B細胞激活因子及其靶向藥物與炎癥性腸病的研究進展

李琳 劉海燕 綜述 王立俊 審校

（山東第一醫科大學附屬省立醫院兒科，山東濟南 250000）

炎癥性腸病（inflammatory bowel disease, IBD）是一種免疫介導的慢性腸道炎癥性疾病，分為潰瘍性結腸炎（ulcerative colitis, UC）、克羅恩病（Crohn's disease, CD）、 炎 癥 性 腸 病 未 定 型（inflammatory bowel disease-unclassified, IBDU）3 個類型，發病機制涉及腸道微環境穩態失衡、免疫功能失調、環境變化和遺傳因素［1-2］。既往研究顯示T細胞及其釋放的細胞因子在IBD的發展中起重要作用［3-4］，而B細胞在IBD中的作用尚不清楚。B細胞激活因子（B-cell activating factor, BAFF）是腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor, TNF）超家族成員，因其能刺激B 細胞生長而得名。它由單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞和嗜中性粒細胞等髓系細胞產生，主要作用是維持B細胞存活、刺激其分化為漿細胞而產生抗體［5］。在許多自身免疫性疾病中已發現BAFF 的過量產生，而BAFF 抑制劑貝利尤單抗也已被批準用于治療系統性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus, SLE）和類風濕關節炎等自身免疫性疾病［6］。近年來有學者對BAFF及其靶向藥物在IBD中的作用進行了相關研究，本文對其進行綜述，旨在為IBD靶向治療提供思路。

1 BAFF的結構及表達

人BAFF 是由染色體13q32.34 上一條全長約26 kb 的mRNA 編碼表達的Ⅱ型跨膜蛋白，以膜結合性和可溶性2種形式存在，前者由285個氨基酸組成，經蛋白酶水解后，形成可溶性蛋白。在生理條件下，膜結合的BAFF在細胞表面表達為同源三聚體，可以被弗林蛋白酶水解，釋放出具有生物活性的可溶性17 kDa分子［7］。BAFF與TNF超家族成員增殖誘導配體（a proliferation-inducing ligand, APRIL）的蛋白序列具有33%的同源性［8］。

中性粒細胞可能是BAFF的重要來源［9］。多種細胞因子，包括干擾素（interferon, IFN）-γ、IFNα、轉化生長因子-β （transforming growth factor,TGF-β）、白細胞介素（interleukin, IL）-10 和粒細胞集落刺激因子（granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF）能夠上調BAFF 在髓系細胞上的表達［10］。Toll 樣受體（Toll-like receptor, TLR）活化，特別是TLR4 或TLR9，也誘導髓系細胞產生BAFF［11］。T 細胞、活化B 細胞等非髓系細胞也可產生BAFF。此外研究發現腮腺上皮細胞、星形膠質細胞、成纖維細胞樣滑膜細胞、支氣管上皮和非霍奇金淋巴瘤惡性B細胞也可分泌BAFF［12］。

2 BAFF的受體

BAFF的生物學作用由3種受體介導：BAFF受體（BAFF-receptor, BAFF-R）、B 細胞成熟抗原（B-cell maturation antigen, BCMA），以及跨膜激活物、鈣調節物、親環蛋白配體相互作用物（transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor, TACI）。膜結合性及可溶性BAFF、APRIL 均能與TACI、BCMA 高親和性結合，BAFF 還能與BAFF-R 結合［12］。與BAFF 相比，BCMA 對APRIL 的親和力更強［8］。BAFF-R 和TACI在脾臟和外周血的成熟B細胞亞群中高表達，BCMA 在骨髓漿細胞、生發中心B 細胞中表達。BAFF與不同靶細胞上的不同受體結合可能介導不同的生物學功能。

