二硫化硒洗發水的去屑止癢性能研究

陳 躍 張紅強 王佳慧 張佳美 曹福敏

1. 山西振東制藥股份有限公司，山西長治，047100；

2. 山西振東健康護理科技股份有限公司，山西長治，047100

頭皮脂溢性皮炎（seborrheic dermatitis）是一種慢性復發性炎癥性頭皮疾病[1]，它的特點是生成紅斑或輕至中度的鱗片，引起頭皮油膩和片狀頭皮屑并伴隨著瘙癢。在成年人群中，其患病率高達5%，選擇去屑洗發產品是人們解決這一煩惱的首選手段。

二硫化硒通過減少細胞生成，抑制核分裂，降低細胞功能等作用機制對抑制皮脂形成和殺滅真菌具有顯著作用，且對細菌和寄生蟲也有明顯抑制作用[2]。二硫化硒洗劑（2.5%）對多種真菌感染性皮膚病均有良好的效果[3]，如對脂溢性皮炎、接觸性皮炎等[4]具有效果顯著、不良反應少、應用廣泛等優勢[5]。

二硫化硒已收錄在《已使用化妝品原料名稱目錄（2021版）》[6]，其限用添加量為1%。本文旨在考察含1%二硫化硒洗發水的人體試用去屑止癢性能和抑菌測試。

1 實驗部分

1.1 原料

瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨、檸檬酸、月桂醇聚醚硫酸酯鈉（有效物含量70%）、丙烯酸（酯）類共聚物、椰油酰基甲基牛磺酸鈉（有效物含量30%）、椰油酰胺丙基甜菜堿（有效物含量30%）、椰油酰胺MEA（有效物含量100%）、丙二醇，上海科因實業有限公司；PPG-3 辛基醚，湖北巨勝科技有限公司；二硫化硒，海南君森化學科技有限公司。

1.2 菌株

糠秕馬拉色菌，白色念珠菌均由中國食品藥品檢定研究院提供。

1.3 試劑

改良Leeming-Notman培養基、MH瓊脂培養基、橄欖油均由北京三藥科技開發公司提供，濾紙由通用電氣生物科技有限公司提供。

1.4 儀器

頭皮影像分析儀（放大倍數：50倍），集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（型號DF-101S，鞏義市予華儀器有限責任公司），分析天平（精度：0.000 1 g），立式壓力蒸汽滅菌器（型號YXQ-LS-100A，上海博訊實業有限公司），培養箱（型號LRHS-250BF，上海賀德實驗設備有限公司），游標卡尺，超聲波破碎儀，濁度計，冰箱。

1.5 樣品配制方法

按表1的配方及以下方法配置洗發水。

表1 二硫化硒去屑洗發水配方

將A相依次加入瓜爾膠羥丙基三甲基氯化銨先用純化水分散，邊攪拌邊加熱，直至溶解；加熱至80 ℃，依次加入B相，直至完全溶解，攪拌均勻；降溫至60 ℃，將C相混合用均質機進行有效分散后加入，攪拌均勻；降溫至35 ℃，最后加入D相，直至完全溶解，攪拌均勻，取樣檢測合格，過濾出料。

2 試驗方法

2.1 抑菌實驗方法

2.1.1 樣品處理

將樣品用PBS溶液稀釋，作為檢測樣品母液，稀釋后樣品濃度為50%。

2.1.2 測試方法

將20 μL檢測樣品根據實際使用濃度滴加在濾紙片上，干燥后備用：對于溶出性固體試樣，制成直徑為5 mm、厚不超過4 mm的圓片。用無菌棉拭子蘸取濃度為（5.0×105～5.0×106） CFU/mL的試驗菌懸液，在培養基平板表面均勻涂抹3次。每次試驗貼放1個染菌平板，每個平板貼放4片試驗樣片，1片陰性對照樣片，共5片。蓋好平板，置（30±1） ℃培養72 h后觀察結果，用游標卡尺測量抑菌環的直徑。

