張群 朱海寧 劉超 許進 王勤

摘 要：目的：通過對淄博市外環境禽流感樣本的檢測結果進行分析，探討淄博市禽流感病毒的分布特點、傳播途徑及其影響因素，為禽流感防控工作提供科學依據。方法：采集2021—2023淄博市轄區內4個區縣的家禽規模養殖場和城鄉活雞活魚市場的6類外環境禽流感樣本，采用實時熒光定量分析法對樣本進行病毒核酸檢測，分析禽流感病毒在不同場所、標本中的分布情況，比較不同監測年度禽流感病毒陽性檢出率的差異。結果：2021—2023年淄博市共采集外環境禽流感樣本401份，A型陽性64份，陽性率為15.96%。其中，H9型57份（14.21%），占比最高，H5型1份（0.25%），H7型2份（0.50%），H5、H9型混合陽性4份（1.00%）。不同年度陽性檢出率差異無統計學意義，不同監測場所和不同樣本類型陽性檢出率差異有統計學意義。結論：淄博市外環境中存在的禽流感病毒以H9亞型為主，其中城鄉活禽市場是人感染禽流感的高危場所。

關鍵詞：禽流感；外環境；監測

Abstract： Objective： By analyzing the detection results of avian influenza samples in the external environment of Zibo city， this study explores the distribution characteristics， transmission routes， and influencing factors of avian influenza virus in Zibo city， providing scientific basis for avian influenza prevention and control work. Method： Six types of avian influenza samples from external environments were collected from poultry farms and urban and rural live chicken and fish markets in four districts and counties within the jurisdiction of Zibo city from 2021 to 2023. Real time fluorescence quantitative analysis was used to detect the virus nucleic acid in the samples， analyze the distribution of avian influenza virus in different places and samples， and compare the differences in positive detection rates of avian influenza virus in different monitoring years. Result： From 2021 to 2023， a total of 401 avian influenza samples were collected from the external environment in Zibo city， of which 64 were positive for type A， with a positivity rate of 15.96%. Among them， 57 cases of H9 type （14.21%） accounted for the highest proportion， with 1 case of H5 type （0.25%）， 2 cases of H7 type （0.50%）， and 4 cases of mixed positive H5 and H9 types （1.00%）. There is no statistically significant difference in positive detection rates among different years， but there is a statistically significant difference in positive detection rates among different monitoring locations and sample types. Conclusion： The H9 subtype of avian influenza virus is mainly present in the external environment of Zibo city， and urban and rural live poultry markets are high-risk places for human infection with avian influenza.

Keywords： avian influenza; external environment; monitor

禽流感是禽類流行性感冒的簡稱，是由甲型流感病毒的一種亞型引起的傳染性疾病，可分為無致病性、低致病性和高致病性3種類型禽流感[1]。禽流感病毒部分亞類可導致人感染禽流感，可感染人類的型別主要有H5、H7和H9亞型[2]。人禽流感是由禽流感病毒中的某些亞型病毒所引起的急性呼吸道傳染病[3]，所表現出來的臨床癥狀隨所感染病毒亞型的不同而不同。傳播途徑主要通過接觸帶有病毒的禽類及其分泌物、排泄物和生活水等而被病毒所感染[4]。近年來，禽流感疫情在全球范圍內不斷暴發，給人們的健康和畜牧業帶來了嚴重威脅。為了有效防控禽流感疫情，疾控部門加強了對外環境禽流感樣本的檢測和分析。本文對淄博市外環境禽流感樣本的檢測結果進行了深入分析。

1 材料與方法

1.1 資料來源

將2021—2023年淄博市所轄張店區、臨淄區、高青縣和沂源縣4個區縣作為監測點，共采集標本401份。其中，糞便標本95份，籠具表面擦拭樣本125份，禽類飲水40份，清洗禽類的污水53份，宰殺或擺放禽類案板的擦拭樣本65份，其他（脫毛機、傳送帶等）樣本23份。采樣前提前了解監測點的情況，避免在監測點消毒后2 d內采樣。

