曹 越,孫文琳,孫利麗,張鳳宇,陳勝軍,蔡 成
(大連森林動(dòng)物園有限公司 116013)
鉤端螺旋體病又稱鉤體病,指的是由各類不同形態(tài)的致病性鉤端螺旋體引發(fā)的一種急性全身性感染性疾病,具有人畜共患的特征,大多分布于東南亞與東亞地區(qū),可能會(huì)引發(fā)腎臟、生殖系統(tǒng)等病變,同時(shí)還會(huì)危及動(dòng)物生命。動(dòng)物保護(hù)人員與獸醫(yī)人員應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步強(qiáng)化對(duì)野生動(dòng)物鉤體病特性的分析,從而使防控與治療工作的開展更具針對(duì)性。
鉤端螺旋體病的病原為致病性鉤端螺旋體,屬于革蘭氏陰性厭氧菌的一種,從形態(tài)層面來看,鉤端螺旋體往往具備纖細(xì)不均的特性,長(zhǎng)度大約在6~20 μm,寬度在0.1~0.2 μm,表面分布著細(xì)密規(guī)則的螺旋,菌體一端或兩端呈勾狀,通過暗視野顯微鏡或電鏡進(jìn)行觀察能夠發(fā)現(xiàn),鉤體能夠進(jìn)行屈曲前后移動(dòng),并能夠圍繞螺旋軸進(jìn)行旋轉(zhuǎn)。從結(jié)構(gòu)層面來看,鉤端螺旋體主要由鞘膜、胞壁、漿膜、中軸等四個(gè)主要部分構(gòu)成,對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求較高,適宜在28~30℃的環(huán)境下進(jìn)行生長(zhǎng),對(duì)干燥與強(qiáng)光環(huán)境的適應(yīng)能力較差。
鉤端螺旋體病常見于哺乳動(dòng)物體系當(dāng)中,其中涵蓋牛、豬、犬、馬等家畜以及狐、鹿、貉等野生動(dòng)物。通過對(duì)鉤端螺旋體病的世界分布進(jìn)行分析后能夠得出結(jié)論,溫帶或熱帶地區(qū)動(dòng)物發(fā)病率更高,這可能與鉤端螺旋體適宜的高溫、高濕生長(zhǎng)環(huán)境相關(guān)[1]。現(xiàn)階段在自然界當(dāng)中發(fā)現(xiàn)的鉤端螺旋體血清型超過兩百余種,但受到環(huán)境因素的影響以及流行病學(xué)傳播因素的影響,在一定地區(qū)傳播的鉤端螺旋體病往往僅來源于一種亞型。
從傳播渠道來看,野生環(huán)境下的鉤端螺旋體病病原的主要攜帶者為嚙齒類生物,其中尤以溝鼠、黃胸鼠為甚。另外,受嚙齒類生物生存環(huán)境、繁殖速度等相關(guān)因素的影響,導(dǎo)致鉤端螺旋體病病原在野生環(huán)境當(dāng)中的分布與傳播較為廣泛。
從病原環(huán)境污染狀態(tài)來看,由于鉤端螺旋體喜濕、喜熱,因此在水塘、水田、草地等濕度較大地區(qū)及周邊容易發(fā)生傳染。此外,野生環(huán)境下鉤端螺旋體病的傳播還呈現(xiàn)出較為明確的季節(jié)性特征,夏季多雨濕熱的氣候特點(diǎn)同樣也推動(dòng)了病原傳播速度的不斷加快。
受到不同種類野生動(dòng)物生長(zhǎng)環(huán)境、體態(tài)特征、習(xí)性等要素的影響,導(dǎo)致野生動(dòng)物對(duì)于鉤端螺旋體病的適應(yīng)能力以及抵抗能力存在一定的差異,從臨床發(fā)病表現(xiàn)上來看,也形成了一定的區(qū)別,本文以北極狐、鹿、貉以及水貂等四種野生動(dòng)物的臨床癥狀為例進(jìn)行介紹。
北極狐,又稱藍(lán)狐、白狐,是犬科狐屬動(dòng)物的一種,體長(zhǎng)約為50~60 cm,體重約為2.5~4 kg,主要分布于北極高山地區(qū)。作為北極狐生活繁殖過程當(dāng)中面臨的一種重要傳染病威脅,一旦感染鉤端螺旋體病,北極狐個(gè)體的死亡率將達(dá)到90%以上,按照發(fā)病進(jìn)展階段進(jìn)行分析,可將北極狐種群當(dāng)中常見感染的鉤端螺旋體病分為急性型、普通型以及慢性型等幾種。
急性型鉤體病的潛伏期在2~12 d,感染北極狐可能出現(xiàn)消化系統(tǒng)異常、心率異常加速、呼吸急速、體溫升高等表現(xiàn),與此同時(shí),病狐還可能并發(fā)黃疸、痙攣等現(xiàn)象,并有較大可能會(huì)引發(fā)病狐的死亡。
