肺腺癌患者CT征象表現(xiàn)與P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表達(dá)的相關(guān)性

孟錦,孫興智,范雪微

(新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院/新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第四臨床學(xué)院 a.CT室;b.核磁共振室;河南 新鄉(xiāng) 453000)

肺癌是目前發(fā)病率和死亡率增長最快的一種惡性腫瘤,嚴(yán)重威脅患者的健康及生命安全,根據(jù)其發(fā)病機(jī)制及臨床病理可分為腺癌、鱗癌等病理類型,肺腺癌屬于非小細(xì)胞癌,是一種常見的肺癌[1-2]。目前關(guān)于肺腺癌的病理機(jī)制尚不十分清楚,多認(rèn)為肺腺癌的發(fā)生、發(fā)展與多種生物學(xué)因子有關(guān)[3]。抑癌基因P53基因突變可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長及腫瘤細(xì)胞增生,在乳腺癌、肝癌、結(jié)直腸癌、胃癌等多種惡性腫瘤中呈異常表達(dá)[4]。上皮鈣黏蛋白(epithelial cadherin,E-cadherin)是一種重要的黏附分子,其水平與肺腺癌腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[5]。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)常被認(rèn)為是一種負(fù)性生長調(diào)節(jié)因子,能抑制多種正常細(xì)胞的增殖,體內(nèi)TGF-β1表達(dá)增多可促進(jìn)癌細(xì)胞生長[6]。胸部計(jì)算機(jī)斷層掃描(computed tomography,CT)可有效反映患者肺部改變情況,其影像學(xué)征象有助于肺腺癌的臨床診斷,是肺腺癌早期篩查診斷的主要影像學(xué)手段[7]。本研究擬探明肺腺癌患者CT征象與P53、E-cadherin、TGF-β1的相關(guān)性,以期為肺腺癌的早期診療提供參考。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2020年1月至2022年12月在新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院行手術(shù)切除的97例肺腺癌患者為研究對(duì)象,其中男62例,女35例;年齡42～78(52.36±5.13)歲;TNM分期Ⅰ期37例,Ⅱ期41例,ⅢA期19例;病理學(xué)分類原位癌39例,微浸潤性腺癌24例,貼壁生長型浸潤性腺癌34例;腫瘤直徑1～12(4.23±1.37)cm;分化程度高分化26例,中分化41例,低分化30例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)具有肺癌臨床表現(xiàn),經(jīng)輔助影像學(xué)檢查診斷,術(shù)后病理檢查確診為肺腺癌[8];(2)接受外科手術(shù)治療,術(shù)中留取癌組織和癌旁組織(距癌組織邊緣>3 cm)標(biāo)本;(3)首次發(fā)病的初診病例,入組前未接受過任何抗腫瘤治療;(4)臨床資料完整,術(shù)前具有完整的CT影像資料;(5)患者或其家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)合并其他惡性腫瘤;(2)術(shù)前使用過免疫制劑;(3)合并肺炎、肺部先天疾病;(4)有胸部手術(shù)史;(5)合并其他器官疾病或全身性疾病。

1.2 研究方法

1.2.1P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白檢測

采用免疫組化法檢測肺癌及癌旁組織P53、E-cadherin、TGF-β1表達(dá)情況。手術(shù)收集的肺癌及癌旁組織標(biāo)本用體積分?jǐn)?shù)10%的中性福爾馬林緩沖液進(jìn)行固定,常規(guī)脫水處理后用石蠟包埋切片,厚度4 μm。P53、E-cadherin、TGF-β1試劑盒分別購于上海信裕生物科技有限公司、上海將來實(shí)業(yè)股份有限公司、上海雅吉生物科技有限公司,檢測過程嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行操作。檢測結(jié)果由2名經(jīng)驗(yàn)豐富(5 a以上經(jīng)驗(yàn))的病理醫(yī)生獨(dú)立觀察判讀后取兩名醫(yī)生的均值為最終結(jié)果。定位標(biāo)準(zhǔn):P53陽性在細(xì)胞核定位,E-cadherin陽性在細(xì)胞膜定位,TGF-β1陽性在細(xì)胞質(zhì)定位。陽性判讀標(biāo)準(zhǔn):綜合考慮陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度及切片觀察細(xì)胞中陽性細(xì)胞所占百分比,采用半定量法判斷是否為陽性表達(dá)。(1)陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度計(jì)分標(biāo)準(zhǔn):未著色記0分,淡黃色記1分,棕黃色記2分,黃褐色記3分;(2)陽性細(xì)胞所占百分比計(jì)分標(biāo)準(zhǔn):陽性細(xì)胞≤25%記0分,陽性細(xì)胞>25%且≤50%記1分,陽性細(xì)胞>50%且≤75%記2分,陽性細(xì)胞≥75%記3分。陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度計(jì)分與陽性細(xì)胞所占百分比計(jì)分乘積<3分判斷為陰性,≥3分判斷為陽性[9]。