1.2 試劑與儀器

甲型/乙型流感病毒雙重實時熒光定量PCR試劑盒；H5/H7/H9亞型禽流感病毒核酸三重實時熒光定量PCR試劑盒，北京卓誠惠生生物科技股份有限公司。具體操作及結果判定均按照試劑盒說明書要求，所有試劑均在有效期內使用。

全自動核酸提取儀（GeneRotex 96，中國西安天隆科技公司）；實時熒光定量PCR儀（Quantstudio 5 Flex，applied biosystems）。

1.3 試驗方法

所有樣本先用甲型通用流感病毒核酸檢測，陽性樣本再進行H5、H7、H9型的檢測。

2 結果與分析

2.1 概況

2021—2023年淄博市共采集外環境禽流感樣本401份。其中，A型陽性64份，陽性率為15.96%，進行分型后僅檢測出H5型1份，陽性率為0.25%，H7型2份，陽性率為0.50%，僅檢測出H9型57份，陽性率為14.21%，H5、H9型混合陽性4份，陽性率為1.00%。

2.2 2021—2023年淄博市外環境禽流感病毒檢測結果

由表1可知，3個年份均有A型陽性檢出，其中2021年度檢出率最高，陽性率為17.82%，分型檢測3個年份均以H9亞型為主，各年度的檢出率差異無統計學意義（χ2=1.591，P＞0.05）。

2.3 淄博市外環境禽流感病毒在不同監測場所的分布

由表2可知，401份樣本中，城鄉活禽市場有309份，A型陽性數有63份，陽性率最高，為20.39%，家禽規模養殖場有92份，A型陽性數有1份，陽性率為1.09%。活禽市場和家禽養殖場的檢出率差異有統計學意義，前者顯著大于后者（χ2=19.691，P＜0.05）。

2.4 淄博市外環境禽流感病毒在不同樣本類型中的分布

由表3可知，清洗禽類的污水的陽性率最高，為30.19%，糞便標本的陽性率最低，為6.32%，宰殺或擺放禽類案板表面的擦拭樣本26.15%，其他樣本（脫毛機、傳輸帶、刀具等）21.74%，籠具表面擦拭樣本12.80%，禽類飲水10.00%。不同樣本類型禽流感病毒陽性檢出率差異有統計學意義（χ2=22.186，P＜0.05）。

3 結論與討論

本研究結果顯示3個監測年度檢出H5、H7、H9和H5、H9混合陽型，且主要以H9亞型為主，與國內其他省市研究結果一致[5-8]。H5、H7以及H5、H9混合陽性占比較低，這與馬鞍山市、衢州檢測結果一致[9-10]。不同監測場所陽性率分布顯示，城鄉活禽市場陽性率明顯高于家禽規模養殖場，這可能是活禽市場中有不同的禽類混雜，一旦禽流感病毒隨著活禽進入市場，可在禽間傳播，并迅速污染市場環境。由于我國傳統的消費、飲食習慣，農貿市場和人們的日常生活息息相關，市場一旦被禽流感病毒污染，則會使人感染禽流感疾病的風險大大增加[11]。不同樣本類型陽性率分布顯示，清洗禽類的污水的陽性率最高（30.19%），其次為宰殺或擺放禽類案板的擦拭樣本，與其他研究結果一致[12-14]，提示污水中可能存在大量的禽流感病毒，如果接觸應做好個人防護。

