兒童狼瘡性腎炎外周血IL-6、血沉、CD4+/CD8+水平變化及其預測價值*

楊米鳳 廖亞彬 蔣雪梅 崔晶晶 畢欣 趙波

(昆明市兒童醫院腎臟內科,云南 昆明 650200)

狼瘡性腎炎(Lupus nephritis,LN)作為系統性紅斑狼瘡(Systemic iupus erythematosus,SLE)累及腎臟形成的免疫復合性腎炎,是造成患兒終末期腎衰竭的重要疾病之一,同時也是SLE病死率高的主要原因[1-2]。LN病程進展較為迅速,且預后不良,現階段臨床尚未完全闡明其發病機制,認為遺傳、免疫、環境、感染及性激素等多種因素可能參與LN發生、發展[3-5]。因此,尋找評估、預測LN患兒病情及預后情況的臨床指標尤為關鍵。白細胞介素-6(IL-6)作為一種具有多重生物學活性的免疫炎性細胞因子,參與機體多重組織細胞生長、分化等[6],已有研究證實,其在SLE患兒中呈高水平表達[7]。血沉(ESR)是敏感度較高的炎癥指標,其水平升高提示機體出現炎癥[8],而炎癥反應貫穿狼瘡性腎炎發生、發展全過程[9]。研究表明,LN發病過程中,T淋巴細胞亞群也會發生改變[10],外周血CD4+/CD8+作為免疫性指標,可有效反映機體免疫損傷情況。基于此,本研究觀察LN患兒外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,探討其對患兒預后的預測價值,為臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2019年1月—2022年9月收治的120例LN患兒作為觀察組,納入標準:①均符合LN相關診斷標準[11-12],且經腎組織活檢證實。②首次診斷治療。③臨床資料詳細完整。④患兒及家屬知情并簽署知情同意書。排除標準:①原發性腎臟病或其他原因繼發性腎臟病。②伴有血液系統疾病或惡性腫瘤。③合并嚴重感染。④入院前4周內有免疫抑制劑、輸血或激素治療史。⑤伴有其他臟器功能障礙。⑥合并其他免疫相關性疾病。另選取同期體檢健康兒童120例作為對照組。觀察組依據SLE疾病活動度(Systemic iupus erythemato sus disease activity,SLEDAI)評分將其分為SLEDAI評分≥10分組(n=71)與SLEDAI評分<10分組(n=49);根據患兒治療后預后情況分為預后良好組(n=34)與預后不良組(n=86),觀察1年,以血肌酐較基線翻倍,估算腎小球濾過率下降50%及以上為預后不良,否則為預后良好。本研究經我院醫學倫理委員會審批。

1.2 方法 兩組均于空腹狀態下抽取5 mL肘靜脈血,以轉速3 500 r/min、半徑18.5 cm離心處理10 min,分離血清、血漿,貯存于-80 ℃環境下待檢;采用北京奇松生物科技有限公司提供酶聯免疫吸附試劑盒測定IL-6水平;采用上海科華試劑公司提供魏氏法試劑盒測定ESR水平;采用美國BD公司提供FACSCanto Ⅱ流式細胞儀測定CD4+、CD8+細胞,計算CD4+/CD8+比值。操作嚴格遵循儀器及試劑盒說明書。

1.3 觀察指標 ①比較兩組外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,分析外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+與SLEDAI評分的相關性。②比較不同預后患兒外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+,分析LN患兒預后影響因素,評價外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+對LN患兒預后的預測價值。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 觀察組男24例,女96例,年齡6～14歲,平均(10.57±2.14)歲;對照組男30例,女90例,年齡6～18歲,平均(13.01±2.55)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2 兩組外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比較 觀察組外周血IL-6、ESR高于對照組,CD4+/CD8+低于對照組(P<0.05),見表1。

表1 兩組外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比較

2.3 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+與SLEDAI評分的相關性分析 SLEDAI評分≥10分組LN患兒外周血IL-6、ESR高于SLEDAI評分<10分組,CD4+/CD8+低于SLEDAI評分<10分組(P<0.05)(表2);進一步Pearson相關系數模型分析,LN患兒外周血IL-6、ESR與SLEDAI評分呈正相關,CD4+/CD8+與SLEDAI評分呈負相關(P<0.05),見圖1。

圖1 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+與SLEDAI評分的相關性

表2 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+與SLEDAI評分的相關性

2.4 不同預后患兒外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比較 預后不良組外周血IL-6、ESR高于預后良好組,CD4+/CD8+低于預后良好組(P<0.05),見表3。

表3 不同預后患兒外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+比較

2.5 LN患兒預后的影響因素分析 以LN患兒預后為因變量(良好=0,不良=1),進行單因素、多因素分析,結果顯示,SLEDAI評分、IL-6、ESR、CD4+/CD8+均為LN患兒預后影響因素(P<0.05),見表4。

表4 LN患兒預后的影響因素分析

2.6 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+對LN患兒預后的預測價值 以LN患兒預后不良為陽性,良好為陰性,繪制ROC曲線分析可知,外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+預測LN患兒預后的AUC分別為0.777、0.751、0.788,聯合預測AUC為0.921,均P<0.001;進一步對各預測方案預測價值比較顯示,外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+聯合預測的AUC明顯較單一指標高(均P<0.05),見表5～6,圖2。

