中藥干預卵巢儲備功能減退動物模型療效的分析

[摘要]"目的"系統(tǒng)評價中藥干預卵巢儲備功能減退（diminished"ovarian"reserve，DOR）動物模型的療效。方法"計算機檢索中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)、中國生物醫(yī)學文獻服務系統(tǒng)、重慶維普、PubMed、Cochrane"Library、Embase數(shù)據(jù)庫中關(guān)于中藥治療DOR的隨機對照動物實驗，檢索時間為建庫至2022年9月20日。本研究由兩位研究者獨立篩選文獻、提取資料并進行文獻質(zhì)量評價，采用RevMan"5.4軟件進行Meta分析。結(jié)果"共納入19篇文獻，Meta分析結(jié)果顯示：中藥組與西藥組在改善卵泡刺激素、抗米勒管激素（anti-Müllerian"hormone，AMH）及竇卵泡計數(shù)（antral"follicle"count，AFC）方面均無顯著差異（Pgt;0.05）；但中藥組在改善雌二醇（estradiol，E2）方面較西藥組療效差。亞組分析顯示：隨著中藥劑量的增高，E2、AMH水平升高。結(jié)論"現(xiàn)有動物實驗證據(jù)表明，中藥可有效改善DOR動物模型的激素水平及AFC，且存在一定的量效關(guān)系。因納入研究數(shù)不多且總體質(zhì)量不高，故以上結(jié)論仍需更多高質(zhì)量文獻進行驗證。

[關(guān)鍵詞]"中藥；卵巢儲備功能減退；動物實驗；Meta分析

[中圖分類號]"R271.11""""""[文獻標識碼]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.07.018

Analysis"of"therapeutic"effect"of"traditional"Chinese"medicine"on"animal"model"of"diminished"ovarian"reserve

YANG"Jingjie，"YAN"Ying，"XU"Kaikai

Department"of"Gynecology，"First"Teaching"Hospital"of"Tianjin"University"of"Traditional"Chinese"Medicine，"National"Clinical"Research"Center"for"Chinese"Medicine"Acupuncture"and"Moxibustion，"Tianjin"300192，"China

[Abstract]"Objective"Systematically"evaluate"therapeutic"effect"of"traditional"Chinese"medicine"on"the"animal"model"of"diminished"ovarian"reserve"（DOR）."Methods""Using"computers"to"search"for"randomized"controlled"animal"experiments"on"traditional"Chinese"medicine"treatment"of"DOR"from"CNKI，"WanFang"Data，"SinoMed，"VIP，"PubMed，"Cochrane"Library，"and"Embase"databases，"with"a"search"period"from"database"establishment"to"September"20，"2022."Two"evaluators"independently"performed"literature"screening，"data"extraction"and"literature"quality"evaluation，"and"used"RevMan"5.4"software"for"Meta"analysis."Results""A"total"of"19"articles"were"included."The"results"of"Meta"analysis"showed"that"there"were"no"significant"differences"between"the"traditional"Chinese"medicine"group"and"the"western"medicine"group"in"improving"follicle"stimulating"hormone，"anti-Müllerian"hormone"（AMH）"and"antral"follicle"count（AFC）"（Pgt;0.05）."However，"the"traditional"Chinese"medicine"group"was"less"effective"in"improving"estradiol"（E2）"than"the"western"medicine"group."Subgroup"analysis"showed"that"E2"and"AMH"levels"increased"with"the"increase"of"the"dose"of"traditional"Chinese"medicine."Conclusion""The"existing"animal"experimental"evidence"shows"that"traditional"Chinese"medicine"can"effectively"improve"the"hormone"level"and"AFC"of"DOR"animal"models，"and"there"is"a"certain"dose"effect"relationship."Due"to"the"limited"number"of"studies"included"and"the"overall"low"quality，"the"above"conclusions"still"need"to"be"verified"by"more"high-quality"literature.

[Key"words]"Traditional"Chinese"medicine;"Diminished"ovarian"reserve;"Animal"experiment;"Meta"analysis

卵巢儲備功能減退（diminished"ovarian"reserve，DOR）是指因卵母細胞數(shù)量及質(zhì)量的降低所導致的卵巢功能不足，主要表現(xiàn)為生育力下降、月經(jīng)紊亂及更年期癥狀等，同時伴有卵泡刺激素（follicle-stimulating"hormone，F(xiàn)SH）水平升高、雌二醇（estradiol，E2）和抗米勒管激素（anti-Müllerian"hormone，AMH）水平降低及竇卵泡計數(shù)（antral"follicle"count，AFC）減少[1-2]?！堵殉矁涔δ軠p退臨床診治專家共識》[1]指出，DOR的人群患病率為10%～35%，并呈現(xiàn)出逐年遞增的趨勢。卵巢功能減退嚴重影響女性的身心健康及家庭、社會的和諧發(fā)展，因此女性卵巢功能保護愈發(fā)受到重視[3]。中醫(yī)治療DOR基于整體觀念及辨證論治，多靶點、多途徑綜合調(diào)節(jié)，對改善患者的癥狀、調(diào)節(jié)激素水平、預防遠期并發(fā)癥等均有良好的療效。本研究采用Meta分析的方法，系統(tǒng)評價中藥干預DOR動物模型的療效，以期為后續(xù)研究及臨床應用提供參考。

