中藥復方健脾降脂顆粒的研制及成型工藝優化研究

杜 君，鄭曉美，尹 柱，文琦琦，楊浩瀾，葉 剛*

（1.四川農業大學動物醫學院，四川 成都 611130；2.四川省蘆山縣蘆陽街道辦事處，四川 蘆山 625600）

中醫認為，肥胖與“先天稟賦、過食肥甘、疏于勞作、七情過度、脾胃虛衰、痰飲水濕”等因素有關，可以大體歸納為以胃熱、痰濁等為主的實證與脾虛、氣虛、脾腎陽虛為主的虛證兩大證型［1-2］。治療上常采用補虛泄實的方法，主要運用健脾、益氣、補腎、祛濕、化痰等療法，旨在清除病理性的痰濁、水濕、淤血、膏脂，從而達到治療肥胖的效果。

健脾降脂顆粒主要參考相關文獻及專利，收集了具有降血脂功效且尚未有人使用過的單味中藥，針對脾虛腎虛肝郁、濕熱內停，以健脾補腎、疏肝解郁、清熱行濕、行氣化濕為主的治法［3］，自擬組方。前期動物實驗已證實該方具備顯著的減脂效果。該復方由沙棘籽、茵陳、薤白、厚樸、甘草五味藥材配伍而成，主治由脾胃虛弱、氣血不足、情緒不穩及肝郁脾虛等所致的肥胖癥。由于中藥湯劑的特點不適應現代獸醫臨床用藥，用中藥顆粒劑代替中藥湯劑正在成為必然。本試驗旨在探索出一種將健脾降脂中藥復方制備成顆粒劑的最佳生產工藝。

1 材料與方法

1.1 主要藥材及試劑 沙棘籽、茵陳、薤白、厚樸、甘草飲片均購自成都荷花池中藥材市場，經四川農業大學動物醫學院李麗霞副教授鑒定均為正品。乙醇試劑為分析純。

1.2 方法

1.2.1 提取工藝評價方法的建立 測定提取液中主要成分“總黃酮”的量，主要根據《中華人民共和國獸藥典》（2020版）各項下所示的含量測定方法進行測定。

1.2.2 提取工藝單因素試驗 按比例稱取沙棘籽、茵陳、薤白、厚樸、甘草一定量，經粉碎機粉碎得微粉。在保證其他條件不變的情況下，分別考察以下4 個因素對提取的影響，以總黃酮量的轉移率為考察指標，篩選出中藥復方的最佳提取工藝。

（1）最佳料液比的選擇：按上述方法，固定乙醇濃度75%，60 ℃，提取2 次，考察不同料液比（1∶20、1∶25、1∶30、1∶35）下總黃酮量的轉移率。

（2）最佳提取溫度的選擇：按上述方法，固定料液比（1∶20），乙醇濃度75%，提取2 次，考察不同溫度（40 ℃、50 ℃、60 ℃、70 ℃）下總黃酮量的轉移率。

（3）最佳提取次數的選擇：按上述方法，固定料液比（1∶20），乙醇濃度75%，60 ℃，考察不同提取次數（1、2、3、4次）下總黃酮量的轉移率。

（4）最佳溶劑濃度的選擇：按上述方法，固定料液比（1∶20），60 ℃，提取2 次，考察不同乙醇濃度（65%、75%、85%、95%）下總黃酮量的轉移率。

1.2.3 正交試驗測定 為優化處方的提取工藝，對料液比（A）、提取溫度（B）、提取次數（C）、提取溶劑濃度（D）4個因素進行優化試驗，摸索出參數優化的范圍［4-5］。采用4因素3水平的L9（34）正交試驗法，考察料液比、提取溫度、提取次數、乙醇濃度對提取效率的影響，以總黃酮量的轉移率為考察指標。

1.2.4 提取工藝驗證試驗 根據所得最佳提取條件，做3次平行試驗，考察提取效果。

1.2.5 顆粒劑成型工藝評價方法的建立

（1）成型率：準確稱量制備好的顆粒（M）后，依次放入10 目和80 目篩中過篩，對不能通過10目篩和能通過80目篩的顆粒稱重（m），計算符合要求的顆粒占總顆粒劑的比例：

（2）水溶性測定：準確稱量適量顆粒劑，將200 mL 70 ℃熱水倒入裝有顆粒劑的燒杯中，快速攪拌，記錄顆粒劑完全溶化的時間。

（3）吸濕性測定：將制好的顆粒劑干燥48 h，平鋪置于已恒溫的稱量瓶底部，準確稱量后，將其放在相對濕度約為75%的密閉干燥器內，每隔12 h稱重，按下式計算吸濕百分率：

（4）綜合評分：綜合評分/100%＝成型率×20%＋溶化率×35%＋吸濕率×45%

1.2.6 顆粒成型工藝探究 處方藥材按優化的提取條件提取后，濾過，合并濾液。因實驗室烘箱無法將稠膏烘干為干膏，因此將濾液減壓濃縮至相對密度為1.15～1.20 g/mL（60 ℃），制得稠膏［6］。

（1）輔料的選擇：根據相關文獻資料［7-8］，影響顆粒劑成型工藝的最主要因素是輔料的用量和潤濕劑的濃度。同時以王蘭等［9］關于顆粒劑抗濕性的研究為參考，將MCC 分別與甘露醇、乳糖、糊精、淀粉按1∶2 的比例兩兩混合作為制粒輔料，稠膏與輔料的比例為1∶3。加入輔料，干燥成塊，粉碎成細粉（50～60 目），用70%乙醇作粘合劑，以“手握成團、輕壓即散”為原則制粒，以顆粒性狀、成型性、水溶性、吸濕性作為參考指標。