圖2 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+預測LN患兒預后的ROC曲線

表5 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+對LN患兒預后的預測價值

表6 外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+聯合與單一預測方案預測價值比較

3 討論

SLE作為一種可累及全身多個器官的自身免疫性疾病,是由機體免疫紊亂致使多種自身抗體分泌過量,形成免疫復合物沉積于器官及組織內,繼而引發器官及組織損害[13-15]。據調查顯示,70%左右SLE累及腎臟[16],且近年來,受多種因素影響,兒童LN發病率呈明顯增長趨勢,受到臨床高度關注。

有學者指出,淋巴細胞功能異常與LN發病密切相關,而細胞因子在其發病過程中發揮至關重要作用[17]。細胞因子是一類具有高度生物學活性的糖蛋白或可溶性蛋白,各細胞因子間相互調節、制約,形成網絡,共同參與機體免疫、炎癥反應,而腎臟是在免疫反應中最易受到損傷的器官之一。本研究觀察LN患兒外周血IL-6水平,發現相較于健康兒童,LN患兒IL-6水平明顯升高,且其水平與LN患者SLEDAI評分呈正相關關系,提示外周血IL-6水平升高參與LN發生、發展過程。IL-6作為一種多功能炎性細胞因子,由B、T淋巴細胞產生,并可促進B淋巴細胞活化、增殖、產生抗體,其在正常水平狀態時對人體有利,同時,IL-6作為原發性炎癥物質,過量表達可造成機體一系列損害,致使大量巨噬細胞及單核細胞進入患處引起炎癥反應[18-19]。因此,在LN發生發展過程中,IL-6水平顯著升高,致使炎癥反應加劇,進而嚴重損傷患兒腎臟,可能會影響患兒臨床預后。進一步研究顯示外周血IL-6水平升高為LN患兒預后不良的影響因素,故認為IL-6也可能作為該病預后預測的潛在指標之一。

ESR在自身免疫性疾病、腫瘤及各種感染時增快。既往研究指出,自身免疫性疾病發生時,免疫系統高度活化,致使機體產生大量免疫球蛋白及炎性介質,造成ESR明顯增快[20]。本研究中觀察組外周血ESR水平明顯高于對照組,充分證實上述觀點,且ESR水平與SLEDAI評分有關,充分說明LN作為一種慢性自身免疫性疾病,ESR水平變化與疾病活動度密切相關,可能參與該病病情進展。鄭小麗等[21]研究指出,輕中度活動期LN患兒經治療后,外周血ESR水平明顯下降;另有學者指出,中西醫結合治療緩解期LN,患兒ESR水平顯著下降[22],提示ESR水平變化可能與LN患兒臨床預后有關。基于此,本研究觀察不同預后患兒ESR水平,發現預后不良患兒ESR水平相對較高,且ESR水平升高為LN患兒預后影響因素,提示臨床可將ESR作為LN預后預測的生化指標之一。

LN作為一種與免疫損傷密切相關的疾病,主要表現為外周血CD4+、CD8+水平異常,致使T淋巴細胞失衡,免疫功能損傷進一步加重。本研究中觀察組CD4+/CD8+明顯低于對照組,且CD4+/CD8+與SLEDAI評分有關,充分說明CD4+/CD8+與LN患兒疾病活動度有關。有學者指出,SLE作為一種自身免疫性疾病,疾病引起的免疫異常可致使腎臟損傷,而LN的發生也可加重免疫功能失調,進而致使病情加劇、惡化[23-24]。本研究還顯示CD4+/CD8+水平與LN疾病活動度呈負相關關系,證實了上述觀點,說明CD4+/CD8+與LN病情程度有關。LN患兒細胞免疫功能隨病情加重而變化,CD4+作為T細胞免疫重要組成部分,其下降時,CD8+細胞活性明顯降低,進而引起其數量上的升高,因此,CD4+/CD8+參與LN病情發展,臨床可將其作為敏感的免疫學檢測指標,用于評價LN病情進展及轉歸。

本研究繪制ROC曲線,發現外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+預測LN患兒預后的AUC分別為0.777、0.751、0.788,均在0.7以上,提示IL-6、ESR、CD4+/CD8+均可作為LN預后的預測指標。進一步研究顯示外周血IL-6、ESR、CD4+/CD8+聯合預測的AUC大于0.9,且明顯較單一指標高,充分說明聯合預測具有良好的預測效能。本研究不足之處,樣本量有限,結果可能存在偏倚,且僅分析外周血各指標檢測意義,缺乏動物模型及細胞模型方面研究,存在一定局限性,有待后續大樣本量研究或動物模型及細胞模型證實。

4 結論

LN患兒外周血IL-6、ESR水平較高,CD4+/CD8+水平下降,且與SLEDAI評分及預后有關,臨床檢測其水平,可作為LN病情評估及預后預測的血液生化指標,為臨床工作提供參考依據。