大腸埃希氏菌的臨床分布和耐藥性分析

文/田永俠，陳名霞

大腸埃希菌是院內感染致病菌之一，在革蘭陰性菌中，大腸埃希菌所致院內感染的占比最高，引起全身各個系統感染[1]。細菌耐藥性已成為臨床廣泛關注的問題，對于大腸埃希菌更是如此，由于高等級以及廣譜抗菌藥的濫用，導致大腸埃希菌感染和耐藥菌現象日益增多，可導致臨床抗感染效果不佳，甚至造成病患。目前我國微生物學檢測技術不斷發展，及時準確的檢驗結果，可以為大腸埃希菌的診斷、治療和預防提供科學依據[2]。由于不同地區大腸埃希菌的分布及耐藥特征存在差異，并且大腸埃希菌的耐藥細菌譜有所改變，尚未形成統一結論[3]。為進一步驗證，本次研究中分析大腸埃希菌的分布特點與耐藥性變化如下。

1 資料與方法

1.1 檢測樣本來源

選取2022 年 1 月1 日至2022 年12 月31 日東南大學附屬中大醫院接受送檢的各類標本2673 份，所有檢測標本為不同患者非同一部位分離。本次研究經醫學倫理部門的審查通過。

1.2 標本處理

按第四版《全國臨床檢驗操作規程》中檢驗操作規程，對標本進行分離、培養及菌種鑒定、藥敏試驗。

（1）標本采集。標本采集取材后使用培養瓶或無菌試管盛放。血液采用無菌穿刺抽取，成人8～10ml/瓶，兒童3～5ml/瓶；腦脊液采用無菌穿刺抽取，2～3 ml/瓶；痰及其他呼吸道分泌物，采用誘導咳痰，取適量；咽、鼻拭子可使用拭子采集；尿液標本采集無菌清潔中段尿10 ml；膿液、燒傷創傷感染分泌物首先用75%酒精擦拭表面，取分泌物或膿物；穿刺液胸腔積液、腹水膽汁、心包積液、關節液、鞘膜液；常規消毒，使用注射器抽取或引流；糞便標本采用自然排便；生殖道分泌物采用無菌拭子；組織標本無菌操作留取標本于無菌杯中送檢。

（2） 質控菌株肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1705(KPC 型碳青霉烯酶陽性株)、肺炎克雷伯菌ATCCBAA-2146(NDM 型金屬B 內酰胺酶陽性株)、肺炎克雷伯菌ATCC BAA- 2524(OXA-48 型碳青烯酶陽性株);肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1706（非產碳青烯酶株）購自浙江康泰生物技術有限公司，銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCC25923 和大腸埃希菌ATCC25922 均購自江蘇省臨檢臨床檢驗中心，所有質控菌株由本實驗室保存。

（3）儀器與試劑。VITEK Compact 60 全自動微生物分析儀及配套的鑒定卡和藥敏卡（法國梅里埃公司）,藥敏紙片（英國Oxoid 公司），替加環素標準肉湯微量稀釋板條（溫州市康泰生物科技有限公司），碳青霉烯酶檢測卡試劑盒（北京金山川科技發展有限公司），安圖MS1000 全自動微生物質譜系統。

（4）標本分離、培養及鑒定。將標本接種于培養基中，置于恒溫箱中孵育，進行增菌培養。觀察菌落形態，使用接種環挑取新鮮培養的單個菌落，制備細菌懸液，采用全自動微生物分析儀及鑒定卡進行鑒定。

（5）藥敏試驗。以《美國臨床實驗室標準化委員NCCLS》第31 版公布標準，作為藥物敏感性試驗的判定標準。采用全自動微生物分析儀及配套的藥敏卡片，檢驗人員培養細菌進行藥敏試驗，以各藥物最小抑菌濃度（MIC）值判讀。

2 結果

2.1 不同標本大腸埃希菌

表1 可見。本次檢出大腸埃希菌568 株，為21.25%。最高的標本是羊水56.25%，其次膿液（52.60%）、組織（47.80%）、宮頸口分泌物（45.98%）、陰道分泌物（37.98%）、分泌物（29.59%）。

表1 不同標本大腸埃希菌檢出

2.2 不同病區大腸埃希菌

表2 可見。肛腸科大腸埃希菌檢出率最高，為46.79%，其次普外科（45.37%）、內分泌科（42.31%）、婦科（42.14%）、產科（41.75%），其中568 株大腸埃希菌樣本中，檢出9 例CRE，分布在腎內科3 例、婦科2 例、普外科2 例、康復醫學科1 例、重癥醫學科1 例。

