ACE2 rs2074192位點多態性與非乙醇性脂肪性肝病易感性的相關性

［收稿日期］2022-11-03;" ［修訂日期］2023-03-17

［基金項目］國家自然科學基金面上項目（32171277）

［第一作者］趙守林（1995-），男，碩士研究生。E-mail：145303-0783@qq.com。

［通信作者］宣世英（1961-），女，博士，教授，博士生導師。E-mail：xuansydxy@163.com。

［摘要］" 目的

探討青島地區人群血管緊張素轉化酶2（ACE2）rs2074192位點多態性與非乙醇性脂肪性肝病（NAFLD）易感性的相關性。

方法" 研究納入NAFLD病人208例，健康查體者105例。收集受試者的血液標本，提取DNA，應用多聚酶鏈反應（PCR）檢測ACE2基因rs2074192位點的基因型，比較ACE2 rs2074192位點基因型及等位基因頻率在NAFLD組及對照組的分布差異。同時收集受試者的臨床資料及實驗室生化檢查結果，比較不同基因型病人臨床資料及實驗室生化結果的差異。

結果" NAFLD組和對照組ACE2 rs2074192位點的基因型與等位基因分布差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。ACE2 rs2074192位點T等位基因女性攜帶者體質量指數高于未攜帶者，T等位基因男性攜帶者血清葡萄糖水平低于未攜帶者（t=-2.613、-3.195，Plt;0.05）。

結論" 青島地區人群ACE2 rs2074192位點多態性與 NAFLD 易感性無明顯相關性。

［關鍵詞］" 非酒精性脂肪性肝病；多態性，限制性片段長度；血管緊張素轉換酶2；疾病遺傳易感性

［中圖分類號］" R575.5

［文獻標志碼］" A

［文章編號］" 2096-5532（2024）01-0039-04

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.035

［開放科學（資源服務）標識碼（OSID）］

［網絡出版］" https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.R.20240329.0935.004;2024-04-01" 12：10：14

Association of ACE2 rs2074192 polymorphism with susceptibility to nonalcoholic fatty liver disease

ZHAO Shoulin， ZHANG Mei， ZHAO Zhenzhen， CHEN Lizhen， XUAN Shiying

＼ （Department of Infectious Diseases， Qingdao Municipal Hospital Affiliated to Qingdao University， Qingdao 266071， China）

＼; ［Abstract］＼ Objective＼ To investigate the relationship between the polymorphism at rs2074192 of the angiotensin-converting enzyme 2 gene （ACE2） and susceptibility to nonalcoholic fatty liver disease （NAFLD） in a population of Qingdao Province， China.

Methods＼ A total of 208 patients with NAFLD and 105 healthy subjects were included. DNA was extracted from their blood samples to determine the genotype of rs2074192 of the ACE2 gene by using polymerase chain reaction. The frequency distributions of ACE2 rs2074192 genotypes and alleles were compared between the NAFLD group and control group. The clinical data and laboratory results of patients carrying different genotypes were compared.

＼ Results＼ There were no significant differences in the distributions of ACE2 rs2074192 genotypes and alleles between the NAFLD group and the control group （Pgt;0.05）. Among female patients， the body mass index was significantly higher in T allele carriers than in those not carrying the T allele at ACE2 rs2074192 （t=-2.613，Plt;0.05）. Among male patients， serum glucose level was significantly lower in T allele carriers than in those not harboring the T allele （t=-3.195，Plt;0.05）.

＼ Conclusion＼ There was no significant association of ACE2 rs2074192 polymorphism with NAFLD susceptibility in the Qingdao population.

［Key words］＼ non-alcoholic fatty liver disease; polymorphism， restriction fragment length; angiotensin-converting enzyme 2; genetic predisposition to disease

非乙醇性脂肪性肝病（NAFLD）是一種受遺傳因素與環境因素綜合影響的代謝性疾病［1-2］，隨著病情進展，可以發展為非乙醇性脂肪性肝炎、肝硬化甚至肝癌［3］。近年來，隨著新型抗病毒藥以及干擾素應用于病毒型肝炎的治療及乙肝疫苗的廣泛接種，NAFLD已經逐漸超過病毒性肝炎成為發病率及致死率增長最快的慢性肝臟疾病［4］，預計疾病造成的社會負擔也會進一步增加［5-6］。血管緊張素轉化酶2（ACE2）是腎素-血管緊張素-醛固酮系統的關鍵酶，也是防治原發性高血壓的新靶點，該酶基因編碼了一種含有805個氨基酸組成的Ⅰ型膜結合糖蛋白［7］。有研究發現，ACE2可以增加胰島素敏感性，增加脂肪酸氧化，從而改善肝臟的脂質沉積［8-11］。ACE2基因位點呈現高度遺傳多態性，研究表明ACE2 rs2074192 T等位基因與視網膜病變的發生存在相關性［12］，攜帶T等位基因可增加原發性高血壓的發病風險［13］。NAFLD與高血壓、糖尿病等同為代謝綜合征的不同表現形式［14-15］。本研究對青島地區人群ACE2 rs2074192多態性與NAFLD發病風險的相關性進行探討，從而完善NAFLD遺傳易感性的人口學數據。