2.1 BAFF-R

BAFF-R 由腫瘤壞死因子受體超家族成員13C（tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C,TNFRSF13C）基因編碼，主要在B 淋巴細胞上表達，在外周血單核細胞檢測到較高水平［12］。BAFF 與BAFF-R 結合在促進過渡期B 細胞成熟、延長成熟B 細胞壽命方面具有重要意義［13］。A/WySnJ小鼠是Baffr基因天然突變小鼠，其B細胞發育過程被阻斷，導致脾臟濾泡區及邊緣區B細胞明顯減少。這些小鼠的成熟外周B細胞數量減少，但骨髓B細胞生成和過渡期B細胞不受影響。Baffr突變小鼠存在抗體反應缺陷，與BAFF 缺陷小鼠相似。BAFF 過表達時誘導自身反應性B 細胞克服死亡信號而延長生存也是通過BAFF/BAFF-R 通路介導［14］。BAFF-R也在效應T細胞表面表達，這表明BAFF/BAFF-R 通路可能在T 細胞功能中發揮作用［15］。體內外研究證實，BAFF與CD4+T細胞亞群表達的BAFF-R 結合，共同刺激T 細胞活化和同種異體增殖。來自Baffr突變小鼠的T細胞對BAFF的免疫刺激作用無反應，這表明BAFF-R 是促進1 型T輔助細胞反應的主要受體［16］。

2.2 TACI

TACI 是一種Ⅲ型跨膜蛋白，高親和BAFF 和APRIL。TACI主要在B細胞上表達，在記憶B細胞中的表達水平高于穩態的幼稚B細胞，可抑制B細胞擴增、促進漿細胞分化和存活。TACI 通過限制B細胞誘導成熟蛋白-1克隆擴增B細胞、產生長壽命漿細胞來調節B 細胞功能。TACI基因敲除小鼠出現自身免疫性疾病、惡性淋巴瘤可進一步證實這一點［17］。

TACI 也可在非T 細胞依賴性的體液免疫應答中發揮作用。研究發現TACI基因敲除小鼠對Ⅱ型抗原的非T 細胞依賴性免疫應答缺失［15］，而維持了對T細胞依賴性抗原（如鎖孔帽貝血藍蛋白）的免疫應答［18］。

2.3 BCMA

BCMA 是由185 個氨基酸殘基組成的Ⅲ型跨膜蛋白，表達于生發中心B 細胞和骨髓漿細胞表面。BCMA基因位于16p13，編碼基因mRNA 長度為1.2 kb。BCMA 缺陷對外周B 細胞的數量、亞型分布、平均壽命沒有明顯影響。BCMA在促進成熟B細胞的抗原呈遞和維持漿母細胞存活方面具有重要作用。BCMA在成熟B細胞分化為漿細胞階段表達，推測其可能在B細胞激活和終止分化中起重要作用。BCMA與轉接蛋白TNF受體關聯因子（TNF receptor-associated factor, TRAF） 1、 TRAF2 和TRAF3 相關，推測BCMA 通過與配體結合而介導靶細胞的存活和增殖。

3 BAFF與促炎信號通路的關系

核因子κB（nuclear factor kappa B, NF-κB）活化被認為是誘導IBD的主要炎癥途徑［19］。NF-κB是由多種觸發因素激活的轉錄因子家族，如促炎細胞因子、病原體相關分子模式，在先天性和適應性免疫中起關鍵作用。在IBD患者的腸黏膜上皮細胞和巨噬細胞中檢測到活化的NF-κB，其表達水平與炎癥強度有關。BAFF 阻斷劑可通過抑制NF-κB信號通路和核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3）炎性小體激活來改善結腸炎［20］。BAFF 通過BAFF/BAFF-R 通路，作用于NF-κB信號通路非經典途徑，NF-κB誘導激酶可磷酸化并激活κB 抑制激酶α（inhibitor of kappa B kinase α, IKKα），IKKα 進一步磷酸化NF-κB2 蛋白前體p100，導致p100 加工并釋放活性成熟p52 亞基。核苷酸結合寡聚化結構域樣受體家族（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors, NLRs）包括NLRP3 等，是模式識別受體家族的亞類，與多種炎性和自身免疫性疾病的發展相關，如IBD、阿爾茨海默病、哮喘等，在激活時導致各種促炎細胞因子（如IL-1b、IL-18等）的成熟和釋放，經TLR 誘導，通過合成IL-1b 前體和NLRP3激活NF-κB［21］。

