RS402007 基因多態性與腦梗死患者頸動脈粥樣硬化斑塊易損性及降脂療效的關系

馬媛媛，張彩霞，張麗麗，楊麗華，侯志剛，丁建

滄州市人民醫院神經內科一區，河北滄州 061000

頸動脈粥樣硬化斑塊的形成與脂質代謝失調、血管炎癥反應密切相關。頸動脈粥樣硬化斑塊不穩定可導致動脈栓塞，從而引起腦組織缺血，增加了腦梗死的風險［1-2］。因此，探討頸動脈粥樣硬化斑塊的形成和穩定性影響因素對預測早期腦梗死的發生以及病情嚴重程度評估有重要意義。研究顯示，解聚蛋白樣金屬蛋白酶（ADAMTS-1）在細胞黏附、細胞遷移、基質降解和血栓形成等多種生物學過程中發揮關鍵作用。與其他蛋白酶一樣，ADAMTS-1基因也具有多態性，可導致蛋白質結構或功能變化，從而對個體生理狀況產生影響。研究表明，ADAMTS-1參與基質的降解和細胞遷移，與動脈硬化和斑塊形成有關［3-4］。RS402007（G/C）是ADAMTS-1的一個多態性位點，該位點的多態性可改變ADAMTS-1的功能，從而影響動脈粥樣硬化斑塊的形成及穩定性，導致相關心血管事件的發生。近年來，我們對RS402007基因多態性與腦梗死患者頸動脈粥樣硬化斑塊易損性及降脂療效的影響進行了探討。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019 年7 月—2023 年7 月滄州市人民醫院收治腦梗死患者114 例，根據頸動脈粥樣硬化性情況分為穩定斑塊組56 例和易損斑塊組58 例。納入標準：①符合《中國腦梗死中西醫結合診治指南》［5］中的腦梗死診斷；②實驗室或影像學檢查提示存在頸動脈粥樣硬化；③臨床資料完整。排除標準：①合并其他嚴重神經系統疾病；②合并心腎疾病或血液系統疾病；③有頸動脈手術史；④無法進行影像學檢查。患者均知情并簽署同意書，本研究通過醫院倫理委員會批準。

1.2 降脂治療及療效判定 患者入院后完善各項檢查并給予降脂治療，阿托伐他汀口服每次20 mg，每日1 次，治療4 周評定療效。有效：治療后患者頭暈、記憶力下降、思維模糊等癥狀和體征有所改善，血液LDL-C、HDL-C、TG 和TC 水平恢復正常；無效：治療后患者癥狀、體征無明顯變化，LDL-C、HDL-C、TG 和TC 水平較治療前無明顯變化。有效率=有效例數/總例數×100%。

1.3 血脂水平檢測 治療前、治療4周清晨取患者靜脈血5 mL，靜置后3 000 r/min離心10 min（半徑15 cm）。采用Elisa試劑盒檢測LDL-C、HDL-C、TG和TC。

1.4 基因多態性檢測 抽取患者空腹靜脈血2 mL，測定DNA 濃度后選擇目標DNA 樣本。隨后在PCR 儀中設置以下反應條件：預變性95 ℃ 2 min、95 ℃ 45 s、56 ℃ 45 s、72 ℃ 1 min，循環35次，72 ℃延伸10 min，對目標DNA進行擴增。引物序列：正向引物：5'-GGCGTCTTTGGGATGGAA-3'，反向引物：5'-CAGGAGACACCGCTCGTAG-3'。通過凝膠電泳分析PCR 產物特性，確認擴增是否成功。回收目的DNA 片段，并進行DNA 測序，以獲取基因信息。

1.5 統計學方法 采用SPSS20.0 統計軟件。計量資料以±s表示，多組間比較采用方差分析；兩組間或治療前后比較采用t檢驗；計數資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組治療前臨床及血液生化指標比較 兩組治療前性別、年齡、合并癥、血液及血清HDL-C、TG水平差異均無統計學意義（P均>0.05），血清LDL-C、TC水平差異有統計學意義（P均＜0.05）。見表1。

表1 兩組治療前臨床及血液生化指標比較

2.2 兩組基因型及等位基因頻率 兩組RS402007（G/C）位點基因型符合Hardy-Weinberg 平衡（P>0.05），表明研究對象具有群體代表性。RS402007（G/C）基因位點測序結果見圖1，兩組基因型比較差異有統計學意義（P均＜0.05）。見圖1、表2。

圖1 RS402007（G/C）基因位點測序結果

表2 兩組基因型及等位基因頻率比較

2.3 不同基因型患者降脂治療前后血脂水平變化 與治療前比較，GG、GC、CC 基因型患者治療后血清LDL-C、TG、TC 水平降低，HDL-C 水平升高（P均＜0.05）；治療后比較，CC 基因型患者血脂水平與GG 基因型、CC 基因型患者差異有統計學意義（P均＜0.05）。見表3。