禽流感病毒普遍對熱敏感，65 ℃加熱30 min或100 ℃加熱2 min以上可滅活。對低溫抵抗力較強，在4 ℃水中或有甘油存在的情況下可保持活力1年以上[2]。常用的烹調方法（蒸、煮、炒等）溫度一般都會在65 ℃以上，所以只要烹調時間足夠長，都可以保證食品安全。因此，人們應盡量減少與禽類不必要的接觸，尤其是避免接觸病死禽；遠離家禽的分泌物；接觸過禽鳥或禽鳥糞便后，要用消毒液和清水徹底清潔雙手；盡量在正規的銷售禽類的場所購買經過檢疫的禽類產品；保持良好的個人衛生習慣，注意飲食衛生，不喝生水，不吃未熟的肉類及蛋類等食品。

城鄉活禽市場是人感染禽流感的高危場所，建議加強管理，落實禽流感防控措施，定期對市場清潔消殺。對于涉禽人員，不要輕視重感冒，禽流感的病癥與其他流行性感冒病癥相似，如發燒、頭痛、咳嗽及喉嚨痛等，在某些情況下，會引起并發癥，導致患者死亡。因此，若出現發熱、頭痛、鼻塞、咳嗽、全身不適等呼吸道癥狀時，應戴上口罩，盡快到醫院就診，并務必告訴醫生自己發病前是否到過禽流感疫區，是否與病禽類接觸等情況，并在醫生指導下治療和用藥，發現不明原因病死禽時要及時向農業部門報告。各部門繼續加強監測工作，防范人感染禽流感的風險。

參考文獻

[1]SPACKMAN E.A brief introduction to avian influenza virus[J].Methods Mol Biol，2020，2123：83-92.

[2]中華人民共和國國家衛生和計劃生育委員會.人感染H7N9禽流感診療方案（2017年第一版）[EB/OL].（2017-01-24）[2024-01-13].https：//guide.medlive.cn/guideline/12640.

[3]李蘭娟，任紅.傳染病學[M].8版.北京：人民衛生出版社，2013.

[4]王艷芬，黃鑫，舒相華，等.2014—2019年云南省紅河州蒙自市禽流感、新城疫血清學調查研究[J].中國動物傳染病學報，2021，29（5）：109-114.

[5]陳楚瑩，王曼，馮志鋒.2014—2019年中山市H9亞型禽流感監測及病理特征分析[J].中國人畜共患病學報，2021，37（2）：122-127.

[6]余慧燕，許可，黃昊頔，等.2014—2018年江蘇省禽類外環境禽流感病毒監測結果分析[J].中國人畜共患病學報，2021，37（3）：225-229.

[7]趙紅，于秋燕，趙寶添，等.2016—2018年濟南市涉禽環境禽流感病毒監測與分析[J].現代預防醫學，2020，47（12）：2147-2150.

[8]陳瑤瑤，趙曉南，李多，等.2017年云南省外環境禽流感監測結果分析[J].中國衛生檢驗雜志，2019，29（10）：1267-1269.

[9]趙志榮，江良梁，江小魚.2009—2021年安徽省馬鞍山市禽流感監測與分析[J].疾病監測，2023，38（2）：148-151.

[10]黃世騰，楊瑞軍，呂磊，等.2013—2018年浙江省衢州地區外環境禽流感病毒監測分析[J].疾病監測，2019，34（9）：835-838.

[11]張毅，王幼明，王芳，等.我國禽流感研究進展及成就[J].微生物學通報，2014，41（3）：497-503.

[12]趙善露，黃超洋，劉子言，等.2013—2022年湖南省人感染H9N2禽流感病例及外環境H9亞型禽流感病毒監測分析[J/OL].疾病監測，1-7[2024-01-13].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/11.2928.R.20230815.1650.004.html.

[13]李琴，閆姝利，廖洪秀，等.2019—2022年攀枝花市外環境禽流感病毒監測分析[J].預防醫學情報雜志，2023，39（9）：1025-1028.

[14]樓秀玉，王欣瑩，顏浩，等.2016—2020年浙江省禽類相關外環境禽流感病毒污染狀況及職業暴露人群學情監測[J].疾病監測，2022，37（9）：1170-1174.