1" 資料與方法

1.1" 研究對象

選取2020年12月—2022年6月于青島市市立醫院消化內科、感染性疾病科及健康查體中心就診的NAFLD病人208例，男98例，女110例，均經超聲檢查確診。NAFLD的診斷及排除標準符合2010年修訂版《非酒精性脂肪性肝病診療指南》［16］。選取年齡、性別與其相匹配的105例健康查體者作為對照組。研究對象之間無血緣關系。本研究符合青島市市立醫院倫理委員會倫理要求，且所有受試者均簽署知情同意書。

1.2" 生化指標及基因型測定

所有受試者均在禁食12 h后采集全血進行生化指標的測定，包括總膽紅素（TBiL）、谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、γ-谷氨酰轉移酶（GGT）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、載脂蛋白B（ApoB）和空腹血糖（FPG）。采用多聚酶鏈反應（PCR）進行目的基因ACE2 rs2074192位點多態性分析。PCR引物序列：上游5′-ACGTTGGATGCCCTTAAACACAGCAGTCAC-3′，下游5′-ACGTTGGATGTTAGGTTCATCAACAGCTCC-3′。提取DNA后，由博淼生物科技（北京）有限公司基于Massarray技術進行ACE2 rs2074192位點核苷酸多態性測序。

1.3" 統計學處理

采用SPSS 20.0軟件進行統計學處理。符合正態分布計量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗；不符合正態分布者以M（P25，P75）表示，組間比較采用Wilcoxon 秩和檢驗。計數資料以例數表示，組間比較采用χ2檢驗。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2" 結" 果

2.1" 兩組一般資料比較

與對照組比較，NAFLD組體質量指數（BMI）及血清ALT、AST、GGT、FPG、TG、ApoB水平均升高，血清HDL水平降低，差異均有顯著意義（Z=-11.000～-2.134，Plt;0.05）；其余指標差異無統計學意義（Pgt;0.05）。見表1。

2.2" ACE2 rs2074192 基因型分析

鑒于ACE2 基因位于X染色體，將受試者分為女性和男性進行分析。男性及女性NAFLD組、對照組ACE2 rs2074192 基因型及等位基因分布差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。見表2。

2.3" 女性不同等位基因攜帶者一般生化指標比較

根據是否攜帶等位基因T將女性研究對象分為T等位基因攜帶者和T等位基因未攜帶者，T等位基因攜帶者BMI水平較T等位基因未攜帶者高（t=-2.613，Plt;0.05）。其余指標兩組間差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。見表3。

2.4" 男性不同等位基因攜帶者一般生化指標比較

男性T等位基因攜帶者較T等位基因未攜帶者血清FPG水平低（Z=-3.195，Plt;0.05）。兩組間其余指標差異無統計學意義（Pgt;0.05）。見表4。

3" 討" 論

NAFLD的發生和發展是環境與遺傳因素共同作用的結果［17］。ACE2 rs2074192位點已經被證明能夠影響高血壓、糖尿病等疾病的發生和發展進程［12-13］。本研究首次探討ACE2 rs2074192位點基因多態性與青島地區人群NAFLD發病風險的相關性，為NAFLD的診療提供新的思路。

有研究發現，ACE2敲除的小鼠在普通飲食情況下肝臟脂肪變性的程度較未敲除組加重，ACE2在人肝癌細胞中過表達；進一步研究發現，ACE2通過Ang-（1-7）/Mas軸起作用［11］。提示ACE2基因與NAFLD的發生存在相關性。本文研究未發現ACE2 rs2074192位點與NAFLD易感性之間的相關性，但是在女性中T等位基因攜帶者BMI水平高于未攜帶者。NAFLD作為代謝綜合征的肝臟表現，往往與體內代謝活動、脂質沉積等因素密切相關［16，18-19］。相關研究顯示，在女性糖尿病病人中，ACE2 rs2074192位點攜帶T等位基因能夠增加糖尿病視網膜病變的易感性［12］。在女性青少年中，該位點的雜合子攜帶者的TC水平較該位點的純合子攜帶者高［20］。一項未區分性別的研究結果顯示，ACE2 rs2074192位點與高血壓病人靶器官損害及原發性高血壓等的發生存在相關性［11］。糖尿病、高血壓、血脂異常等均屬于代謝紊亂的全身性疾病，ACE2 rs2074192位點影響代謝活動及心血管系統［21-22］，影響肝內外代謝過程。本文研究結果顯示，男性攜帶T等位基因者FPG水平較不攜帶者低，差異有顯著性。LIU等［23］研究顯示，攜帶T等位基因對糖尿病發病有保護作用，且在糖尿病病人中攜帶T等位基因者具有更低的糖化血紅蛋白水平。本文研究結果與其相一致。盡管本文研究未發現ACE2 rs2074192位點與NAFLD易感性之間有相關性，與前人臨床研究顯示AEC2 rs2074192位點能夠影響代謝綜合征的發生不一致［12，20］。但是鑒于該位點與BMI及FPG水平改變有關［24-25］，其對NAFLD發生發展的潛在影響仍不可忽視。

綜上所述，本研究未發現青島地區人群ACE2 rs2074192多態性與NAFLD發病風險有相關性。然而，本研究顯示女性ACE2 rs2074192位點T等位基因攜帶者BMI水平高于未攜帶者，男性T等位基因攜帶者血清FPG水平低于未攜帶者。本研究納入研究樣本量有限，未來需進行大樣本、多中心的進一步研究，以探討ACE2 rs2074192位點對肝內外代謝指標及NAFLD易感性的影響。

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（本文編輯 "黃建鄉）