超聲輔助提取梔子油的理化性質與脂肪酸組成分析

■ 袁源見 劉少雄 何平平 王李俊* 羅光明

（1.江西中醫藥高等專科學校藥學系，江西 撫州 344000；2.江西中醫藥大學藥學院，江西 南昌 330004）

梔子又稱黃梔子、支子、山梔子、白蟾等，為茜草科梔子屬灌木植物。梔子的干燥成熟果實能夠作為藥用，具有清熱利濕、瀉火除濕、涼血解毒、外用消腫止痛等功效，適用于熱病心煩、濕熱黃疸、淋證澀痛、血熱吐衄、目赤腫痛、火毒瘡瘍等癥，外治扭挫傷痛[1]。

梔子油占梔子果實的12%以上，具有保肝、抗氧化、抗腫瘤、抗驚厥等作用[2]，在日用食品、化學工業和香料行業等應用較廣[3]。當前，已有學者開始研究梔子油的理化性質和品質[4-10]，但未見超聲輔助提取梔子油的理化性質與脂肪酸組成分析的文章報道，本研究在前期超聲輔助提取梔子油的基礎上，對其理化性質與脂肪酸組成進行了分析，旨在為尋找新油脂資源及梔子的綜合開發利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

成熟梔子果實采自江西省九江市湖口縣，在60 ℃恒溫烘箱中烘干，粉碎過20目篩，備用。

1.2 試驗試劑

冰乙酸(國藥集團化學試劑有限公司）、可溶性淀粉（西隴化工股份有限公司）、硫代硫酸鈉（天津市大茂化學試劑廠）、碘化鉀（西隴化工股份有限公司），無水乙醇（天津市恒興化學試劑制造有限公司）等均為分析純。

1.3 主要儀器與設備

KQ-250 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；RE52-99旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）；予華牌循環水真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司）；GZX-9070MBE 數顯鼓風干燥器（上海博迅實業有限公司醫療設備廠）；高速中藥粉碎機（浙江瑞安市永歷制藥機械有限公司）；Sartorius 電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；HH-4 數顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司）；氣相色譜質譜聯用儀（美國Agilent Technologies公司）。

1.4 梔子油的提取

梔子油的提取流程：梔子粉末→超聲波輔助提取（石油醚）→旋轉蒸發脫溶→梔子油。

1.5 梔子油理化性質測定

水分及揮發物含量測定：參照GB/T 5528—1995《植物油脂水分和揮發物含量測定》；酸值測定：參照GB/T 5530—2005《動植物油脂酸值和酸度測定》；皂化值測定：參照GB/T 5534—2008《動植物油脂皂化值測定》；碘值測定：參照GB/T 5532—2008《動植物油脂碘值測定》；磷脂測定：參照GB/T 5537—2008《糧油檢驗磷脂含量測定》

1.6 梔子油脂肪酸組成分析

甲酯化：稱取上述加工好的油樣100 mg，轉入10 mL 容量瓶中，加1 mL 乙醚-正己烷(2：1)溶液，再加入1 mL 0.5 mol/L 氫氧化鉀-甲醇溶液，搖勻，室溫靜置30 min，加水至刻度，取上清液，進行GC-MS分析。

氣相色譜條件：Agilent 122-3832 毛細管柱（0.25 mm×30 m×0.25 μm），升溫程序為60 ℃保持2 min，平衡0.5 min，以8 ℃/min 升到250 ℃，保持10 min，載氣為氮氣，流速為1.0 mL/min，進樣口溫度250 ℃，分流比50∶1，進樣量0.5 μL。

質譜條件：電子轟擊離子源，電子能量70 eV，溶劑延遲2.6 min，離子源溫度230 ℃，四級桿溫度150 ℃，質量掃描范圍(m/z) 35～450 amu。

2 結果與分析

2.1 梔子油的理化性質

梔子粉碎后，在前期采用響應面優化超聲波提取梔子油脂工藝研究的基礎上[11]，研究發現最佳提取工藝為：提取時間為29 min，液料比為12∶1，提取次數為3 次。試驗在最佳提取工藝的基礎上提取梔子果油，并采用相對應的國家標準測定其理化性質，結果如表1所示。