普通型鉤體病發(fā)作時(shí),臨床可能出現(xiàn)較為明顯的精神萎靡、乏力、黏膜潰瘍、體溫異常上升、心率異常加速等。另外,相較于急性型鉤體病而言,普通型鉤體病還會(huì)對(duì)病狐的泌尿系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)以及神經(jīng)中樞系統(tǒng)產(chǎn)生影響,一些病狐會(huì)因呼吸衰竭在短時(shí)間內(nèi)死亡。
慢性型鉤體病的病程大約在1~3 個(gè)月左右,感染狐可能產(chǎn)生黃疸、貧血、消化不良、黏膜發(fā)炎等情況,一些感染狐的體溫不穩(wěn)定,并可能在鉤體病發(fā)展的同時(shí)產(chǎn)生器官衰竭引發(fā)死亡現(xiàn)象[2]。部分病例可能會(huì)在慢性型鉤體病發(fā)展過程當(dāng)中康復(fù),但精神狀態(tài)以及生長(zhǎng)狀態(tài)均會(huì)受到較為明確的負(fù)面影響。
常見的威脅野生鹿群的致病性鉤端螺旋體主要包括黃疸型以及波摩那型兩種主要類別,通過對(duì)野生鹿群當(dāng)中鉤端螺旋體病的發(fā)展表現(xiàn)進(jìn)行調(diào)查分析,鹿群中鉤端螺旋體病按照進(jìn)展階段進(jìn)行分析可主要分為急性型與普通型兩種主要類型。
在急性型病例當(dāng)中,可能會(huì)出現(xiàn)病鹿體溫急速異常升高、精神不振、食欲受挫、心率異常加快等問題,與此同時(shí),針對(duì)急性型病鹿的排泄物進(jìn)行分析和測(cè)試能夠發(fā)現(xiàn),大部分病鹿的尿液均呈現(xiàn)深黃色或紅色,同時(shí)還可能會(huì)并發(fā)黃疸癥狀。
在普通型病例當(dāng)中,鹿個(gè)體所呈現(xiàn)出的臨床狀態(tài)與急性型病例往往具備一定的相似性,但在病程發(fā)展階段以及發(fā)展速度等方面則更加緩慢,與此同時(shí),普通型病例當(dāng)中的個(gè)體在精神狀態(tài)、食欲等方面的負(fù)面表現(xiàn)則更為顯著。
貉是犬科貉屬的一種哺乳動(dòng)物,體長(zhǎng)約為45~65 cm,體重約為3~6 kg,大多生活于闊葉林當(dāng)中臨近水源的地帶,具有較為明確的群體性、夜行性特點(diǎn)。受到生活環(huán)境以及生活習(xí)慣的影響,導(dǎo)致野生貉同樣也是鉤端螺旋體病的重要感染體。受到生活環(huán)境污染或水源污染等因素的影響,可能會(huì)導(dǎo)致感染或發(fā)病情況的產(chǎn)生[3]。從臨床角度來看,野生貉感染的鉤端螺旋體病大多呈現(xiàn)急性癥狀,其中,一些病例會(huì)突然出現(xiàn)食欲不振、腹瀉、嘔吐、精神萎靡、黏膜潰瘍以及黃疸等癥狀,部分病例會(huì)并發(fā)身體痙攣、窒息、體溫異常變化等癥狀,嚴(yán)重的還會(huì)因窒息或衰竭而亡。
水貂是一種食肉目,鼬科的哺乳動(dòng)物,體態(tài)呈細(xì)長(zhǎng)型特征,體長(zhǎng)大多為38~40 cm,體重大多為1.6 kg以上,屬半水棲哺乳動(dòng)物。感染鉤端螺旋體病的水貂可能會(huì)出現(xiàn)體溫異常上升、食欲不振、精神萎靡、呼吸不暢、心率加快、排泄異常等問題,同時(shí)還可能并發(fā)黃疸。但由于野生水貂機(jī)體狀態(tài)以及生活習(xí)性的影響,個(gè)體對(duì)鉤端螺旋體病具備一定的抵抗力,疾病致死率較低。
為了更加準(zhǔn)確地針對(duì)野生生物種群當(dāng)中感染與傳播的鉤端螺旋體病進(jìn)行檢測(cè)與診斷,充分提升鉤端螺旋體病診治方案的針對(duì)性與有效性,相關(guān)獸醫(yī)單位以及技術(shù)人員可采取以下措施和手段展開工作。
基于血清學(xué)檢測(cè)針對(duì)野生動(dòng)物個(gè)體的病情狀態(tài)以及發(fā)展情況進(jìn)行分析具有重要作用和意義。通過對(duì)疑似病例進(jìn)行采樣檢測(cè)與分析,能夠較為直觀地展現(xiàn)出疑似病例體內(nèi)的抗體狀態(tài),進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對(duì)野生動(dòng)物鉤端螺旋體病的有效診斷。
