AIFM1 分子與豬偽狂犬病病毒UL16蛋白互作抑制病毒的增殖機制研究

徐晶晶，高 飛,2，武吉強，程雪飛，劉宇婷，傅欣玲，鄭 浩,2，童 武,2，童光志,2，李國新,2

（1.中國農業科學院上海獸醫研究所，上海 200241；2.揚州大學 江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協同創新中心，揚州 225009）

偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）是一個含有多蛋白的DNA病毒，成熟的PRV病毒結構包括病毒DNA、核衣殼、被膜和囊膜，其中核衣殼主要起支撐病毒結構和保護DNA的功能，大量的被膜蛋白和囊膜蛋白則在病毒粒子的增殖、調節宿主免疫通路和調控宿主凋亡等方面有廣泛的作用[1]。2011年，我國許多豬場發生了由PRV變異毒株引起的豬偽狂犬病，PRV經典疫苗如Barhta-K61等免疫不能為豬提供完全保護[2-3]。

2012年，本實驗室把PRV變異株JS-2012株在Vero細胞上39℃連續傳代120代后，獲得1株疫苗候選株JS-2012-F120株。和JS-2012相比，F120的測序結果顯示，UL16基因發生了移碼突變。UL16蛋白是PRV的重要被膜蛋白，在病毒的毒價、病毒在細胞上的擴散、病毒對小鼠的毒力等多方面有很重要的作用[4-5]。但是，迄今為止，對UL16蛋白的研究只停留在病原學，并未探討在PRV感染細胞時，pUL16可能參與的細胞通路。為了探索UL16蛋白對PRV的影響，本研究就pUL16的功能以及與其相互作用的分子進行了研究。本研究用IP的方法、借助質譜篩選了在PRV感染時，與pUL16相互作用的宿主蛋白，以研究pUL16可能參與的細胞通路。通過篩選發現UL16蛋白與凋亡誘導因子1（apoptosisinducing factor mitochondria associated 1, AIFM1）相互作用。AIFM1是一個結構復雜的線粒體蛋白，能優化線粒體呼吸鏈的功能、參與氧化還原代謝，是第一個被發現的caspase非依賴性的凋亡蛋白。現研究發現TGEV、IV、Rabies virus、PEDV等病毒均能誘導細胞產生caspase非依賴性的凋亡[6-9]，這可能預示pUL16參與細胞的氧化還原反應通路或凋亡通路。……