實時熒光人乳頭瘤病毒檢測和液基薄層細胞學檢查對宮頸病變的預測價值

張立娥 杜翠霞

【摘要】目的：探討實時熒光人乳頭瘤病毒（HPV）檢測和液基薄層細胞學檢查（TCT）對宮頸病變的預測價值。方法：以我院接診的行宮頸篩查的1786例女性為研究對象，對其進行實時熒光HPV檢測、TCT和陰道鏡病理檢測，以病理檢測結果為金標準，評價實時熒光HPV檢測和TCT的預測價值。結果：本研究1786例受檢女性，病理篩查確診131例，發病率為7.33%，TCT、實時熒光HPV檢測和TCT聯合實時熒光HPV檢測篩出陽性率分別為2.97%、5.60%和6.83%。TCT聯合實時熒光HPV檢測靈敏度為91.60%、特異度為99.88%、陽性預測值為98.36%、陰性預測值為99.34%，TCT聯合實時熒光HPV檢測靈敏度與陽性預測值高于TCT與實時熒光HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：在宮頸病變診斷中，實時熒光HPV檢測與TCT聯合篩查具有較高的預測價值，值得推廣。

【關鍵詞】實時熒光HPV檢測；TCT；宮頸病變；預測價值

Predictive value of real-time fluorescent human papillomavirus detection and thinprep cytology test in cervical lesions

ZHANG Lie， DU Cuixia

Department of Clinical Laboratory， Ningjin Peoples Hospital， Dezhou City， Shandong， Dezhou， Shandong 253400， China

【Abstract】Objective：To investigate the predictive value of real-time fluorescent human papillomavirus （HPV） detection and thinprep cytology test （TCT） in cervical lesions.Methods：A total of 1786 women who underwent cervical screening in our hospital were selected as the research objects，and real-time fluorescent HPV detection，TCT and colposcopy pathological test were performed on them.The pathological test results were used as the gold standard to evaluate the predictive value of real-time fluorescence HPV detection and TCT.Results：Among the 1786 women tested in this study，131 cases were confirmed by pathological screening，with the incidence rate of 7.33%.The positive rates of TCT，real-time fluorescent HPV detection and TCT combined with real-time fluorescent HPV detection were 2.97%，5.60% and 6.83%，respectively.The sensitivity，specificity，positive predictive value and negative predictive value of TCT combined with real-time fluorescent HPV detection were 91.60%，99.88%，98.36% and 99.34%，the sensitivity and positive predictive value of TCT combined with real-time fluorescence HPV detection were higher than those of TCT and real-time fluorescent HPV detection，the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of cervical lesions，the combined screening of real-time fluorescent HPV detection and TCT has high predictive value and is worth popularizing.

【Key Words】Real-time fluorescent HPV detection； TCT； Cervical lesions； Predictive value

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤。研究報道表示[1]，99.7%的宮頸癌與高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染密切相關[2]，但該方法單獨篩查其特異性非常低，需要聯合液基薄層細胞學檢查（TCT）、陰道鏡復查。現以我院開展宮頸篩查工作接收的1786例女性的相關情況做如下總結。

1 資料與方法

1.1臨床資料

本研究采取回顧性分析，以2021年1月—2023年3月在我院接受宮頸篩查的1786例女性作為研究對象。（1）納入標準：年齡20歲及以上；有正常性生活史；無子宮切除術病史；非經期；非妊娠階段；無宮頸治療病史和盆腔照射史；同時接受實時熒光HPV檢測與TCT，呈現為陽性的患者；受檢3d時間內無陰道用藥史、性交史；有明確的病理組織檢查結果；有完整的臨床資料信息。（2）排除標準：合并有全身腫瘤或者盆腹腔包塊；急性生殖系統感染性疾病；臨床資料不全；妊娠期女性。本研究1786例女性，年齡18～65歲，平均年齡（39.8±3.32）歲；孕次0～4次，平均孕次（2.2±1.0）次；產次0～3次，平均產次（1.8±0.7）次。

