豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫試驗

仉 弦

（山東省新泰市畜牧獸醫事業發展服務中心，山東泰安 271200）

豬偽狂犬病是一種由偽狂犬病病毒引起的傳染病，它不僅會影響家畜、野生動物和伴侶動物，還會危及試驗動物的健康。該病的臨床表現主要包括發熱、腦脊髓炎和生產母豬的嚴重繁殖障礙。這種病毒造成的經濟損失僅次于口蹄疫和豬瘟。雖然豬偽狂犬病在我國的豬群發生相對較早，但是對這種疾病的了解仍然不足。由于缺乏應有的警惕和恰當的防制對策，這種病流行猖撅，危害日益嚴重。為了預防豬偽狂犬病，需要采取一系列的預防措施。一方面農民和飼養員需要加強對豬偽狂犬病的了解，提高對疫情的警惕性。另一方面要加強豬群的管理和衛生，減少病毒的傳播。此外，還應該加強疫苗的研發和使用，提高豬的免疫力，降低疫情的發生率。

1 試驗材料與方法

1.1 試驗材料

豬偽狂犬病毒ELISA 抗體檢測試劑盒購自武漢某公司。試驗豬來自于山東省泰安市新泰市某規模化生豬養殖場。試驗時間為2020 年1 月至2021 年2 月，共選擇了250 頭繁殖母豬和200 頭種公豬以及1000 頭仔豬。豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗購自浙江某公司。

1.2 試驗方法

將250 頭繁殖母豬和200 頭種公豬以及1000頭仔豬按照隨機分組原則分為5 組，每組各繁殖母豬50 頭、種公豬50 頭和仔豬200 頭。

1.3 血液采集

在免疫接種14d 后隨機從試驗各組豬群前腔靜脈或者耳靜脈采集血樣10 份，將采集到的血液樣本放入無菌試管中，3000r/min 離心10min將血清分離出來-20℃冷凍保存待測。

1.4 抗體檢測與判定方法

將凍存的血清樣本在室溫條件下解凍。試劑盒中所配的稀釋液和酶標板準備好。將稀釋液加入到每個酶標板孔中，再加入2μL 待檢測血清樣本。將酶標板封閉，搖晃15～30s，并在37℃孵育1h。酶標板孔內的液體倒掉并用洗滌緩沖液洗板，重復此步驟3 次。將稀釋液加到酶標板孔中，再加入10μL 酶標記抗體。將酶標板封閉，搖晃15～30s，并在37℃孵育1h。將酶標板孔內的液體倒掉并用洗滌緩沖液洗板，重復此步驟3次。加入底物溶液到每個酶標板孔中，并在37℃下孵育20min。每個酶標板孔中加入終止溶液，并振蕩混勻。使用酶標儀檢測每個孔的吸光值，記錄樣本的OD 值。S=樣品孔OD630nm值，N=陰性對照孔OD630nm值平均。若S/N≤0.6，樣品應判定為陽性，S/N＞0.7，樣品應該判定為陰性。0.6＜S/N≤0.7，樣品疑似陽性必須重新測試。

2 結果

2.1 各組豬偽狂犬病S/N 均值

由表1 可知，普通免疫、跟胎免疫、定時免疫組豬群在100 日齡之前豬偽狂犬病S/N 均值小于0.6，這說明3 個組的免疫效果良好，3 種免疫方法都可以用于今后的生豬免疫接種。100 日齡之后抗體呈現逐漸消退的態勢，需要加強疫苗免疫接種。種豬免疫組的豬偽狂犬病S/N 均值大于0.7，這說明母原抗體在40 日齡左右，逐漸消退為陰性，生豬在育肥養殖階段容易受到野毒株感染，所以在今后免疫程序制定過程中需要強化二次免疫。

表1 免疫接種程序

表1 試驗各個組別豬偽狂犬病S/N 均值

2.2 各組別豬群抗體合格率

由表2 可知，普通免疫、跟胎免疫、定時免疫組種豬的免疫合格率達到了100%，仔豬49 日齡前的抗體合格率也能夠達到100%，增長，但75 日齡之后，抗體水平呈現逐漸下降的態勢，120 日齡合格率趨近于0，這個階段有可能增加豬偽狂犬病毒野毒株感染的機會，建議在仔豬首次免疫接種之后，適當進行第2 次強化免疫接種。種豬免疫組28 日齡豬的抗體合格率在80%，42 日齡之后抗體合格率呈現急劇下降的態勢，基本沒有保護率，說明仔豬從母體當中獲得的母源抗體維持時間不長。