2.1.3 質控

分別以糠秕馬拉色菌和白念珠菌為指示菌，設計陰性對照組和樣品組，每組設計3個生物學重復，采用抑菌環法，游標卡尺測定抑菌圈。

2.1.4 評價方法

根據形成的抑菌圈大小對洗發水樣品的去屑功效進行評價，參照WS/T 650—2019《抗菌和抑菌效果評價方法》中抑菌環實驗的結果判定標準，直徑大于7 mm者，具有抑菌作用。

陽性結果：受檢樣品在一定濃度下可以抑制糠秕馬拉色菌的生長，抑菌環直徑大于7 mm，且抑菌環越大代表該受檢樣品具有的去屑效果越好。

陰性結果：受檢樣品在一定濃度下可以抑制糠秕馬拉色菌的生長，抑菌環直徑小于7 mm，代表該受檢樣品不具有去屑效果。

2.2 去屑功效評估

2.2.1 研究對象

隨機選取30名具有明顯頭皮屑、脂溢性皮炎等頭皮皮膚病患者作為受試者，年齡22～40歲，其中男性10名，女性20名。排除標準：①1個月內參加藥物臨床試驗或其他試驗者；②一周內使用對試驗結果有影響的洗發水者；③1個月內有外用或內服抗真菌藥物或糖皮質激素者。退出標準：試驗期間因妊娠、不良反應等不符合研究對象要求的受試者。試驗在開展前均已通過長治市上黨區中醫院倫理委員會評審，同時所有受試者在充分了解整個試驗過程及潛在的風險后，自愿簽署知情同意書。

2.2.2 測試方法

選取符合測試條件受試者30名，按個人洗發水使用習慣連續使用二硫化硒洗發水持續28 d。在使用前、14 d、28 d使用頭皮分析儀器觀察變化情況。受試者在測試周期完成后對頭屑、頭癢的癥狀進行使用前后的對比，依照自身情況對二硫化硒洗發水進行評分。

2.2.3 評估方法

判斷標準見表2。

表2 判斷標準

3 結果

3.1 樣品體外糠秕馬拉色菌抑菌結果

糠秕馬拉色菌抑菌結果見表3。

表3 糠秕馬拉色菌抑菌結果

由表3可看出，被檢樣品三次重復試驗中，陰性對照均無抑菌環產生，被檢樣品抑菌環直徑均大于7 mm，判為有抑菌效果，表明檢測樣品具有去屑功效。

3.2 樣品體外白念珠菌抑菌結果

白念珠菌抑菌結果見表4。

表4 白念珠菌抑菌結果

由表4可看出，被檢樣品三次重復試驗中，陰性對照均無抑菌環產生，被檢樣品抑菌環直徑均大于7 mm，判為有抑菌效果，表明檢測樣品具有去屑功效。

3.3 圖像分析

在使用前、使用后14 d、28 d分別使用頭皮影像分析儀觀察頭屑的變化情況（表5）。

表5 其中4位受試者頭屑頭皮影像分析儀的圖像分析

從表5可看出，通過頭皮影像分析儀觀察有改善的受試者頭皮隨著使用時間的增加，受試者頭屑減少。

3.4 去屑止癢效果評價

采用人體試用評價，并對使用樣品28 d后的試用情況進行回訪比較，評價結果見表6。

表6 樣品去屑止癢效果評價

由表6可以看出，二硫化硒洗發水較市場去屑洗發水對頭屑和頭癢均有更顯著的效果，使用二硫化硒洗發水28 d后，高達93.3%的受試者感到頭屑癥狀明顯減輕或消失，高達90%的受試者認為樣品止癢效果突出。

4 討論

本研究采用與陰性對照相比，受檢樣品濃度在50%時，對白念珠菌和糠秕馬拉色菌的抑菌環直徑均大于7 mm，證明對兩種菌都有抑菌作用，說明該受檢樣品具有去屑效果。抑菌試驗方法為體外非生物系統模型，相對于機體而言，非生物系統沒有考慮機體的代謝和免疫等系統方面的影響，通過人體功效評價結果證明，使用二硫化硒洗發水的受試者連續使用28 d后，頭屑、頭癢現象有明顯改善，證明樣品具有去屑效果。