獸醫(yī)技術(shù)人員可將采集到的病例血清樣本與本地的致病性鉤端螺旋體樣本進(jìn)行混合,并觀測(cè)樣本混合過程當(dāng)中鉤端螺旋體形態(tài)的變化情況,當(dāng)出現(xiàn)鉤體凝集現(xiàn)象時(shí),能夠認(rèn)定病例樣本當(dāng)中包含了致病性鉤端螺旋體的病原抗體,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)野生動(dòng)物個(gè)體感染狀態(tài)的有效診斷[4]。但在進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)工作的過程當(dāng)中,最終的診斷與檢測(cè)結(jié)果也會(huì)受到相關(guān)要素的影響,具體包含了以下幾方面內(nèi)容。
首先,感染動(dòng)物體內(nèi)的抗體可能會(huì)在檢測(cè)過程當(dāng)中產(chǎn)生一定的交叉反應(yīng),對(duì)血清學(xué)檢測(cè)最終體現(xiàn)出的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生相應(yīng)的沖擊和影響。基于上文能夠得知,在野生環(huán)境當(dāng)中,動(dòng)物可能感染的鉤端螺旋體血清型達(dá)到兩百余種,而不同血清型的臨床表現(xiàn)以及抗體反應(yīng)可能會(huì)產(chǎn)生一定的差異,在針對(duì)感染受體尿液、血液等樣本進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)的過程當(dāng)中可能會(huì)體現(xiàn)為結(jié)果異常,對(duì)鉤體病感染血清型的判斷與認(rèn)定產(chǎn)生一定的負(fù)面作用。
其次,疫苗以及感染受體免疫系統(tǒng)造成的影響。作為一種終身免疫性疾病,鉤端螺旋體病在野生環(huán)境下與動(dòng)物個(gè)體的免疫系統(tǒng)狀態(tài)息息相關(guān),一些動(dòng)物體內(nèi)抗體濃度較高,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),對(duì)于致病性鉤端螺旋體的抵抗能力較好,在血清學(xué)檢測(cè)過程當(dāng)中可能會(huì)反饋較為理想的結(jié)果,但由于鉤體依然存留于動(dòng)物體內(nèi),因此同樣也會(huì)對(duì)動(dòng)物周邊的生存環(huán)境產(chǎn)生影響甚至污染。另外,受到免疫機(jī)制因素的影響,導(dǎo)致一些動(dòng)物在形成免疫屏障的同時(shí),維持時(shí)間以及對(duì)致病性鉤體的抵抗能力存在一定不足,同樣也會(huì)影響血清型檢測(cè)的最終結(jié)果。
再次,由于在野生環(huán)境當(dāng)中,致病性鉤端螺旋體影響到的動(dòng)物或宿主類別較為多樣,對(duì)于鉤體的適應(yīng)性也存在著一定的差別,一般來說,疑似感染主體體內(nèi)的抗體滴度在1:1600 左右基本可以認(rèn)定感染了致病性鉤體。但由于大部分野生動(dòng)物體內(nèi)抗體水平往往都會(huì)隨著時(shí)間發(fā)展而不斷下降,因此基于血清測(cè)試法針對(duì)致病性鉤體進(jìn)行診斷的難度也在不斷提升。
最后,在現(xiàn)階段致病性鉤體的血清學(xué)檢測(cè)工作開展過程中,PCR 技術(shù)得到了較為廣泛地運(yùn)用,但受到該類型技術(shù)精準(zhǔn)度情況、適用范圍以及適用環(huán)境等相關(guān)因素的影響,導(dǎo)致對(duì)少量致病性鉤體的評(píng)定準(zhǔn)確性存在一定欠缺,影響了血清學(xué)測(cè)試的效果。