表2 不同病區大腸埃希菌檢出

2.3 大腸埃希菌的耐藥情況

表3 可見，發現568 株大腸埃希菌臨床分離株對氨芐西林的耐藥率最高（71.37%），對哌拉西林耐藥率45.45%，對復方新諾明耐藥率為41.62%，對頭孢唑林、頭孢呋辛、環丙沙星、頭孢噻肟、左氧氟沙星、頭孢吡肟的耐藥率分別39.15%、33.51%、33.33%、33.1%、32.39%、31.16%，對氨曲南、頭孢他啶、慶大霉素耐藥率分別29.81%、28.57%、25.85%，而對頭孢西丁、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、亞胺培南耐藥性均不高，耐藥率分別為7.73%、3.52%、1.23%、1.23%。大腸埃希菌的敏感性分析：替加環素、呋喃妥因的敏感性最高，為100.00%，由于米諾環素的實驗數較少，故排除，其次亞胺培南（98.77%）、美羅培南（98.77%）、哌拉西林他唑巴坦（96.30%）、阿米卡星（97.52）、頭孢霉素類-頭孢西丁（92.09%）。

表3 568 株大腸埃希菌的耐藥情況

3 討論

大腸埃希菌是腸道菌群的組成部分，可維持腸道菌群的生理穩定，在機體免疫力低下、腸道缺乏刺激等因素下，大腸埃希菌會離開腸道的寄生部位，轉移至腸道外部位，如膽囊、尿道、膀胱、闌尾等，引發其他臟器感染。臨床上大腸埃希菌感染多見于老人、嬰幼兒等易感人群，由于本致病菌具有很強的傳染性和流行性，可導致院內感染流行。因此大腸埃希菌目前被列為重要的衛生指標菌之一[4]。《中國細菌耐藥監測報告》中指出分離菌株中，大腸埃希菌的檢出率最高，約為19%。而本次研究中送檢2673份標本，大腸埃希菌檢出568 份，占21.25%，高于平均水平，表明本地區的大腸埃希菌檢出形勢嚴峻，需要引起足夠的重視[5]。

本次研究中568 例大腸埃希菌樣本中羊水最多，約為56.25%，其次為膿液（52.60%）、組織（47.80%）、宮頸口分泌物（45.98%）、陰道分泌物（37.98%）。其中多數大腸埃希菌主要以免疫力低下、婦產女性及新生兒多見[6]。另外大腸埃希菌是腸道中存在的正常菌群，大多數大腸埃希菌首先定居于直腸，當腸道出現問題時，才會引發腸道外感染。而肛腸科內以腸道疾病最多見，這也為大腸埃希菌的傳播提供了更多途徑[7]。本次大腸埃希菌標本，在肛腸科中大腸埃希菌檢出率最高，因此肛腸科中大腸埃希菌的檢出率為46.79%。其次為普外科（45.37%）、內分泌科（42.31%）、婦科（42.14%）、產科（41.75%）。分析如下：普外科中以手術為主，較大的切口、大出血及長時間手術、術后恢復都會增加大腸埃希菌轉移或感染的概率。內分泌科中糖尿病老年患者最常見，婦科、產科中以免疫力低下的女性多見，當機體免疫力不足時，無法有效地抵抗致病菌感染，因此有更大的概率出現大腸埃希菌感染[8]。可以看出，免疫力低下和手術患者是大腸埃希菌感染檢出的主要群體。另外本次568 例大腸埃希菌樣本中檢出9 例CRE，檢出率相對低，這也導致碳青霉烯類中比羅培南和美羅培南的敏感率高，為98.77%。

臨床上抗菌藥物是治療大腸埃希菌的主要手段，通過敏感性高的抗生素來殺滅或抑制致病菌，然而細菌耐藥性已成為影響效果的不良因素。臨床實際應用時，需要避免一些耐藥性高的抗菌藥物，盡可能選用高敏感性抗菌藥物。因此治療大腸埃希氏菌感染，尤其要重視藥敏實驗及抗菌藥物管理，減少耐藥情況的出現。本次大腸埃希菌樣本中替加環素、呋喃妥因的敏感性最高，為100.00%，而氨芐西林的耐藥性最高，為71.38%、其次為哌拉西林（45.45%）。需要加強大腸埃希菌的微生物檢測力度，對耐藥性高的大腸埃希氏菌可以選用替加環素為基礎的聯合用藥、呋喃妥因等敏感性高的抗菌藥物。

綜上，大腸埃希菌的檢出率較高，主要見于羊水、膿液、組織、宮頸口分泌物、陰道分泌物，主要分布于肛腸科、普外科、內分泌科、婦科、產科等科室。應加強大腸埃希菌的耐藥性檢測力度，選用替加環素、呋喃妥因等敏感性高的抗生素。面對日益嚴重的細菌多重耐藥性問題，臨床治療多重耐藥細菌感染時，應當依據藥敏試驗結果，選擇合適的抗菌藥物，避免抗感染治療的失敗，并能有效采取感染預防措施，控制和減少醫院內多重耐藥菌感染的發生。