枝條蜜環菌栽培種液體培養技術

胡萬金 祝 勇 肖 力 王江虹

蜜環菌，又稱蜜環蕈、蜜蘑、榛蘑，是擔子菌門、傘菌綱、傘菌目、白蘑科、蜜環菌屬真菌，多生長在針葉林或闊葉林中，在我國的東北、華北、西北、四川、云南等地均有分布。

蜜環菌是天麻、豬苓的共生真菌，是天麻、豬苓生長發育的營養來源。此外，蜜環菌還具有一定的食用價值和藥用價值，其菌蓋和菌柄味道鮮美、營養豐富，可以食用；同時，蜜環菌具有祛風通絡、強筋骨、益腸胃、清熱解毒等功效。

液體培養是枝條蜜環菌栽培種傳統生產方式，具有生產技術簡單、原材料易于收集、商品菌種易于保存且保存期長，栽培天麻、豬苓產量高等特點。 陜西、甘肅、湖北、貴州等地農戶廣泛使用枝條蜜環菌液體培養的菌種生產天麻、豬苓。 目前，陜西漢中枝條蜜環菌液體栽培種產量已占全國60%以上。 以下總結枝條蜜環菌液體栽培種生產技術，供參考。

1 蜜環菌的形態特征

蜜環菌的子實體為淺土黃色或淺黃褐色肉質，菌蓋半球形，菌柄上有菌環，菌肉白色。 子實體成熟后產生孢子，形成白色的孢子印（孢子粉聚集形成的一種現象）。 孢子無色或微黃，光滑，呈圓形。 孢子在適宜條件下萌發形成菌絲， 菌絲聚集后形成繩索狀長束，稱為菌索，菌索棕褐色，老化后呈黑褐色，菌索從腐朽的樹木或活的樹根上吸取營養， 在樹皮或土壤中蔓延。菌絲和菌索在黑暗條件下都能發出螢光，發光的強弱與溫度、 菌絲的成熟度和接觸空氣量有關，溫度越高、菌絲成熟度越高、接觸空氣的面越大，螢光越強。

自然界中還有一種假蜜環菌， 其與蜜環菌的主要區別是前者的子實體沒有菌環，不能為天麻、豬苓提供營養。

2 蜜環菌的生長條件

蜜環菌常在夏秋季節生長于闊葉林中， 對生長環境要求比較嚴格，喜歡溫暖、濕潤、通風良好的環境，同時還需要一定的光照條件，疏松、肥沃、排水良好、酸堿適度的土壤條件，以及充足的水分和氧氣。

1）溫度。蜜環菌的菌絲體在5~30 ℃環境下均可生長， 但在18~24 ℃下生長最快， 生產中一般采用15~18 ℃低溫培養發菌， 這個溫度條件下培養出的蜜環菌菌絲體生長健壯。 菌絲和菌索在20~25 ℃下發出的熒光最強。低于5 ℃菌絲體進入休眠狀態，高于30 ℃菌絲體停止生長， 超過34 ℃會導致菌絲體死亡。

2）濕度。 蜜環菌喜歡在潮濕、透氣的條件下生長發育。 在自然界中空氣濕度達到60%以上時，蜜環菌生長發育很好，空氣濕度低于30%時，菌絲生長緩慢甚至停止生長。 人工培養蜜環菌的菌材（木質）含水量應保持在45%~60%，空氣濕度保持在70%~85%。

3）氧氣。 蜜環菌是好氣性真菌，其菌絲、菌索和子實體生長發育都需要氧氣， 同時菌索具有運送氧氣的功能。因此，蜜環菌的菌索可以在固體或半固體培養基中穿透一定的距離， 這也是蜜環菌可以在濕透的段木中生存的原因。