表3 不同基因型患者降脂治療前后血脂水平比較（mmol/L，± s）

表3 不同基因型患者降脂治療前后血脂水平比較（mmol/L，± s）

注：與本組治療前比較，*P＜0.05。

基因型GG GC CC n 31 41 42 F P LDL-C治療前2.72 ± 0.77 2.57 ± 0.75 2.71 ± 0.73 0.109>0.05 HDL-C治療前1.33 ± 0.30 1.30 ± 0.28 1.32 ± 0.32 0.271>0.05 TG治療前1.71 ± 0.83 1.65 ± 1.03 1.69 ± 0.95 0.191>0.05 TC治療前4.91 ± 0.87 4.75 ± 1.01 4.89 ± 0.96 0.185>0.05治療后3.76 ± 0.62*3.57 ± 0.84*3.25 ± 0.68*1.429＜0.05治療后2.02 ± 0.86*1.84 ± 0.81*1.77 ± 0.63*0.334＜0.05治療后1.71 ± 0.45*1.74 ± 0.44*1.88 ± 0.47*0.808＜0.05治療后0.98 ± 0.59*0.91 ± 0.62*0.85 ± 0.60*1.379＜0.05

2.4 不同基因型患者降脂療效比較 GG、GC、CC基因型患者降脂治療有效率分別分別為80.65%（25/31）、84.62%（33/41）、88.64%（39/42）。CC 基因型患者有效率高于GG 基因型、CC 基因型患者（P均＜0.05），GG基因型、GC基因型患者有效率差異無統計學意義（P>0.05）。

3 討論

ADAMTS-1 是一種屬于ADAMTS 家族的蛋白酶，參與基質降解、細胞遷移等生物學過程，近年來該蛋白酶與腦梗死、頸動脈粥樣硬化的相關性已引起學者們的廣泛關注［6］。頸動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病，其發生過程中動脈內膜受損、脂質聚積形成斑塊［7-8］。ADAMTS-1活性與動脈內膜基質降解有關，可通過其活性變化發揮動脈壁組織修復和重塑作用，影響斑塊穩定性，增加血栓形成風險［9］。頸動脈粥樣硬化斑塊導致的血栓形成，可阻塞腦動脈，從而引發腦梗死，因此，動脈粥樣硬化是腦梗死的一種潛在危險因素［10］。

RS402007 是ADAMTS-1 基因的一個重要位點，其多態性可能導致蛋白質結構或功能的變化，從而對心血管疾病的發生發展產生影響。研究表明，RS402007 基因變異可能與頸動脈斑塊形成和動脈硬化進程相關；RS402007基因型影響頸動脈粥樣硬化斑塊的穩定性，增加了血栓形成風險，從而促進了頸動脈粥樣硬化的發展［11-12］。本研究顯示，頸動脈粥樣硬化穩定斑塊患者與易損斑塊患者RS402007基因型頻率比較差異有統計學意義，提示RS402007基因多態性對頸動脈粥樣硬化斑塊的穩定性有一定影響。另有研究提示，RS402007基因多態性與腦梗死患者降脂治療效果有關；不同RS402007基因型腦梗死患者ADAMTS-1 功能差異對動脈斑塊形成、斑塊易損性及血栓形成的作用不同，從而對降脂治療效果產生影響。

阿托伐他汀通過降低血清LDL-C|、TG水平，抑制動脈粥樣硬化斑塊形成，從而降低心腦血管事件的發生風險，目前被廣泛用于預防和治療動脈粥樣硬化、心肌梗死、腦梗死等心腦血管疾病［13-14］。本研究中，阿托伐他汀治療4周后各基因型患者治療前后血脂水平差異有統計學意義，CC基因型患者血脂水平改善優于GG基因型、CC基因型患者，同時CC基因型患者降脂有效率高于GG基因型、CC基因型患者。劉艷輝等［15］研究表明，APOE 基因多態性能影響阿托伐他汀療效；鄒佳等［16］研究發現，PCSK9基因RS562556位點顯性模型能提高漢族人急性缺血性腦卒中的發病風險；CAI等［17］使用他汀類藥物治療高脂血癥患者研究發現，ApoE4 基因攜帶者的ApoE 蛋白表達與E2 或E3 基因攜帶者的表達存在統計學差異，并且ApoE4攜帶者的他汀類藥物療效較非ApoE4基因攜帶者更好。本研究結果與上述研究一致，證實RS402007（G/C）位點多態性影響阿托伐他汀的降脂療效。

綜上所述，RS402007 基因多態性與頸動脈粥樣硬化性斑塊易損性相關，且對藥物的降脂療效有一定影響。但本研究樣本量小、觀察時間較短，研究結果的客觀性有待多中心、大樣本及更長時間的觀察研究加以證實。