血清三葉因子3對潰瘍性結腸炎疾病活動性的預測價值*

王崇文 江西省九江市濂溪區人民醫院 332005

潰瘍性結腸炎(Ulcerativecolitis,UC)是一種慢性結腸炎,主要發生于結腸黏膜,病理多表現為潰瘍,據國內外流行病學調查顯示[1],近年來炎癥性腸病呈上升趨勢,并以UC最為常見。有研究認為[2],UC主要與性格情志、飲食結構、吸煙史、生命早期感染史等因素有關,但目前對于該病的誘發機制尚未能夠完全明確。大部分UC患者臨床主要表現為腹瀉、便秘、便血等,如不能及時治療,尤其是活動期患者不能及時有效地診斷與治療,可進一步導致上皮細胞變性壞死、脫落,造成下消化道出血、潰瘍穿孔等。目前,促進黏膜愈合是治療UC的基本原則,通過黏膜愈合能夠減少疾病的復發與手術風險,而這就需要對患者黏膜愈合情況進行評估。當前結腸鏡檢查則是評估UC疾病和黏膜活動性的金標準,但這是一種有創操作,并且還具有耗時長、操作復雜、昂貴等特點,難以在UC疾病活動性評估中頻繁操作。故而尋找有效、快捷、經濟且能夠連續獲得的生物學標志物以判斷UC活動性具有重要意義。伴隨蛋白質組學研究的深入與日益成熟,血清三葉因子3(Trefoil factor family3,TFF3)作為一種分泌蛋白,屬于較新的腸黏膜保護因子,主要起到腸黏膜保護與修復作用,研究認為[3]其在結直腸癌診斷中能夠反映腸黏膜活動情況。而本次研究將TFF3作為UC活動性的預測指標,通過回顧性分析2022年1月—2023年1月收治的緩解期與活動期患者與健康人群TFF3水平情況,旨在為UC活動性評估選取合理且有效的生物學標志物。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性選取2022年1月—2023年1月醫院消化科收治的60例UC患者為對象,并以結腸鏡檢查為金標準,根據疾病分期將患者分為緩解期組(30例)和活動期組(30例),同時選取同一時期體檢中心的30例健康體檢者為健康對照組。緩解期組中,男18例、女12例;年齡31～65歲,平均年齡(44.12±6.71)歲。活動期組中,男17例、女13例;年齡30～64歲,平均年齡(43.87±6.85)歲。對照組中,男15例、女15例;年齡28～67歲,平均年齡(45.15±6.93)歲。三組研究對象的性別、年齡分布經校正Pearson χ2或單因素方差分析,差異無統計學意義(P>0.05)。在對資料進行回顧性選取與研究過程中,均嚴格遵循《赫爾辛基宣言》要求。

1.2 納入與排除標準 (1)納入標準：①所有研究對象均接受TFF3水平檢測;②緩解期組、活動期組患者均行結腸鏡檢查,并符合《潰瘍性結腸炎診療指南》[4]中對UC的診斷標準;③對需要進行的檢查或檢驗均知情并自愿同意。(2)排除標準：①合并惡性腫瘤、血液系統疾病或其他感染性疾病;②合并克羅恩病;③因重癥感染造成的便血或嗜酸性胃腸炎導致腹痛、白蛋白降低;④資料不完整。

1.3 方法 所有研究對象均抽取空腹狀態下的肘靜脈血5mL,常溫下靜置30min后,采用貝克曼庫爾特公司生產的Avanti JXN-30型離心機,以3 000r/min進行離心分離15min,獲得血清樣本后將之保存于-40℃冰箱中待檢。隨后,采用酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)對研究對象血清TFF3水平進行檢測,采用上海篤瑪生物科技有限公司提供的人TFF3 ELISA試劑盒,嚴格按照試劑盒說明書進行操作,收集所有研究對象TFF3檢測結果。在完成TFF3檢測后,對UC患者行結腸鏡檢查,根據檢查結果鑒別緩解期和活動期患者;同時對UC活動期患者進行內鏡分級(Baron)。

1.4 觀察指標 以結腸鏡檢查為“金標準”以鑒別緩解期、活動期UC患者,收集并對比UC患者與健康對照組三組研究對象TFF3水平,評估血清TFF3在UC疾病活動性中的預測效果。同時對比活動期患者不同Baron分級血清TFF3水平,并分析兩者相關性。Baron分級標準參考相關文獻[5]：內鏡下表現為血管紋理清晰、無自發性或接觸性出血,為Ⅰ級;內鏡下表現為黏膜粗糙、不正常但無出血情況,為Ⅱ級;內鏡下表現為黏膜接觸性出血,為Ⅲ級;內鏡下表現為黏膜自發性或接觸性出血嚴重,為Ⅳ級;內鏡下表現為自發性出現且伴有明顯的潰瘍形成,為Ⅴ級。

2 結果

2.1 三組血清TFF3水平對比 經檢測,對照組、緩解期組、活動期組TFF3水平[(1.62±0.65)ng/mL、(1.97±0.71)ng/mL、(5.68±1.36)ng/mL]有統計學差異(F=136.744,P<0.001),其中活動期組患者TFF3水平高于緩解期組、對照組(P<0.05),緩解期組與對照組TFF3水平相當(P>0.05)。

2.2 血清TFF3在UC疾病活動性中的預測效果 根據TFF3水平繪制ROC曲線圖(見圖1),ROC曲線顯示,TFF3在預測UC疾病活動性中具有較高的特異度、敏感度,曲線下降面積(AUC)為0.958。