1""資料與方法

1.1""納入及排除標準

納入標準：①研究類型：隨機對照動物實驗；②研究對象：DOR大鼠或小鼠模型；③中藥組干預措施為單純中藥（湯劑或顆粒劑），西藥組干預措施為單純激素；④結(jié)局指標為FSH、E2、AMH及AFC。

排除標準：①非動物試驗；②非隨機對照實驗；""""③重復發(fā)表的文獻；④同一試驗的不同階段僅納入最新的1篇文獻；⑤中藥組采用或合并其他中醫(yī)療法；西藥組采用非激素治療；⑥數(shù)據(jù)不完整。

1.2""文獻檢索策略

計算機檢索中國知網(wǎng)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)、中國生物醫(yī)學文獻服務系統(tǒng)（SinoMed）、重慶維普（VIP）、PubMed、Cochrane"Library、Embase數(shù)據(jù)庫，檢索時間為各數(shù)據(jù)庫建庫至2022年9月20日。中文檢索詞：卵巢儲備功能下降、卵巢儲備功能減退、卵巢儲備功能低下、卵巢功能不足、卵巢低儲備、卵巢儲備功能不良、中醫(yī)、中藥、中醫(yī)藥、動物實驗、動物、實驗、鼠、大鼠、小鼠。英文檢索詞：ovarian"reserve、decreased"ovarian"reserve、decreased"ovarian"reserve"function、decreased"ovarian"function、diminished"ovarian"reserve、decline"in"ovarian"reserve、DOR、ovarian"reserve"dysfunction、ovarian"reserve"function"decreased、ovarian"reserve"function"is"low、low"ovarian"reserve、insufficient"ovarian"reserve"function、medicine、Chinese"traditional、traditional"Chinese"medicine、Chinese"medicine、Chinese"patent"drug、Chinese"herbal、animal"experimentation、mouse、rat、animal"model。1.3""文獻篩選與資料提取

兩位研究者獨立篩選文獻、提取資料并進行文獻質(zhì)量評價。篩選文獻時，先排除重復文獻，再閱讀題目和摘要進行初篩，最后閱讀全文復篩，最終確定被納入文獻；資料提取的主要內(nèi)容包括第一作者、發(fā)表時間、動物類型、鼠齡、干預措施、樣本量及結(jié)局指標，并交叉核對。

1.4""文獻質(zhì)量評價

采用SYRCLE動物實驗偏倚風險評估工具[4]對納入文獻的方法學質(zhì)量進行評價，偏倚類型包括選擇偏倚、實施偏倚、隨訪偏倚、測量偏倚、報告偏倚和其他偏倚。2名研究者獨立對每項納入研究進行偏倚風險評估，意見分歧時尋求第3位研究者商定。

1.5""統(tǒng)計學方法

采用RevMan"5.4軟件進行Meta分析。首先對納入研究進行異質(zhì)性檢驗，I2≥50%時，采用隨機效應模型；I2lt;50%時，采用固定效應模型。通過分析干預措施探討異質(zhì)性來源，并通過逐一剔除每項研究進行敏感性分析。通過漏斗圖判斷Meta分析結(jié)果是否存在發(fā)表偏倚。連續(xù)變量采用標準化均數(shù)差（standard"mean"difference，SMD）及95%置信區(qū)間（confidence"interval，CI）表示。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學意義。Meta分析結(jié)果以森林圖形式展示。

2""結(jié)果

2.1""文獻檢索結(jié)果及其基本特征

初檢共獲得714篇文獻，經(jīng)過層層篩選，最終納入19篇文獻。文獻篩選流程及結(jié)果見圖1。納入文獻的基本特征見表1。

2.2""納入研究的質(zhì)量評價

19篇文獻中有8篇[6，10，12，16-17，19-21]采用隨機數(shù)表法分組，其余11篇[5，7-9，11，13-15，18，22-23]未提及具體分組方法，風險偏倚見圖2。

2.3""Meta分析結(jié)果

為系統(tǒng)比較不同劑量的中藥對DOR動物模型結(jié)局指標的影響，對所有納入研究設定亞組分析，分為中藥高、中、低劑量組，設置為2倍、1倍及1/2倍臨床等效劑量。

