抗PCV4 Cap 蛋白抗體間接ELISA 檢測(cè)方法的建立

徐 鵬，吉衛(wèi)龍，伊立超，張 爽，郝嘉翼，高子函，任世斌，時(shí)小雙，任林柱，李 昌

（1.吉林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，長(zhǎng)春 130062；2.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院人獸共患病毒病防控關(guān)鍵技術(shù)研究創(chuàng)新單元，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院長(zhǎng)春獸醫(yī)研究所，長(zhǎng)春 130122）

豬圓環(huán)病毒4型（Porcine circovirus 4, PCV4）是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最小動(dòng)物病毒之一，屬于圓環(huán)病毒科、圓環(huán)病毒屬成員[1]。首次于2019年4月，由周繼勇團(tuán)隊(duì)從患有嚴(yán)重臨床疾病（包括呼吸道疾病、腹瀉和豬皮炎與腎病綜合征）的豬群中發(fā)現(xiàn)的一種與其他PCV同源性較低的新型PCV4[2]。其所屬的PCV病毒的病毒粒子具有直徑為14～17 nm的二十面體對(duì)稱、無(wú)囊膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，遺傳物質(zhì)均為共價(jià)閉合的單股環(huán)狀負(fù)鏈DNA。除PCV4外，PCV還有三種類型，分別為在PK-15細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)無(wú)致病性的豬圓環(huán)病毒1型（Porcine circovirus 1, PCV1）[3]；1991年被發(fā)現(xiàn)的可導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）和豬皮炎與腎病綜合征（Porcine dermatitis and nephropathy syndrome, PDNS）的具有致病性的豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus 2, PCV2）和2016年同樣引起PMWS、PDNS的具有致病性的豬圓環(huán)病毒3型（Porcine circovirus 3, PCV3）[4-8]。

PCV4的基因組全長(zhǎng)為1770 bp，一共包含12個(gè)開放閱讀框（open reading frame, ORF），與其他PCV類似，其ORF1和ORF2是兩個(gè)功能重要的開放閱讀框。其中ORF1大小為891 bp，編碼296個(gè)氨基酸的復(fù)制酶（Rep）蛋白，承擔(dān)PCV4基因組DNA在宿主細(xì)胞中的復(fù)制功能；ORF2大小為687 bp，編碼228個(gè)氨基酸的衣殼蛋白（Cap）蛋白，作為PCV4的唯一的結(jié)構(gòu)蛋白含有多個(gè)抗原決定簇可以引起機(jī)體較強(qiáng)免疫反應(yīng)。此外PCV4基因組具有代表圓環(huán)病毒復(fù)制起點(diǎn)的莖環(huán)基序（CAGTATTAC），與其他PCV的基因組同源性為43.2%～51.5%[2]。

近兩年以來(lái)，由于PCV4的感染性和致病性，在我國(guó)湖南省、河南省、山西省、江蘇省、廣西壯族自治區(qū)、內(nèi)蒙古自治區(qū)，韓國(guó)也都發(fā)生了PCV4的感染[2,9-16]。……