圖1 TFF3對UC疾病活動性預測的ROC曲線

2.3 活動期組患者Baron分級及TFF3水平對比 30例活動期UC患者Baron分級中,Ⅲ級12例,TFF3水平(2.79±0.74);Ⅳ級9例,TFF3水平(4.86±1.25);Ⅴ級9例,TFF3水平(6.38±1.39);不同Baron分級TFF3水平對比,差異有統計學意義(F=22.023,P<0.001)。

2.4 Baron分級與TFF3水平的相關性分析 經Pearson相關性分析顯示,Baron分級與TFF3水平呈正相關性(r=0.398,P=0.009)。

3 討論

UC具有慢性、反復性發作特點,病因及發病機制尚未完全明確,根據疾病分期,可分為活動期和緩解期,臨床對于UC的治療,需要根據疾病分期采取相應的治療方案才能達到理想的治療效果。既往觀念對于UC的治療,常以臨床癥狀消失、實驗室檢驗結果正常為目標,但在近年來的研究中發現[6],只有臨床黏膜緩解、黏膜愈合才達到真正的緩解,部分患者臨床疾病活動指數雖然提示緩解,但經結腸鏡復查發現,黏膜仍未愈合或緩解,這類黏膜未達到愈合患者,伴隨病情發展復發風險較高,且不少還伴有手術風險。因此,有效預測UC的疾病活動性,準確鑒別活動期和緩解期患者,對指導臨床治療尤為關鍵。

結腸內鏡檢查是目前診斷和評估炎癥性腸病的“金標準”,在結腸內鏡下能夠對患者腸黏膜變化情況進行觀察,并通過鉗取組織完成病理診斷,從而實現對黏膜愈合程度的評估,以此準確反映疾病活動程度。但結腸內鏡作為一種入侵式評估方式,對患者帶來的創傷較大,并且對設備和操作人員具有較高的要求,如操作不當容易出現腸道穿孔等并發癥,存在一定的風險。除此之外,UC的反復發作性決定了臨床需要對患者進行反復檢查以更準確地評估疾病進展,結腸內鏡反復操作的創傷性與經濟負擔在很大程度上限制了其在UC疾病活動性評估中的應用。因此,尋找方便、快捷、經濟且可反復操作的非侵入性評估方式,對UC的治療尤為關鍵。在近年來的研究中,不少研究[7-8]采用了非侵入性分子標志物對潰瘍性結腸炎內鏡活動度或疾病程度進行評估,如糞鈣衛蛋白、血清炎性標志物、低免疫球蛋白G等,且均具有一定的預測價值。但在Nakov R等學者[9]研究發現,血清TFF3水平在UC活動期鑒別中具有較高的診斷效能,對預測UC疾病活動性的價值較高。本次研究就通過回顧性分析“金標準”診斷后的緩解期和活動期UC患者以及健康人群的血清TFF3水平表達情況,以此進一步分析血清TFF3水平在UC疾病活動性預測中應用價值。經本次研究結果顯示,活動期UC患者血清TFF3水平明顯高于緩解期UC患者與健康對照組;通過繪制ROC曲線發現,AUC達到0.958,說明血清TFF3水平在活動期UC患者中呈高表達狀態,對預測UC疾病活動性效能較好。這是因為TFF3是由胃腸道黏液細胞分泌的一種小分子肽,其能夠與黏液糖蛋白結合起到保護腸道黏膜的作用;同時TFF3還具有驅動上皮細胞遷移的作用,從而發揮快速修復損傷黏膜、保護黏膜完整性的效果[10]。因此TFF3能夠反映腸道黏膜愈合情況,但UC患者處于活動期時,有黏膜損傷、潰瘍情況,黏膜屏障被破壞后,機體需要對黏膜進行快速修復以保護黏膜組織,使之能夠抵御有害物質損傷。而黏膜早期修復關鍵就是細胞遷移,因此,當黏膜損傷時,TFF3大量分泌以驅動上皮細胞遷移到損傷區周邊,重建上皮的完整和黏膜屏障;同時,TFF3通過大量分泌與黏液糖蛋白形成相互作用,繼而形成彈性的黏液凝膠層,阻止蛋白酶及有害物質對黏膜的損傷,達到增強黏膜屏障的防御功能的作用[11]。當黏膜逐漸愈合,也就是UC達到緩解時,黏膜修復作用減弱,TFF3減少分泌。為進一步驗證血清TFF3對UC疾病活動性預測的價值,本次研究對活動期UC患者進行Baron分級,并對兩者進行相關性分析,結果顯示,在不同Baron分級UC患者中,Baron分級越高,患者血清TFF3水平越高,且Baron分級與TFF3水平呈正相關性,該結果說明血清TFF3水平隨著UC患者黏膜損傷越嚴重,血清中的表達越高。這主要是因為,當黏膜損傷越嚴重時,機體需要發揮的黏膜修復作用越強,從而進一步刺激TFF3的表達。但目前針對血清TFF3水平與UC疾病活動性預測的相關研究較少,并且因研究條件有限,研究樣本量較少,對于本次研究結果與結論仍需進一步深入探究,本次研究僅供參考。

綜上所述,血清TFF3在UC活動期中呈高表達,在預測UC疾病活動性中具有較好的效能,同時在活動期UC患者中,伴隨著血清TFF3水平的升高,提示病情程度越嚴重,通過觀察血清TFF3水平可有助于指導臨床治療UC患者。