1.2方法

1.2.1婦科檢查與標本收集

接受檢查的婦女均要求在經期干凈之后3～7d進行，由婦科醫生對婦女實施常規婦科檢查，并運用兩支干燥的無菌棉拭子在陰道壁中上1/3或者陰道穹隆部位刮取適量的陰道分泌物，將兩支棉簽分別放置于液基細胞保存液中保存備用；另采用人乳頭瘤病毒專用刷，在宮頸口部位順時針旋轉3～5圈，將其置于HPV樣本保存液中保存備用，以便后續進行實時熒光HPV檢測與TCT。由有著豐富實踐經驗的陰道鏡醫生對細胞學檢查結果進行分析，針對細胞學檢查結果顯示為陰性但HPV16/18顯示為陽性、不典型的鱗狀細胞（ASCUS）受試者實施陰道鏡檢查，若陰道鏡暴露充分且表現出病變情況則在異常部位截取活檢，若陰道鏡暴露不充分則通過陰道搔刮術（ECC）檢查。

1.2.2檢測方法

（1）TCT：由婦科醫生拭去宮頸表面黏液及分泌物，使用活細胞取樣刷對患者病灶部位進行采樣，再對樣本進行細菌分解，進行制片、凝固和巴氏染色等檢查。（2）實時熒光HPV檢測：采用實時熒光PCR法。采集患者分泌物或宮頸脫落細胞，使用多重核酸的擴增與熒光檢查方法檢查HPV。（3）陰道鏡下組織病理學檢查：宮頸消毒后在陰道鏡下取可疑病變部位宮頸組織，行石蠟切片檢查。

1.3觀察指標及診斷標準

比較TCT、實時熒光HPV檢測及TCT聯合實時熒光HPV檢測的診斷結果。①TCT診斷標準：國際癌癥協會Bethesda報告系統（TBS）診斷系統：正常范圍；非典型的鱗狀細胞（ASC-US）；非典型鱗狀細胞傾向上皮內高度病變（ASC-H）；低度鱗狀上皮內病變（LSIL）；高度鱗狀上皮內病變（HSIL）；不典型腺細胞、宮頸管原位癌（AIS）；鱗狀細胞癌（SCC）或腺癌（CA）。②TCT陽性診斷指ASC-US及以上的病變。實時熒光HPV檢測診斷標準：檢查結果為<1 pg/mL為HPV陰性；>1 pg/mL為HPV陽性。HPV陽性根據致癌性分為高危型、低危型。高危型HPV主要有16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、82型；低危型HPV有6、11、40、42、43、44、55、61、81、83型等。③陰道鏡下病理組織學結果判斷標準：正常；宮頸上皮內瘤樣病變（CIN）Ⅰ級；CINⅡ級；CINⅢ級；SCC。陰道鏡下病理組織學檢查結果為判定宮頸癌的金標準。

1.4 統計學方法

采用SPSS 25.0統計學軟件進行數據分析。計數資料采用（%）表示，進行x2檢驗，計量資料采用（x±s）表示，進行t檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 不同方法的篩查結果

本研究1786例受檢女性，經病理篩查，最終確診131例，發病率為7.33%，其中CIN I級84例，占64.12%；CIN II級19例，占14.50%；CIN Ⅲ級9例，占6.87%；宮頸癌19例，占14.50%。TCT、實時熒光HPV檢測與TCT聯合實時熒光HPV檢測篩出陽性率分別為2.97%、5.60%、6.83%，其中TCT陽性率低于病理檢測結果，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2不同篩查方法的診斷效能

以病理檢測結果為金標準，對TCT、實時熒光HPV檢測與TCT聯合實時熒光HPV檢測診斷效能進行計算，TCT聯合實時熒光HPV檢測靈敏度為91.60%、特異度為99.88%、陽性預測值為98.36%、陰性預測值為99.34%，其中靈敏度與陽性預測值均高于TCT與實時熒光HPV檢測，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