（2）輔料比的選擇：按照《中華人民共和國獸藥典》2020版對顆粒劑的質量評價要求及查閱相關文獻，并依據1.2.6 項下（1）的試驗結果選出最優賦形劑后，分別按照1∶1.5、1∶2、1∶2.5、1∶3（藥物與輔料比）制粒，觀察制粒效果。以顆粒性狀、成型性、水溶性、吸濕性作為參考指標，選擇合適的輔料進行工藝制備。

（3）潤濕劑濃度的選擇：因中藥浸膏具有一定的黏性，故本方以乙醇作潤濕劑。為考察不同濃度的乙醇對成型性的影響，將藥物粉末與前述篩選出的輔料以1∶3 的比例混勻制粒，分別加入適量的50%、60%、70%、80%乙醇作為潤濕劑，濕法制粒，觀察制粒效果。以顆粒性狀、成型性、水溶性、吸濕性作為參考指標，選擇合適的輔料進行工藝制備。

1.2.7 顆粒劑成型工藝驗證 根據所得最佳制粒條件做3次平行試驗，觀察制粒效果，其參考指標見1.2.5。

2 結果與分析

2.1 中藥復方提取工藝

2.1.1 料液比考察 由圖1 可知，隨著提取溶劑的增加，復方總黃酮得率呈現增長趨勢。在料液比為1∶30 時，復方總黃酮得率達到最高值，隨后得率逐漸下降。這可能是因為在1∶30 的料液比條件下，黃酮的溶解達到了較高水平，之后再增加提取溶劑的使用量可能會削弱已溶出黃酮與未溶出黃酮的協同作用，反而對協同浸提產生不利影響，從而導致黃酮得率下降［10］。因此，選擇最佳料液比為1∶30。

圖1 料液比對復方總黃酮得率的影響

2.1.2 提取溫度考察 結果如圖2所示。

圖2 提取溫度對復方總黃酮得率的影響

由圖2 可知，復方總黃酮得率會隨著提取溫度的升高而增加，在提取溫度為80 ℃時得率最高。當提取溫度超過80 ℃后得率降低，這可能與高溫引起黃酮類物質變性有一定的關系；此外，提取溶劑乙醇在提取溫度過高時會因為過度揮發而引起得率降低。因此，選擇最優提取溫度為80 ℃。

2.1.3 提取劑濃度考察 結果如圖3所示。

圖3 提取劑濃度對復方總黃酮得率的影響

其他條件相同的時候，分別以不同濃度的乙醇溶液提取復方中藥，結果得出乙醇濃度為75%時提取效果更好。

2.1.4 提取次數考察 由圖4 可知，當提取3～4次時，復方總黃酮得率接近0，考慮工藝及成本，優化提取次數為2次。

圖4 提取次數對復方總黃酮得率的影響

2.2 黃酮提取正交試驗 從表1可見，各因素影響程度依次為D＞B＞C＞A，即提取次數最大，提取溫度最小；最優工藝為A2B1C3D3，即：料液比1∶30，乙醇濃度85%，提取溫度80 ℃，提取次數3 次。按這個優選提取工藝進行3次驗證試驗，結果（表2）發現，3 批驗證試驗與正交試驗優選結果基本吻合，表明正交試驗優選提取工藝合理、穩定可行。

表1 正交試驗結果分析

表2 優化工藝驗證 mg·g-1

2.3 顆粒制劑成型工藝

2.3.1 輔料 當輔料為甘露醇＋MCC時，顆粒成型性最好，吸濕作用最小。其他輔料條件均黏度大，顆粒成型性差，故輔料選擇甘露醇＋MCC 最佳。見表3。

表3 不同輔料對顆粒制劑的影響

2.3.2 輔料用量 當提取物浸膏與輔料比例為1∶2 時，顆粒成型性最好，吸濕性低。其他比例條件下，顆粒成型性雖不如1∶2，但1∶3時顆粒抗濕性最好。綜合考慮，選擇輔料用量最佳比為1∶3。見表4。

表4 不同輔料用量對顆粒制劑的影響

2.3.3 潤濕劑濃度 當潤濕劑為70%乙醇時，顆粒成型性較好，吸濕性低，故選定潤濕劑最佳濃度為70%乙醇。見表5。

表5 不同潤濕劑濃度對顆粒制劑的影響

2.3.4 工藝驗證 將藥物粉末與優選輔料（甘露醇∶MCC＝2∶1）以1∶3的比例混勻制粒，分別加入適量的70%乙醇作為潤濕劑，用濕法制粒。結果得出：所制備的顆粒成型性良好，吸濕性低，表明優選的顆粒制備工藝穩定可行。

3 結論

本試驗基于傳統中醫藥制劑經驗，采用新時代制劑工藝創新成果，結合復方中藥特殊性質，對自擬而成的健脾降脂中藥復方顆粒制劑的工藝進行了優化升級，經過單因素試驗和正交試驗，確定最佳提取工藝：乙醇濃度85%，料液比1∶30（g∶mL），80℃加熱回流提取2次，每次1 h，合并濾液。

由于各條件下制得顆粒的水溶性均極好，故本試驗僅考察了顆粒制劑的成型性及吸濕性。根據試驗結果，最終確定顆粒成型最佳工藝：提取物浸膏與輔料比為1∶3（浸膏∶甘露醇∶MCC＝1∶2∶1），用70%乙醇作為潤濕劑制粒。