BAFF 也參與其他炎癥途徑，如BAFF 通過BCMA 和TACI 可觸發MAPK 信號通路。BAFF 誘導的B 細胞激活實際上不依賴于ERK1/2 激活，但需要ERK5 激活。在B 細胞中ERK5 缺失導致成熟B細胞數量明顯減少，BAFF 上調Bcl-2 家族的Mcl-1和Bcl-2a1 需要ERK5 參與，但ERK5 缺失不影響BAFF 參與促進成熟B 細胞存活的PI3K-Akt 及NFκB信號轉導途徑的激活［22-23］。

4 BAFF與IBD

近期研究表明，UC患兒與正常健康兒童相比，外周血和腸道組織中調節性B 細胞數量顯著降低，同時血清IL-10水平降低，Mayo評分、C反應蛋白、紅細胞沉降率與調節性B 細胞數量和IL-10 濃度呈負相關［24］。結腸組織活檢結果證實，UC 和CD 患兒結腸中BAFF mRNA 和蛋白表達均高于對照組。BAFF 上調主要存在于UC 黏膜炎癥部位的腸黏膜固有層單核細胞中。

UC、CD 患兒血清和糞便中的BAFF 水平高于應激性潰瘍和健康對照組，與糞便鈣衛蛋白表達水平顯著相關［24］。研究表明，與對照組相比，IBD患者血清、糞便和結腸黏膜中的BAFF 表達增加［25］。同時，血清BAFF 可用于監測疾病活動度。與腸易激綜合征患者相比，無論疾病活動度如何，IBD 患者的血清和糞便BAFF 濃度都顯著增高，均高于325 pg/mL的臨界值，活動性IBD患者對BAFF濃度升高具有更高的敏感性，隨著疾病活動性的降低，BAFF血清水平迅速恢復到與健康受試者相似的水平［25］。BAFF血清水平與疾病活動性和炎癥生物標志物呈正相關，表明BAFF 在IBD 中的作用主要是促進炎性反應。

5 BAFF和其他免疫性疾病的關系

多種自身免疫性疾病的發生發展與BAFF過表達有關。SLE 患者的血BAFF 顯著升高，活動性患者的水平高于非活動性患者，SLE 患者BAFF 的高表達和不良預后密切相關［26］。研究表明，與健康對照相比，自身免疫性肝炎患者的血清BAFF水平顯著升高，與谷丙轉氨酶、谷草轉氨酶、總膽紅素和可溶性CD30 呈正相關，這表明BAFF 與自身免疫性肝炎的肝損傷、疾病發展密切相關［27］。BAFF很可能是一種影響自身免疫性肝炎患者循環B 細胞的活性細胞因子［28］。在慢性阻塞性肺疾病患者和慢性香煙煙霧暴露小鼠的肺中BAFF表達顯著增加，預防性和治療性施用BAFFR-Fc后小鼠肺B細胞數量降低，慢性香煙煙霧誘導的淋巴濾泡形成減少、免疫球蛋白水平降低，顯著減輕肺部炎癥和肺泡壁破壞。吸煙患者的BAFF濃度高于非吸煙患者，表明BAFF與慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能受損、缺氧嚴重程度相關［29］。