表1 梔子油的理化指標

表2 梔子油鉬藍比色的結果

由表1 可知，梔子油是一種半干性油脂，碘值為120.72 g/100 g；其皂化值為193.3 mgKOH/g，比國家規定的常見食用油的皂化值（200 mgKOH/g）[12]小；梔子油的酸值為1.84 mgKOH/g，比規定的食用植物油酸值≤3 mgKOH/g小。

2.2 梔子油磷脂含量

磷脂是構成生物體細胞膜的重要組成部分之一、其具有抗動脈粥樣硬化、降低血清膽固醇含量、調節脂肪代謝、改善肝功能等作用[13]。此外，磷脂還具有良好的乳化、分散和吸濕作用。

2.2.1 磷標準曲線的繪制

圖1 中的標準曲線擬合線性方程：Y=9.038 9X+0.003 7 是由Excel 軟件分析得來的，其中R2=0.999 6，說明該回歸曲線的擬合度較好。通過磷標準曲線的繪制，采用鉬藍比色法（波長為660 nm）測出梔子油的吸光值，對應標準曲線中的含量，根據相關公式計算出梔子油中的磷脂含量。

圖1 磷標準曲線

2.2.2 梔子油磷脂含量

測定磷脂的含量都采用鉬藍比色法。由相應的公式計算出梔子油的磷脂含量為1.54 mg/g，含量是較低的，要使磷脂含量再降低，花費的價格較高，故考慮到經濟效益與實際目的，試驗選擇不進行脫膠。

2.3 梔子油脂肪酸組成分析

梔子油脂肪酸組成根據面積歸一化法得到，GCMS 總離子流圖如圖2 所示。梔子油的脂肪酸組成以及分析結果如表3 所示。由表3 可知，從梔子油中共鑒定出14 種脂肪酸，包括9 種不飽和脂肪酸和5 種飽和脂肪酸，脂肪酸的含量為94.69%，其中不飽和脂肪酸的含量為82.66%，亞油酸的含量為59.25%，飽和脂肪酸中含量最高的是棕櫚酸（8.78%）。梔子油中含有的主要脂肪酸為亞油酸（59.25%）、油酸（21.47%）、棕櫚酸（8.78%）、硬脂酸（2.47%），這4 種脂肪酸的含量91.97%。

圖2 梔子油脂肪酸總離子流圖

表3 梔子油主要脂肪酸組成及相對含量

3 小結與討論

評價油脂質量的指標主要有皂化值、碘值、酸值等，酸值可以衡量油脂的抗氧化性能[14]，酸值愈大，說明油脂含有的游離脂肪酸越多，容易發生氧化導致油脂品質較差。根據相關規定，食用油的酸值不能大于5。皂化值的大小能夠反映出油脂中脂肪酸分子質量的大小[15]。油脂中的皂化值越大，則其脂肪酸分子量越小，親水性亦強。碘值對于油脂中不飽和程度起著重要衡量作用[16]，碘值亦低，表示油脂中的碳碳雙鍵亦少，則油脂易發生氧化反應，碘值與油脂中所含雙鍵數成正相關。

梔子油中含有豐富的不飽和脂肪酸，亞油酸是機體內必需的脂肪酸，其能夠維持表皮動態平衡和角質層滲透屏障[17],當亞油酸的含量減少時，將會使皮膚的屏障功能受損[18]。亞油酸能夠抑制CML 的生成，對熒光性晚期糖基化終產物的生成能夠減少，對丙二醛的合成量起著促進作用以及減少果糖胺的生成[19]。亞油酸能夠有效抑制巴豆油導致的小鼠耳腫脹，能夠改善佐劑型關節炎大鼠的關節炎癥以及減輕滑膜炎癥，其機制可能與降低IL-1β、NO 和TNF-α的水平有關[20]。同時，亞油酸對肝星狀細胞的增殖起著抑制作用且能夠緩解肝臟的纖維化[21]。油酸對于膽固醇的含量能夠明顯降低，其在心腦血管疾病起著一定的效果。梔子油中含量最高的飽和脂肪酸為棕櫚酸，具有抑制肝細胞的增殖[22]、降低肌肉素基因表達[23]、誘導骨骼肌細胞AMPK 活性增加[24]等作用。因此，梔子油具有很高的保健功能和開發價值以及有較好的應用前景，可以開發成功能性食用油。