2.3.1""FSH""18項研究[5-19，21-23]報道FSH水平，異質(zhì)性檢驗I2=41%。敏感度分析發(fā)現(xiàn)，當剔除馮桂玲等[6]研究時，異質(zhì)性降低（I2=5%），進一步分析發(fā)現(xiàn)該研究建立免疫性DOR小鼠模型，提示動物種類及造模方式不同可能是其異質(zhì)性來源。故剔除馮桂玲等的研究，選擇固定效應模型，Meta分析結(jié)果顯示，單純中藥與西藥激素在改善FSH方面療效相當（SMD=0.03，95%CI：–0.12～0.19，P=0.67）。亞組分析提示在改善FSH方面，高、中、低劑量中藥與西藥激素療效相當，見圖3。

2.3.2""E2""15項研究[5-14，17-19，21，23]報道E2水平，I2=63%，采用隨機效應模型，Meta分析結(jié)果顯示，中藥組E2水平顯著低于西藥組，單純中藥在改善E2方面較西藥激素療效差（SMD=–0.47，95%CI：–0.76～–0.18，P=0.002）。亞組分析提示在改善E2方面，高劑量中藥與西藥激素療效相當，中、低劑量中藥較西藥激素療效差，見圖4。

2.3.3""AFC""2項研究[7，20]報道AFC，I2=79%，P=0.03，采用隨機效應模型，Meta分析結(jié)果顯示，單純中藥與西藥激素在改善AFC方面療效相當（SMD=0.84，95%CI：–0.53～2.22，P=0.23），見圖5。

2.3.4""AMH""15項研究[5，9-19，21-23]報道AMH水平，異質(zhì)性檢驗I2=58%。敏感度分析發(fā)現(xiàn)，當剔除張雙等[10]研究時，異質(zhì)性降低（I2=48%），進一步分析發(fā)現(xiàn)該研究對照組小鼠采用灌胃芬嗎通，其余研究對照組動物均采用灌胃雌激素，提示對照組干預方式不同可能是其異質(zhì)性來源。故剔除張雙等的研究，選擇固定效應模型，Meta分析結(jié)果顯示，單純中藥與西藥激素在改善AMH方面療效相當（SMD=0.13，95%CI：–0.04～0.30，P=0.13）。亞組分析提示在改善AMH方面，高劑量中藥療效優(yōu)于西藥激素，中、低劑量中藥與西藥激素療效相當，見圖6。

3""討論

本研究結(jié)果顯示，中藥與西藥激素在改善FSH、AMH及AFC方面無顯著差異，但中藥在改善E2方面較西藥療效差。亞組分析發(fā)現(xiàn)在改善E2方面，中、低劑量中藥較西藥激素療效差，而高劑量中藥與西藥激素療效相當；在改善AMH方面，中、低劑量中藥與西藥激素療效相當，而高劑量中藥較西藥激素療效優(yōu)。研究表明中藥不僅可調(diào)節(jié)DOR動物模型的下丘腦-垂體-卵巢軸，還可通過多靶點、多途徑抑制顆粒細胞凋亡、提高卵巢抗氧化能力、調(diào)節(jié)免疫及促進卵巢血管生成，從而提高DOR動物模型E2、AMH水平，增加AFC，降低FSH水平，達到保護卵巢功能的作用。隨著中藥劑量的增加，其治療效果可能有所提高。中醫(yī)在臨床上治療DOR基于整體觀念及辨證論治，亦是從多靶點、多方面綜合調(diào)節(jié)，對改善患者的癥狀、調(diào)節(jié)激素水平、防治遠期并發(fā)癥等均有良好的療效。因此，中藥可為臨床DOR的治療提供一個新思路。

本研究亦存在一些不足：①未納入英文文獻，納入的研究均為公開發(fā)表的國內(nèi)中文文獻，未人工檢索雜志、會議論文和灰色文獻；②納入文獻質(zhì)量欠佳，11項研究未交待具體隨機方法；所有研究均未提及分配隱藏和盲法實施，可能存在選擇和實施偏倚；③研究中部分結(jié)果異質(zhì)性較大，對研究結(jié)果的可信度有一定影響。

綜上所述，中藥可有效改善DOR動物模型的激素水平及AFC，且存在一定的量效關(guān)系。中藥在DOR的治療中發(fā)揮重要作用。本研究僅針對動物實驗進行分析，今后可開展更多的臨床試驗對其安全性和有效性進行評估。因納入研究數(shù)不多且總體質(zhì)量不高，各研究間具有一定的異質(zhì)性，可能導致結(jié)論準確性不高，故以上結(jié)論仍需更多高質(zhì)量文獻進行驗證。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

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（收稿日期：2023–05–26）

（修回日期：2024–01–30）