6 BAFF靶向治療藥物

基于BAFF在自身免疫性疾病發病機制中的重要作用，目前已有多種BAFF靶向治療藥物進入臨床試驗階段。

6.1 貝利尤單抗

貝利尤單抗是針對BAFF的單克隆抗體。這一中和抗體能以高親和力形式與可溶性BAFF 結合，從而有效阻斷BAFF 與BAFF-R、TACI、BCMA 結合，其機制是特異性識別并抑制BAFF 生物活性，能顯著降低循環中B細胞水平。但是貝利尤單抗不能與膜結合性BAFF結合，也不能與TNF家族成員（如TNF-α、TNF-13、APRIL、IL-4 和IL-8 等）結合［13］。2019年7月，貝利尤單抗在我國獲批上市。

6.2 泰它西普

泰它西普是一種由TACI 胞外區及人IgG Fc 域構成的TACI-Fc融合蛋白，其中TACI可以與BAFF和APRIL 結合，Fc 片段可提高分子穩定性。泰它西普靶向對B 淋巴細胞發育至關重要的BAFF 和APRIL，能夠有效降低B 細胞介導的自身免疫應答，達到治療自身免疫性疾病的目的［30］。2021 年3月，泰它西普正式獲得中國國家藥品監督管理局批準上市，用于治療SLE［31］。

6.3 阿塞西普

阿塞西普由Merck Serono 公司開發，也是由TACI 胞外區和人IgG Fc 段組成的可溶性重組融合蛋白，可選擇性地殺傷成熟B細胞和漿細胞，但對原始B細胞和記憶性B細胞影響不大［32］。

6.4 Blisibimod

Blisibimod是一種由4個高親和力BAFF結合結構域與人IgG Fc片段組成的融合蛋白，是由二硫鍵連接的2 條多肽鏈。Blisibimod 能選擇性地與膜結合性和可溶性BAFF 結合，以抑制BAFF 與其受體的結合，從而減少B細胞存活和增殖［33］。

6.5 他巴尤單抗

他巴尤單抗與貝利尤單抗類似，是一種針對BAFF的全人源單克隆抗體［32］，能與膜結合性和可溶性BAFF 結合，從而抑制BAFF 介導的B 細胞增殖［34］。

6.6 放射性BAFF蛋白

非霍奇金淋巴瘤、B細胞慢性淋巴細胞白血病和多發性骨髓瘤等都是B系淋巴瘤，B細胞處于不受調控的惡性增殖狀態，對放射性物質很敏感，可根據B 細胞表面分布的特異性BAFF 受體，以BAFF負載放射原對B細胞系淋巴瘤進行靶向治療。用于靶向治療的放射性BAFF蛋白，特異性強、殺傷力小［35］。

6.7 BAFF重組抑制性短肽

利用噬菌體隨機肽庫技術，針對特異性配體BAFF構建重組的BAFF肽段，可競爭性抑制BAFF與淋巴細胞上受體的結合，達到抑制BAFF、活化淋巴細胞的目的，從而阻斷刺激單個核細胞增殖的活性，以及因T細胞、B細胞過度激活而誘導的自身免疫反應［36］。

6.8 BAFF類似物及BAFF-R阻滯劑

BAFF 類似物可與BAFF-R 競爭性結合，從而阻斷信號轉導來抑制BAFF 的生物學功能。BAFFR 阻滯劑與BAFF-R 選擇性結合，同樣以阻斷BAFF-R與BAFF結合，達到臨床治療作用［37］。

7 總結與展望

BAFF 是B 細胞成熟、維持存活和激活的關鍵參與者，可能將參與IBD 的各種B 細胞、T 細胞、骨髓細胞和其他細胞相關機制聯系起來。BAFF通過對免疫系統的多重影響可以促進腸道炎癥，在BAFF 抑制劑成功治療SLE、類風濕性關節炎的推動下，靶向BAFF 可能是治療IBD 中一種新穎且有前景的治療策略。

作者貢獻聲明：李琳負責收集、分析文獻和文章撰寫；劉海燕負責收集、分析文獻和文章修改；王立俊負責確定選題及文章審閱。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。