14種消毒劑體外抑菌效果評價

鄧淼汐 蔣清蓉 邱榮斌

基金項目：蛋雞產業技術創新體系建設項目（項目編號：2022ZYDF077）

摘? 要：為了篩選體外抑菌效果較好的消毒劑，本文對碘制劑類、季銨鹽類和復方戊二醛類這三類共14種消毒劑的體外抑菌效果進行評價。采用最小抑菌濃度法對14種消毒劑殺滅大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的效果進行對比。結果顯示：14種消毒劑中，季銨鹽類消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的消毒效果最好，其次是復方戊二醛類，最后是碘制劑類。其中季銨鹽類消毒劑月芐三甲氯銨對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好，其次是癸甲溴銨，再次是苯扎溴銨。本試驗為后續開展雞場帶雞消毒試驗選擇消毒劑提供了參考依據。

關鍵詞：消毒劑；體外抑菌；效果

中圖分類號：S859.79 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2024）02-0030-04

消毒劑是指能夠殺滅傳播媒介中的病原微生物，從而達到無害化要求的制劑。其主要作用機理是改變微生物賴以生存的環境，使微生物的內外結構發生改變，導致主要代謝機能出現障礙，生長發育受阻，從而喪失活性失去致病力[1]。不同類型的消毒劑有不同的消毒效果。消毒劑按其作用水平可分為滅菌劑、高效消毒劑、中效消毒劑、低效消毒劑。近幾年，消毒劑已廣泛應用于工業、醫療衛生、農業等各個行業，人們對消毒劑的應用研究有了很大的進展[2]。

本試驗選用季銨鹽（苯扎溴銨）、復方戊二醛（戊二醛癸甲溴銨）、碘制劑（聚維酮碘）三類消毒劑。季銨鹽消毒劑是20世紀Jacobs等首次合成的季銨鹽類化合物，主要產品之一為苯扎溴銨[3]；戊二醛癸甲溴銨可以廣譜、高效殺滅各種細菌、真菌、病毒、支原體和衣原體。聚維酮碘作為一種優良的皮膚黏膜消毒劑和外用藥已被許多國家的藥典收錄[4]。隨著消毒劑的頻繁使用，抗藥菌株不斷出現，有必要定期測定以評價不同消毒劑的消毒效果。

1? 材料與方法

1.1 菌株

大腸桿菌標準菌株（C83907）和金黃色葡萄球菌菌株由鐵騎力士集團馮光德實驗室保存。

1.2 消毒劑

14種消毒劑由多個廠家提供，產品信息如表1。

1.3 試驗試劑

營養瓊脂、營養肉湯培養基購自杭州微生物試劑有限公司。

1.4 試驗方法

1.4.1 培養基的制備

營養瓊脂培養基的制備：稱取營養瓊脂33 g于試劑瓶中，加入1 000 mL水，121 ℃高壓滅菌15 min，在超凈工作臺中倒板，每個培養皿15～20 mL。

營養肉湯培養基的制備：稱取營養肉湯1.8 g于試劑瓶中，加入100 mL水，121 ℃高壓滅菌15 min，置于超凈工作臺中備用。

1.4.2 消毒劑的配制

消毒劑按照其產品使用說明進行配制，稀釋比例如表2。

1.4.3 細菌培養

吸取3 μL大腸桿菌菌種保存液，接種于8 mL營養肉湯中，37 ℃恒溫培養器中培養16～18 h進行菌種活化及增殖。無菌吸取1 mL活化菌液至9 mL營養肉湯中，充分振蕩搖勻，得到稀釋10-1的菌液，照此方法依次制成稀釋10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7的菌液，每個稀釋度更換無菌吸管。分別吸取0.1 mL不同稀釋度的菌液到營養瓊脂平板上，將菌液涂布均勻，倒置，放37 ℃恒溫培養箱中培養16～18 h，計菌落數。最終配制菌液：大腸桿菌活菌數為1.5×108 CFU/mL，金黃色葡萄球菌活菌數為3.6×108 CFU/mL。

1.4.4 最小抑菌濃度測定

將配制好的消毒液分成14組，每組10個EP管，各組第1個EP管分別為0.5 mL原液，第2～10個EP管中加入0.5 mL營養肉湯，從第 1個EP管開始依次往后稀釋。在稀釋好的各管消毒液中加入3 μL菌液，每管做好標記，放37 ℃恒溫培養箱培養24 h，然后每組在? ? ? 2個營養瓊脂平板上分隔劃線，繼續放37 ℃恒溫培養箱培養16 h，觀察結果，判斷最小抑菌濃度（minimal inhibit concentration，MIC）。最小抑菌濃度越低，代表消毒劑的抑菌效果越好。

2? 結果與分析

2.1 消毒劑對大腸桿菌的最小抑菌濃度

3種碘制劑消毒劑（A、B和C）對大腸桿菌的最小抑菌濃度分別為50、50、100 μL/mL，如圖1-圖6。

3? 結論

消毒是貫徹“預防為主”方針的一項重要措施，目的是消滅外界環境中的病原體，以切斷傳播途徑，阻止疫病繼續蔓延。本試驗采用最小抑菌濃度法對14種消毒劑的抑菌效果進行了快速有效的評價。不同種類的消毒劑抑菌效果各不相同，同一類消毒劑的抑菌效果也存在微小差異。對兩種病原菌的抑菌效果來看，碘制劑中的B消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；季銨鹽中的D和E消毒劑對大腸桿菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；F和G消毒劑對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好；復方戊二醛中的K消毒劑對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度最小，抑菌效果最好。使用安全高效的消毒劑可以減少病原體傳染的概率，從而增加養殖收益[5]。養殖場在實際消毒過程中，消毒對象、溫度、濕度、作用時間、污染程度等因素都會對消毒效果產生一定的影響，因此養殖場選擇消毒劑要根據消毒對象選擇適當類型的消毒劑，并根據消毒條件調整消毒劑使用比例，以達到理想的消毒效果。

參考文獻

[1] 鄭舉，劉紅云，陳靜，等．消毒劑的作用機理及在養殖業中的應用[J]．現代農業科技，2019（8）：14-15.

[2] 王潔瓊，趙玉杰，周薇帆，等．不同消毒劑抑菌效果觀察[J]．河南畜牧獸醫（綜合版），2017，38（1）：6-7.

[3] 張朝武．應用廣泛的季銨鹽類消毒劑[J]．現代預防醫學，2006，33（5）：855-857.

[4] 蘇潤雨，聶伯堯，楊百亮．3種消毒劑對金黃色葡萄球菌殺菌作用的研究[J]．天津農學院學報，2016，23（3）：51-54.

[5] 董雯雯，李峰，張世棟，等．家禽養殖場常用消毒劑及消毒效果評價方法研究進展[J]．家禽科學，2019（9）：53-56.