA法檢測，記錄2組受試者血清和尿液生化指標，如肌酐、血清尿素氮、血及尿b2-微球蛋白、尿蛋白等指標。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 臨床資料、血清和尿液生化指標水平比較

兩組除性別和血清尿素氨之外，均存在顯著差異，且IMN組血和尿b2-微球蛋白、尿蛋白指標均高于對照組，而肌酐低于對照組（表1，P<0.001），表明IMN組患者腎功能障礙較為顯著。

2.2 TIPE2、巨噬細胞極化相關分子（TNF-α和IL-2）水平以及IL-17/IL-10比值的比較

IMN組TIPE2、TNF-a、IL-2水平和IL-17/IL-10比值顯著高于對照組（表2，P<0.001），表明IMN組患者免疫功能失衡且處于炎癥狀態。

2.3 TIPE2與IMN引起巨噬細胞極化相關分子（TNF-α和IL-2）及IL-17/IL-10的相關性分析

TIPE2水平與TNF-a、IL-2水平和IL-17/IL-10比值均呈正相關（圖1），表明TIPE2水平變化與IMN患者的免疫功能和炎癥反應有一定的相關性。

3 討論

有研究證實巨噬細胞極化可能參與了IMN的發生發展過程[7]，TNF-a是由M1型巨噬細胞分泌的促炎因子，是腫瘤壞死因子超家族重要的成員之一，已有較多研究證實其參與腎病綜合征病情發展過程。TNF-a增加是兒童腎病綜合征復發的重要因素之一[8]。吳鵬等[9]研究顯示，在某些腎病綜合征發病中TNF-a可能發揮重要作用。本研究結果顯示，IMN組血清TNF-a水平較對照組高，提示IMN患者病情發展過程中免疫失衡，機體TNF-a水平增加，機體并處于炎癥狀態。TIPE2最早見于實驗性自身免疫性腦脊髓炎，在炎癥脊髓中高表達，但在正常脊髓中不表達。近期，許多研究人員通過免疫調節和炎癥反應，發現TIPE2在乙肝、類風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等炎癥相關疾病中發揮著重要作用[10]。近期研究發現TIPE2在系統性紅斑狼瘡患者中表達下調，有研究發現TIPE2可以通過誘導M2型巨噬細胞極化減輕系統性紅斑狼瘡[11]。在重癥肌無力患者中，TIPE2水平顯著下降，并與IL-17水平呈顯著負相關性，且體外實驗表明TIPE2可以抑制IL-17的分泌[12]。本研究結果顯示，IMN組中TIPE2表達高于對照組，提示TIPE2參與了免疫調控。而參與細胞免疫的IL-17可誘導腎小管上皮體外培養IL-6和趨化因子配體8，推測IL-17可能誘導局部炎癥瀑布反應，導致腎損傷。IL-17有望成為治療腎臟疾病的潛在治療靶點[13]。研究發現IL-17/IL-10的平衡紊亂與IMN發生存在關聯，IMN患者促炎性的IL-17異常上調，而抑炎性的IL-10則顯著下降[14]。本研究結果顯示，IMN組IL-17/IL-10水平高于對照組，進一步研究發現TIPE2水平與TNF-a、IL-2水平和IL-17/IL-10比值均呈正相關關系，提示IMN患者病情發展過程導致機體免疫反應紊亂，機體出現炎癥反應，促炎因子大量分泌，抑炎因子含量減少。

綜上所述，本研究可為臨床治療及藥物研發提供新的方向，為基礎分子參與的免疫調節提供依據。

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