4）光線。 蜜環菌的菌絲和菌索需要在暗光中培養，而子實體的形成則需要光線的刺激，子實體的生長發育需要散射光，否則生長不良，畸形或不孕。

5）酸堿度。蜜環菌的菌絲體在pH 值4.5~7 之間可以正常生長， 最適宜的pH 值為4.5~6.5，pH 值超過7 生長不良。因此微酸性環境最適合蜜環菌生長。

6）營養條件。蜜環菌可以木材中的纖維素、半纖維素和木質素等作為營養來源， 同時還需要一定的氮、磷、鉀等元素，可選擇櫟樹、樺樹、蘋果樹等作為蜜環菌培養基質。

3 蜜環菌栽培種液體培育

3.1 培育時間 氣溫8～25 ℃均可， 最適氣溫15～26 ℃，從接種至菌絲長滿需25～35 d。 陜西漢中地區枝條蜜環菌液體栽培種一般從10 月初開始生產，一直到次年4 月底結束。

3.2 原材料準備與處理

3.2.1 準備塑料瓶 枝條蜜環菌液體栽培種生產一般采用帶海綿、透氣瓶蓋的塑料瓶，常用750 mL 塑料瓶，少量的用1 500 mL 塑料瓶，根據生產季節提前預備。

3.2.2 準備菌枝 培養蜜環菌的樹種可選擇樺類、櫟類等闊葉樹種。 秋后樹體落葉后至第2 年發芽前收集直徑1.5~2.5 cm 的枝條，用機器截成長3~4 cm的小段，截口呈45°。 裝瓶前1~2 d 將菌枝在水中浸泡24~48 h，瀝干水分備用。

3.3 生產技術

3.3.1 裝瓶 采用人工或機器搖瓶的方式裝瓶。 將浸泡后的菌枝裝入塑料瓶中， 裝入量一般為瓶子容積的4/5，750 mL 塑料瓶約需0.3 kg 枝條。 裝好枝條后加入3~5 粒玉米粒，然后加滿清水，蓋上蓋子。 當天加水當天滅菌，不能放置太長時間。

3.3.2 滅菌 將裝好瓶的原料放入高壓滅菌鍋內滅菌， 開大火迅速將滅菌容器壓力升至0.05 MPa，排氣，排完氣后將壓力升至0.125 MPa，保持2.5~3 h。待壓力下降至0.05 MPa 后再緩慢排氣。 切不可在高壓狀態下快速排氣， 以免瓶內水分溢出， 造成瓶內缺水。

3.3.3 冷卻 滅菌完成后， 將菌瓶放入冷卻車間自然降溫。菌瓶移動過程中要保持直立，瓶內的水不能溢出。

3.3.4 接種 當菌瓶內溫度降至25 ℃以下時便可以接種。 按照常規無菌操作在接種箱或接種室內進行。需要注意的是，枝條蜜環菌液體栽培種生產用的蜜環菌原種通常是固體或液體。 在接種時需要嚴格控制菌瓶內的水位：使用固體蜜環菌原種接種時，瓶內水位以剛剛和枝條平齊為宜， 接種后要求蜜環菌原種的菌塊一半在水中一半露出水面； 使用液體蜜環菌原種接種時，瓶內水位以枝條露出水面1~2 cm為宜，接種后要求菌球（液體菌種中的菌絲結團）露出水面。這樣操作有利于促進菌種快速萌發，提高成活率。

3.3.5 保溫培養 接種后搬運菌瓶時務必要保持直立，輕拿輕放。 將菌瓶放入培養室內發菌培養，培養室溫度控制在18~24 ℃， 一般25~35 d 可以長滿菌瓶。蜜環菌長滿瓶后，繼續培養45~60 d，待菌絲由棕紅色逐漸變成亮白色， 瓶內結塊呈果凍狀后方可打包銷售。枝條蜜環菌栽培種菌種菌齡不足，播種后易被污染或菌絲不萌發。

3.3.6 留樣保存 每個蜜環菌品種、 每個批次留樣5~7 瓶， 于0~6 ℃下保存至正常生產條件下該批菌種生產出天麻或豬苓為止。

4 小結

科學應用枝條蜜環菌液體栽培種生產技術，可以提高蜜環菌的產量和質量，降低生產成本，減少環境污染。 生產過程中要嚴格控制培養條件，如溫度、濕度、光照等，同時還要注意防止雜菌污染，保證蜜環菌的品質和產量。