38%咪銅·多菌靈懸浮劑分析方法研究

羅琳，袁玉兵

(1.安道麥輝豐(江蘇)有限公司，江蘇 鹽城 224100；2.江蘇輝豐石化有限公司，江蘇 鹽城 224100)

38%咪銅·多菌靈懸浮劑是由30%咪鮮胺銅鹽與8%多菌靈復配的低毒殺菌劑，具有良好的保護、治療和滲透作用。已有小麥赤霉病對多菌靈產生抗性的報道，可采用多菌靈與其他農藥混配成復配制劑，或者與其作用機理不同的殺菌劑交替使用以達到防治小麥赤霉病的效果[1]。咪鮮胺是一種廣譜低毒殺菌劑，對炭疽病[2-3]、水稻紋枯病[4]、小麥赤霉病[5]等具有良好的效果，故多菌靈與咪鮮胺復配可用于防治對多菌靈抗性的小麥赤霉病。38%咪銅·多菌靈懸浮劑的分析方法已有報道，但2 者需分別進行測定[6]，或可以同時測定咪鮮胺與多菌靈質量分數[7]，但在38%咪銅·多菌靈懸浮劑產品中存在干擾；還有采用液質聯用方法可以同時測定咪鮮胺與多菌靈質量分數[8-9]，但分析成本較高且過程復雜。本文開發了HPLC 方法同時測定該產品中咪鮮胺與多菌靈質量分數并能很好的分離，且互不干擾。

1 材料與方法

1.1 試劑和溶液

乙腈(色譜純，賽默飛世爾科技)，水(超純水)，N,N-二甲基甲酰胺(DMF，美國TEDIA，純度99.80%)，乙酸銨(麥克林試劑)，99.45%咪鮮胺標樣、98.0%多菌靈標樣[國家質量監督檢驗中心(沈陽)]。

1.2 儀器設備

Agilent 1260 InfinityⅡ液相色譜儀(具ALS 自動進樣器，VWD 外檢測器)、Chemstation 色譜工作站(美國安捷倫公司)，ML 104/02 電子天平(梅特勒-托利多儀器公司)，超純水機(德國達姆施塔特默克集團)。

1.3 液相色譜測定條件

試樣用DMF 溶解，以0.1 mol/L 乙酸銨水溶液為流動相A，乙腈為流動相B，使用以Eclipse XDB-C84.6 mm×250 mm、5 μm 色譜柱和紫外檢測器(235 nm)，對試樣中的咪鮮胺與多菌靈進行分離和定量。

流速：1.2 mL/min；柱溫：25 ℃；檢測波長：235 nm；進樣體積：1 μL；運行時間：16 min；后運行時間：2 min；流動相A：0.1 mol/L 乙酸銨水溶液，流動相B：乙腈，采取梯度方式(表1)；保留時間：多菌靈3.2 min，咪鮮胺12.2 min。溶劑、咪鮮胺、多菌靈標樣和試樣的色譜圖(圖1～圖4)。

圖1 溶劑空白(DMF)

圖2 多菌靈標樣色譜圖

圖3 咪鮮胺標樣色譜圖

圖4 38%咪銅·多菌靈SC 試樣色譜圖

表1 流動相

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的配制

準確稱取多菌靈標樣50.0 mg(精確至0.0002 g)、咪鮮胺標樣172.0 mg(精確至0.0002 g)置于50 mL容量瓶中，用DMF 溶解定容到刻度，搖勻。

1.4.2 試樣溶液的配制

準確稱取625.0 mg左右(精確至0.0002 g)38%咪銅·多菌靈SC 試樣置于50 mL 容量瓶中，用DMF溶解定容到刻度，超聲5 min，用0.45 μm 濾膜過濾備用。

1.4.3 測定

在上述色譜條件下，待儀器穩定后，先注入數針標樣溶液，直至標樣的響應值基本穩定后，按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液順序進樣。

1.4.4 計算

將測得的2 針試樣溶液以及試樣前后2 針標樣溶液中的多菌靈與咪鮮胺的峰面積分別進行平均，試樣中多菌靈與咪鮮胺的質量分數X1按下式計算：

式中：A1為試樣溶液中多菌靈、咪鮮胺峰面積的平均值；A2為標樣溶液中多菌靈、咪鮮胺峰面積的平均值；m1為試樣的質量(g)；m2為多菌靈標樣、咪鮮胺標樣的質量(g)；P為多菌靈標樣、咪鮮胺標樣純度(%)。