1.2.2術(shù)前CT檢查

采用德國西門子公司的Definition As型64排128層螺旋CT機(jī)進(jìn)行胸部CT掃描,掃描范圍為肺尖至隔底,掃描參數(shù)管電流100～200 mA,管電壓120 kV,螺距1.2,矩陣512×512,重建層厚1 mm,層間距0.5 mm,首先進(jìn)行CT平掃,然后注射非離子型對(duì)比劑碘普羅胺注射液(德國Bayer Vital GmbH公司,國藥準(zhǔn)字J20180039,規(guī)格50 mL∶31.17 g)50 mL,等滲鹽水40 mL,延遲掃描時(shí)間13～16 s,雙期或三期增強(qiáng)掃描。掃描完成后數(shù)據(jù)傳送至PACS系統(tǒng)及后處理工作站進(jìn)行圖像重建,由2名經(jīng)驗(yàn)豐富(5 a以上經(jīng)驗(yàn))的影像科專業(yè)醫(yī)生進(jìn)行閱片,記錄腫瘤內(nèi)部及邊緣結(jié)構(gòu)特征,主要包含:(1)棘突征(結(jié)節(jié)邊緣為尖角狀突起,形如小三角,邊緣不規(guī)則);(2)血管集束征(結(jié)節(jié)四周大血管及小支氣管朝病灶區(qū)域聚攏,或直接連接病灶);(3)胸膜凹陷征(病灶與胸膜間存在的線形或幕狀及星狀陰影);(4)毛刺征(病灶邊緣朝四周肺實(shí)質(zhì)延伸的一種不與胸膜粘連、呈放射狀且無分支的線條形影像);(5)分葉征(邊緣不光滑,有數(shù)個(gè)弧形突起或凹陷,且呈切跡樣變化);(6)空泡征(病灶中殘留的含氣肺組織或支氣管所產(chǎn)生的1～3 mm含氣低密度區(qū))。如兩醫(yī)生單獨(dú)評(píng)價(jià)結(jié)果不一致,則討論得出一致意見。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 肺腺癌組織與癌旁組織P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表達(dá)

肺腺癌組織P53、TGF-β1蛋白陽性表達(dá)率高于癌旁組織,E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率低于癌旁組織(P<0.05)。見表1。

表1 肺腺癌組織與癌旁組織P53、E-cadherin、TGF-β1蛋白表達(dá)比較 [n(%)]

2.2 肺腺癌組織P53表達(dá)與CT征象的關(guān)系

有棘突征、毛刺征和分葉征CT征象的肺腺癌組織中P53蛋白陽性表達(dá)率高于無棘突征、毛刺征和分葉征CT征象患者(P<0.05);有無血管集束征、胸膜凹陷征、空泡征等CT征象的肺腺癌組織中P53蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 肺腺癌組織P53蛋白表達(dá)與CT征象的關(guān)系 [n(%)]

2.3 肺腺癌組織E-cadherin表達(dá)與CT征象的關(guān)系

有棘突征、毛刺征CT征象的肺腺癌組織中E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率低于無棘突征、毛刺征CT征象患者(P<0.05);有無血管集束征、胸膜凹陷征、分葉征、空泡征等CT征象的肺腺癌組織中E-cadherin蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 肺腺癌組織E-cadherin蛋白表達(dá)與CT征象的關(guān)系 [n(%)]

2.4 肺腺癌組織TGF-β1蛋白表達(dá)與CT征象的關(guān)系

有血管集束征、毛刺征、分葉征CT征象的肺腺癌組織中TGF-β1蛋白陽性表達(dá)率高于無血管集束征、毛刺征、分葉征CT征象患者(P<0.05);有無棘突征、胸膜凹陷征、空泡征CT征象的肺腺癌組織中TGF-β1表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

表4 肺腺癌組織TGF-β1表達(dá)與CT征象的關(guān)系 [n(%)]