宮頸癌是目前影響全球女性身心健康的第四大惡性腫瘤疾病，我國作為宮頸癌高發國家，其發病率與死亡率均居于世界首位[3]。宮頸癌從癌前病變逐漸演變為浸潤性宮頸癌需要經歷一個較為漫長的過程，并且在這個過程中，宮頸內瘤變是可實現逆轉的，為此，宮頸癌是一種能夠進行早期預防的臨床疾病，早期的干預不僅能夠促使發病率得到降低，同時還能夠達到100%的早期治愈率。現階段，陰道鏡活檢組織病理學診斷是宮頸癌診斷的“金標準”，但該方法本身是一種有創手段，且不能夠適用于農村地區的普及篩查，為此，被作為初篩陽性病例的復查手段，能夠為臨床提供更為充分的診斷指導。

在有正常性生活的女性群體中，80%以上的女性在其一生中至少感染一種型別的HPV，但絕大部分均屬于一過性感染，因HPV-DNA檢查很難識別這種一過性感染，導致HPV患者出現了不必要的復查隨訪，甚至是過度診療的情況，不僅使得患者承擔不必要的經濟損失，還會造成極大的心理負擔[4]。有研究報道表明，HPV早期編碼區域中E6/E7基因均屬于致癌性基因，其呈現出的陽性表達也是宮頸癌發生發展中的必然過程，簡單來說，就是在沒有E6/E7基因表達的情況下，那么細胞通常不會出現癌變[5]。同時還有研究者認為，E6/E7 mR-NA轉錄產物能夠客觀體現出癌基因的活性程度，當其表達出現增加時，就會導致宮頸癌和高度鱗狀上皮內病變風險升高。為此，相較于HPV與TCT檢查手段，TCT聯合實時熒光HPV檢測能夠掌握HPV E6/E7mRNA檢測，更為準確地判斷持續感染情況，而避免過度診療情況出現[6]。根據本次結果來看，通過陰道鏡為患者復查，確診患者131例，發病率為7.33%，而通過TCT檢查僅發現53例，實時熒光HPV檢測僅發現100例，兩者聯合發現122例，均稍低于病理檢查結果，盡管實時熒光HPV單獨檢測與實時熒光HPV檢測聯合TCT與病理結果無差異（P>0.05）。但根據診斷效能來看，實時熒光HPV單獨檢測、實時熒光HPV檢測聯合TCT檢查均存在假陽性情況，其中TCT聯合實時熒光HPV檢測的假陽性率相對較低，具有較高診斷靈敏度。即表明通過陰道鏡來實施進一步檢查，能夠準確對患者進行判定，而通過TCT聯合實時熒光HPV檢測可提高初篩的準確性，盡量減少漏診、誤診情況。

綜上所述，在宮頸病變篩查中，采取TCT聯合實時熒光HPV檢測進行初篩具有較高的應用價值，但仍然需要安排患者做進一步的陰道鏡檢查，以便更好、更為客觀地評價病變情況，為臨床診療方案的制定提供依據。

參考文獻

[1] 王瑞，陳咪咪.實時熒光PCR法在高危型HPV檢測中的應用價值[J].臨床醫學研究與實踐，2022，7（28）：123-126.

[2] 麥艷媚.實時熒光PCR與基因芯片法檢測人乳頭瘤病毒的方法學比較[J].吉林醫學，2021，42（12）：2882-2884.

[3] 羅軼碩.實時熒光人乳頭瘤病毒檢測聯合液基薄層細胞學檢查在宮頸癌篩查中的應用價值[J].醫療裝備，2021，34（20）：26-28.

[4] 王曉明，戴衛健，余道軍，等.多重實時熒光定量PCR方法在高危型人乳頭瘤病毒E6/E7mRNA檢測中的應用[J].臨床檢驗雜志，2020，38（11）：841-844.

[5] 嚴良烽，謝超，方景文.基于分子生物學水平的核酸實時熒光定量聚合酶鏈反應人乳頭瘤病毒基因分型檢測技術的臨床應用[J].實用醫技雜志，2020，27（9）：1170-1171.

[6] 高雙霞，姚大雋.陰道鏡檢查在宮頸癌篩查中的應用意義分析及研究[J].臨床醫藥文獻子雜志，2020，7（5）：158-162.