2 結果與分析

2.1 方法特異性和非分析物的干擾分析

按照配方比例，將除多菌靈原藥、咪鮮胺原藥以外的所有助劑混勻，配制制劑空白試樣。稱取約625 mg 空白制劑，按照上述方法進行分析測定。在有效成分保留時間處(多菌靈約3.2 min，咪鮮胺約12.2 min)無響應，證明非分析物對有效成分多菌靈、咪鮮胺的測定無干擾。

2.2 色譜條件的優化

多菌靈與咪鮮胺的紫外吸收光譜圖見圖5、圖6，從圖中可知多菌靈最大吸收波長214、242、286 nm，咪鮮胺最大吸收波長220 nm，空白制劑試樣在235 nm 處無干擾峰，綜合考慮檢測波長選擇235 nm。

圖5 多菌靈的紫外吸收光譜圖

圖6 咪鮮胺的紫外吸收光譜圖

色譜柱為常規的Eclipse XDB-C8反相色譜柱。由于多菌靈在甲醇、乙腈中的溶解度較小，選擇N,N-二甲基甲酰胺(DMF)作為溶劑，以乙腈與乙酸銨溶液為流動相，由于多菌靈流出較快，與溶劑DMF 出峰時間較為接近，咪鮮胺流出較慢，為節省分析時間并能達到很好的分離效果，多菌靈流出前減小有機相比例，咪鮮胺流出前增加有機相比例，最終流速選擇1.2 mL/min，流動相采用梯度方式。結果證明采用以上條件進行測定時，有效成分與溶劑分離度能滿足要求，且峰型對稱。

2.3 線性相關

2.3.1 標準系列溶液的配制

分別準確稱取多菌靈標樣40.0、46.3、50.2、55.5、60.3 mg，咪鮮胺標樣138.2、154.3、172.2、183.5、206.2 mg，精確到±0.1 mg，對應的多菌靈和咪鮮胺分別置于5 個50 mL 容量瓶中，用DMF 溶解定容到刻度，搖勻，分別標為SD1～SD5。

2.3.2 線性關系測定

在上述色譜條件下，待儀器穩定后，進不同濃度的標準溶液，測定其相應的峰面積，以質量濃度為橫坐標、峰面積值為縱坐標進行線性回歸。結果表明：多菌靈質量濃度為0.7840～1.1819 mg/mL 時具有良好的線性范圍，線性回歸方程為y=2831.2x-102.01，相關系數R2=0.9998 (表2)；咪鮮胺質量濃度為2.7488～4.1013 mg/mL 時具有良好的線性范圍，線性回歸方程為y=981.31x-66.187，相關系數R2=0.9993(表3)。

表2 多菌靈的線性范圍測定結果

表3 咪鮮胺的線性范圍測定結果

2.4 準確度測定

在1.3 的色譜條件下，空白試樣中加入一定量的多菌靈與咪鮮胺標樣，測定其質量分數，計算回收率(表4、表5)。

表4 多菌靈的準確度測定

表5 咪鮮胺的準確度測定

多菌靈的回收率為99.3%～99.7%，咪鮮胺的回收率為99.4%～99.8%，表明本方法用于38%咪銅·多菌靈懸浮劑中多菌靈和咪鮮胺的定量分析是可行的。

2.5 精密度測定

分別稱取6 個38%咪銅·多菌靈懸浮劑試樣至50 mL 容量瓶，按照1.3 中方法進行分析，測得多菌靈與咪鮮胺質量分數的相對標準偏差(RSD)分別為0.4%、0.36%(表6、表7)。結果表明：RSD 小于修改的Horwitz 公式×0.67，該方法精密度符合質量檢測的要求。

表6 多菌靈的精密度測定

表7 咪鮮胺的精密度測定

3 結論

本文對38%咪鮮胺銅鹽·多菌靈懸浮劑的有效成分質量分數分析方法進行分析研究，經過方法特異性驗證無干擾，線性關系分別為0.9993 和0.9998，準確度分別為99.6%和99.5%，相對標準偏差分別為0.36%和0.40%，各項驗證均證明該方法能準確測定咪鮮胺和多菌靈質量分數，且簡單易操作，節約了分析時間和成本，可用于該制劑的質量檢測。