間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)是血清學(xué)檢測(cè)工作當(dāng)中的一項(xiàng)重要技術(shù)手段。獸醫(yī)人員可基于以下步驟展開試驗(yàn)工作。第一,應(yīng)當(dāng)做好采樣工作,將待檢血清0.1 mL 與正常動(dòng)物紅細(xì)胞0.4 mL 進(jìn)行混合,并在水浴狀態(tài)下進(jìn)行離心,取上清液得到樣本血清。第二,為使間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)工作的開展獲取到更加充分的物質(zhì)保障與實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),將上清液采用生理鹽水進(jìn)行再次稀釋。第三,試驗(yàn)孔與對(duì)照孔當(dāng)中加入2.5%動(dòng)物紅細(xì)胞稀釋液各0.1 mL,并進(jìn)行搖勻。第四,在37℃條件下靜置2 h。第五,對(duì)照孔以及試驗(yàn)孔當(dāng)中的結(jié)果進(jìn)行比較與研判,具體比較指標(biāo)如表1 所示。

表1 間接紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)分析指標(biāo)
通過對(duì)試驗(yàn)孔、對(duì)照孔以及試驗(yàn)分析指標(biāo)進(jìn)行相互比對(duì)能夠較為直觀地分析出疑似病例樣本的抗體狀態(tài),并針對(duì)感染情況進(jìn)行研判,從而為后續(xù)治療與預(yù)防方案的構(gòu)建提供支持和參考。
受到環(huán)境因素、感染受體免疫系統(tǒng)因素等相關(guān)要素的影響,導(dǎo)致基于血清學(xué)檢測(cè)進(jìn)行的鉤端螺旋體病診斷工作可能存在一定的準(zhǔn)確性風(fēng)險(xiǎn),因此獸醫(yī)團(tuán)隊(duì)可采取實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的方法進(jìn)行診斷,從而更加精準(zhǔn)地明確樣本血清當(dāng)中的抗體情況[5]。
技術(shù)人員可采用柯索夫氏培養(yǎng)基作為培養(yǎng)環(huán)境,并按照血清樣本類別和特性合理選擇培養(yǎng)接種方式,當(dāng)血清或病料樣本存在污染時(shí),可針對(duì)性添加5-氟尿嘧啶或SD250 等,減少污染現(xiàn)象對(duì)培養(yǎng)過程造成的影響。最后,分別采用蛋白凝集試驗(yàn)、反向炭凝試驗(yàn)等手段和方法對(duì)培養(yǎng)基內(nèi)部樣本進(jìn)行測(cè)試。
為進(jìn)一步減少致病性鉤端螺旋體給野生動(dòng)物帶來的危害,確保野生環(huán)境的安全穩(wěn)定和持續(xù),獸醫(yī)技術(shù)人員還需要結(jié)合上述動(dòng)物臨床表現(xiàn)情況以及診斷策略構(gòu)建較為完善的治療與預(yù)防方案。
從治療措施層面來看,獸醫(yī)人員可采用25 mg/kg.bw 氨芐西林進(jìn)行靜脈注射,并口服阿莫西林克拉維酸鉀、馬波沙星等,從而有效減少感染受體體內(nèi)可能存在的致病性微生物。此外,為了保障野生動(dòng)物治療過程的安全性,進(jìn)一步強(qiáng)化野生動(dòng)物的新陳代謝,獸醫(yī)人員還可在治療方案當(dāng)中針對(duì)性加入利尿藥劑,有效提升野生環(huán)境下鉤端螺旋體病的治療效果。
從防控角度來看,野生動(dòng)物管理部門應(yīng)當(dāng)采取更加全面的防控與管理措施,針對(duì)野生動(dòng)物檢疫隔離制度進(jìn)行及時(shí)改革,并針對(duì)高危動(dòng)物種群進(jìn)行疫苗的接種,此外,在與野生動(dòng)物進(jìn)行接觸的過程當(dāng)中,還應(yīng)當(dāng)做好人員的隔離與防控,避免出現(xiàn)人獸交叉感染。
綜上所述,在野生環(huán)境當(dāng)中,鉤端螺旋體病可能會(huì)給哺乳動(dòng)物的生存和繁衍帶來極大的風(fēng)險(xiǎn)與挑戰(zhàn)。獸醫(yī)技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)做好對(duì)鉤體病臨床癥狀以及治療方法的研究工作,進(jìn)一步減少鉤體病給動(dòng)物帶來的威脅,保障野生環(huán)境的健康持續(xù)發(fā)展。