3 討論

影像學(xué)是目前醫(yī)學(xué)發(fā)展最快的學(xué)科,對(duì)腫瘤的診斷具有很大的價(jià)值,CT檢查對(duì)肺癌的早期發(fā)現(xiàn)與診斷具有較高的靈敏度和特異度,腫瘤細(xì)胞的分子病理改變是CT征象差異形成的基礎(chǔ)[10]。肺腺癌分子水平改變可通過臨床、病理方面的一些指標(biāo)反映出來,而腫瘤細(xì)胞生長方式、增殖情況及浸潤情況的不同,所表現(xiàn)的CT征象也存在一定的差異[10]。本研究中肺腺癌CT征象主要表現(xiàn)為棘突征、血管集束征、胸膜凹陷征、毛刺征、分葉征、空泡征。棘突征是介于分葉征和毛刺征之間的一種較粗大而鈍的CT影像,其病理基礎(chǔ)為惡性腫瘤浸潤;血管集束征是血管到達(dá)瘤體內(nèi)或在瘤體邊緣截?cái)嗷虼┻^瘤體在CT圖像上的表現(xiàn);胸膜凹陷征是腫瘤與胸膜之間的線形或三角形影像,其病理基礎(chǔ)為瘤體方向的纖維化收縮、胸膜無增厚粘連;毛刺征是瘤灶邊緣向周圍肺實(shí)質(zhì)伸展、不與胸膜相連的放射狀無分支的短細(xì)條影,其病理基礎(chǔ)為癌瘤直接浸潤性生長、滲出、增殖;分葉征是腫瘤邊緣較為明顯的凹凸不平呈分葉狀,其病理基礎(chǔ)是腫瘤收縮或腫瘤各部分生長速度不一致和分化程度不一致;空泡征是腫塊內(nèi)部出現(xiàn)1～3 mm小透亮區(qū),未被腫瘤組織占據(jù)的含氣肺組織和腫瘤內(nèi)小灶性壞死排出后形成,與腫瘤生長方式和增殖速度有關(guān)[11]。

由P53基因編碼的蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)錄因子,控制細(xì)胞啟動(dòng)周期,突變后的P53喪失了對(duì)細(xì)胞生長、凋亡過程的調(diào)控,導(dǎo)致細(xì)胞增殖失控,引起細(xì)胞惡變,可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長及腫瘤細(xì)胞增生[12]。本研究顯示肺腺癌組織P53蛋白陽性表達(dá)率高于癌旁組織,有棘突征、毛刺征和分葉征CT征象的肺腺癌組織中P53蛋白陽性表達(dá)率高于無棘突征、毛刺征和分葉征CT征象者。原因可能是P53蛋白表達(dá)增加,癌細(xì)胞增長加快,并影響細(xì)胞內(nèi)蛋白降解,這就形成了棘突征、毛刺征和分葉征的分子病理基礎(chǔ)[13]。E-cadherin是介導(dǎo)細(xì)胞之間相互黏附的鈣依賴性跨膜蛋白,起膜固定的作用,其表達(dá)與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān),表達(dá)降低表明固膜作用喪失,腫瘤細(xì)胞更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移[14]。本研究顯示,肺腺癌組織E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率低于癌旁性組織,有棘突征、毛刺征CT征象的肺腺癌組織E-cadherin蛋白陽性表達(dá)率低于無棘突征、毛刺征CT征象者。原因可能是E-cadherin蛋白表達(dá)降低導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞黏附性降低,形成棘突征、毛刺征的分子病理基礎(chǔ)[14]。TGF-β1是轉(zhuǎn)化生長因子β超家族的多肽成員,具有調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化等多種細(xì)胞學(xué)功能,體內(nèi)TGF-β1表達(dá)增多可促進(jìn)癌細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移[15]。本研究顯示肺腺癌組織TGF-β1蛋白陽性表達(dá)率高于癌旁組織,有血管集束征、毛刺征、分葉征CT征象的肺腺癌組織中TGF-β1蛋白陽性表達(dá)率高于無血管集束征、毛刺征、分葉征CT征象者。TGF-β1蛋白表達(dá)增加,提高了肺腺癌細(xì)胞增殖、分化和轉(zhuǎn)移能力[16],形成了血管集束征、毛刺征、分葉征CT征象的分子病理基礎(chǔ)。

4 結(jié)論

肺腺癌組織P53、TGF-β1蛋白表達(dá)增高,E-cadherin蛋白表達(dá)降低,P53蛋白表達(dá)與棘突征、毛刺征和分葉征有關(guān),E-cadherin蛋白表達(dá)與棘突征、毛刺征有關(guān),TGF-β1蛋白表達(dá)與血管集束征、毛刺征和分葉征有關(guān)。