表2 各組別豬群抗體合格率

3 討論

3.1 豬偽狂犬病免疫接種效果分析

通過本次研究，通過免疫接種效果可以看出，本次所選擇的疫苗能夠產生良好的免疫保護效果，無論是跟胎免疫還是一年兩次免疫，或者每間隔4 個月進行免疫，均能夠取得良好的免疫接種效果，種豬的免疫抗體合格率達到100%，仔豬在49日齡前抗體合格率也能夠達到100%。75 日齡之后，仔豬的抗體呈現逐漸消失的態勢，120 日齡基本消失。在今后豬偽狂犬病疫苗免疫接種過程中，為了增強豬群的免疫能力，避免野毒株傳入，建議仔豬在首次免疫接種之后進行第2 次強化免疫接種，而種公豬和繁殖母豬在春秋兩季進行免疫接種之后，如果不給仔豬進行免疫，接種仔豬在35 日齡之后抗體水平逐漸下降，直到全部為陰性，不能夠抵抗野毒株的侵襲，因此該種方法不宜推廣應用。

3.2 豬偽狂犬病免疫接種低下的原因分析

3.2.1 種公豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

種公豬偽狂犬病免疫接種低下的原因包括了偽狂犬病疫苗的質量參差不齊，部分疫苗的免疫效果不理想，影響了接種效果。疫苗接種方法不當，如注射部位不準確、注射深度不夠、疫苗混合不勻等，也會導致免疫接種效果不佳。此外，免疫程序不合理，如接種時間過早或過晚、接種間隔過長或過短等，會影響免疫效果。同時，種公豬的健康狀況不佳，如患有疾病、營養不良等，會影響疫苗的免疫效果。選用質量可靠、免疫效果好的偽狂犬病疫苗，確保接種效果。確保疫苗接種部位準確、注射深度適宜，疫苗混合均勻，避免疫苗浪費和接種失敗。根據豬只的年齡、健康狀況和當地疫情等因素，制定合理的免疫程序，確保接種效果。保證種公豬的營養需求，加強疾病防治，提高豬只健康狀況，增強疫苗的免疫效果。

3.2.2 繁殖母豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

母豬偽狂犬病免疫接種低下可能有多種原因，疫苗的儲存、運輸和使用條件不當可能導致疫苗效力下降。對策是確保疫苗的正確儲存溫度和有效期，遵循疫苗使用說明書。母豬在孕期和哺乳期期間，特別是在懷孕早期，免疫應該得到特別關注。對策是制定適當的免疫計劃，確保母豬在適當的時間接種疫苗。同時，母豬的免疫狀態可能受到其他疾病、營養不良或應激等因素的影響，從而影響對偽狂犬病疫苗的免疫反應。對策是通過改善母豬的飼養環境、提供高質量的飼料和增加營養補給來提高母豬的免疫狀態。養殖員在接種過程中可能存在技術操作不當或未按照正確程序進行接種的情況。對策是提供充足的培訓和教育，確保養殖員正確掌握接種技術。

3.2.3 仔豬豬偽狂犬病免疫接種低下的原因與對策分析

豬偽狂犬病是一種由病毒引起的豬類傳染性疾病，它對豬的健康和生產造成了嚴重威脅。有些地區缺乏嚴格的免疫接種制度，導致仔豬免疫接種工作不夠規范、及時和全面。一些農民或養殖戶在接種過程中缺乏專業知識和正確操作，導致免疫效果低下。部分地區使用的疫苗可能存在質量問題，如疫苗保存不當、未按照要求使用新鮮疫苗等，影響疫苗的有效性。部分養殖戶考慮到經濟利益，為了降低成本而減少了免疫接種的頻次或劑量，從而導致免疫接種不足。為了解決上述問題應該制定相關政策法規，明確責任人和執法機構，加強對免疫接種制度的監管和落實。建立健全的免疫登記和檔案管理體系，確保仔豬免疫接種的全覆蓋和及時性。同時，政府和獸醫主管部門應加強對農民和相關養殖人員的接種技術培訓，提高其免疫接種的操作水平和技術嫻熟度。加大對獸藥企業和疫苗生產企業的監管力度，嚴格執行有關疫苗質量標準和規范，確保疫苗的質量安全。加強對疫苗存儲和運輸環節的監控，確保疫苗的有效性。

4 小結

豬偽狂犬病是一種十分危險的傳染病，對于農民和飼養員來說，應該時刻保持警惕，加強預防工作，以保障豬的健康和生產。選用豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗時，應選擇具有良好免疫效果和可靠口碑的疫苗。根據豬只的年齡、體重、健康狀況和當地疫情等因素，制定合理的免疫程序。確保疫苗接種部位準確，注射深度適宜，疫苗混合均勻，避免疫苗浪費和接種失敗。在疫苗運輸、儲存和使用過程中，要嚴格遵循相關規定，避免疫苗污染。在疫苗接種后，要密切觀察豬只的免疫反應，如出現異常反應，要及時處理。此外，豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接種是預防和控制豬偽狂犬病的有效手段。在實際操作過程中，要關注疫苗的選擇、免疫程序的制定、接種方法的規范、防止疫苗污染等方面，確保免疫接種效果。同時，加強豬舍環境衛生管理，提高豬只健康狀況，也是提高免疫接種效果的重要因素。綜合考慮多種因素，做好豬偽狂犬病病毒gE 基因缺失苗免疫接種工作，有助于保障豬群的健康和生產效益。