發酵茶飼料對產蛋后期蛋雞生產性能和蛋品質的影響

葛瑩，李慶海，王歡歡，魏瑩暉，王彥蘆，劉航，張雷，范京輝

(杭州市農業科學研究院，浙江 杭州 310024)

茶源自植物茶樹(Camelliasinesis)的葉子，是世界范圍內最受歡迎的飲料之一[1]。作為茶葉生產和消費大國，我國2021年產茶量達300萬噸。據報道，茶葉不僅蛋白質含量高、氨基酸和微量元素豐富，還含有茶多酚、生物堿等多種活性物質，具有抗氧化、免疫調節、抗肥胖等作用，是一種具有開發前景的動物飼料資源[2-3]。但茶葉中的單寧能螯合飼料中的金屬元素和蛋白質，并且抑制胰α-淀粉酶活性，是一種味澀、適口性差的抗營養因子[4]。為了降解茶葉中的抗營養因子，微生物固態發酵技術成為當下研究的焦點。這些研究大多在茶渣的基礎上配伍其他輔料，以增添氮源、碳源，有助于微生物高效繁殖[5-6]。選用的微生物通常為乳酸菌類、芽胞桿菌類及真菌類3大類，且許多學者認為多菌種聯合效果較好。胡桂萍等[7]利用乳桿菌、枯草芽胞桿菌、酵母菌和米曲霉菌進行混合發酵，生產的茶飼料營養豐富且適口性高。Ding等[8]選用枯草芽胞桿菌、黑曲霉及釀酒酵母3種菌種發酵后，茶飼料營養成分均有所提高。

在蛋雞生產實踐中，長期產蛋積累的氧化應激會造成母雞激素缺乏，產蛋率、蛋品質加速下降，因此，有必要通過營養調控進行改善[9-11]。有學者發現在飼料中添加適量綠茶粉或茶多酚能改善蛋雞生產性能和蛋品質[12-13]。發酵茶飼料作為一種新型飼料原料，目前在育肥豬及肉羊研究中得到較多的報道[8，14]。在蛋雞上的研究仍相對較少，其營養數據和適宜添加量需補充和完善。本試驗擬將發酵茶飼料以5%、10%兩種濃度添加到日糧中并連續飼喂8周，探究其對產蛋后期蛋雞的生產性能和蛋品質的影響，以期為發酵茶飼料在蛋雞生產中的應用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗選用茶葉品種為西湖龍井，產自浙江杭州，由杭州市農科院提供。黑曲霉(ZD8)、釀酒酵母(CICC1520)、枯草芽胞桿菌(BS12)由浙江大學飼料科學研究所提供。參考Ding等[8]方法，將15%茶葉、70%豆粕、15%玉米作為發酵底物，按照2∶1∶2比例加入活菌數均為1×107CFU/g的黑曲霉、釀酒酵母、枯草芽胞桿菌，將活化好的菌種均勻噴灑到原料中，邊噴灑邊攪拌混勻，裝入帶有呼吸閥的發酵袋內，在溫度30 ℃、含水量55%的條件下厭氧發酵72 h，65 ℃烘干至恒重，制得發酵茶飼料。營養成分含量(以風干樣計)為水分11.75%，粗蛋白42.56%，粗脂肪2.55%，粗纖維10.95%，粗灰分7.36%，鈣0.62%，總磷0.47%。

1.2 試驗設計

選用55周齡、健康狀況良好、產蛋率相近的新楊黑羽蛋雞432只，由杭州畬洪禽業股份有限公司提供。將雞群隨機分為3組，每組3個重復，每個重復48只，其中，對照組飼喂基礎日糧，試驗組以5%、10%發酵茶飼料替代基礎日糧。參照GB/T 5916—2020《產蛋雞和肉雞配合飼料》推薦的蛋雞營養需要量配制粉狀配合飼料。各組日糧組成及營養成分見表1。預試期為1周，各組均飼喂基礎日糧且組間產蛋性能差異不顯著。正試期為8周。蛋雞自由采食和飲水，按照常規飼養流程進行免疫和消毒。

表1 日糧組成及營養成分(風干基礎)

1.3 生產性能測定

試驗期間，以重復為單位記錄每周的總產蛋數(含破損蛋)、總蛋重、采食量和死淘數，統計每周以及全程的產蛋率、平均蛋重、平均日采食量、料蛋比和死淘率。

1.4 雞蛋質量參數測定

分別收集正試期第2、4、6、8 周的雞蛋，每個重復10枚。使用電子天平稱取蛋重，用游標卡尺測量雞蛋橫徑、縱徑。分離蛋黃、蛋清、蛋殼(含蛋殼膜)。使用羅氏比色扇判斷蛋黃色澤。蛋清通過1 mm×1 mm標準檢驗篩濾出稀蛋白，依次稱取蛋黃重、稀蛋白重、蛋殼重。濃蛋白重(g)=蛋重-蛋殼重-蛋黃重-稀蛋白重；蛋黃比=蛋黃重/蛋重×100%；稀蛋白比=稀蛋白重/蛋重×100%；濃蛋白比=濃蛋白重/蛋重×100%；蛋殼比=蛋殼重/蛋重×100%；蛋形指數=縱徑/橫徑。

1.5 蛋黃膽固醇含量及抗氧化指標測定

試驗結束時，每個重復隨機選取3枚雞蛋，分離出蛋黃。根據總膽固醇(TC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)試劑盒說明書，蛋黃液加入9倍體積的無水乙醇抽提，4 000 r/min離心10 min，取上清液檢測TC、MDA含量；蛋黃液加入9倍體積的生理鹽水勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液檢測SOD、GSH-Px水平，利用Infinite-M200 Pro酶標儀(Tecan公司，瑞士)測定相關指標的吸光度。以上試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.6 數據統計與分析

采用Excel 2016對試驗數據進行整理。使用SPSS 22.0軟件對數據進行單因素方差分析(One-way ANOVA)和Tukey多重比較檢驗，結果以“平均值±標準差”表示。P<0.05表示組間差異顯著，P<0.01表示組間差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 發酵茶飼料對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

根據圖1所示，飼喂2周后，產蛋率表現為10%茶飼料組>5%茶飼料組>對照組；平均蛋重表現為對照組>5%茶飼料組>10%茶飼料組。飼喂3周后，料蛋比表現為對照組>10%茶飼料組>5%茶飼料組。由表2可知，相比于對照組，5%茶飼料組的產蛋率顯著升高且料蛋比顯著降低(P<0.05)，10%茶飼料組的產蛋率顯著升高但平均蛋重顯著降低(P<0.05)。平均日采食量及死淘率在3組間無顯著差異(P>0.05)。

圖1 試驗期間蛋雞每周生產性能變化趨勢

表2 發酵茶飼料對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

2.2 發酵茶飼料對產蛋后期雞蛋質量參數的影響

由圖2可知，整個試驗期間，3組的蛋黃比例、蛋殼比例、蛋形指數及蛋黃顏色均無顯著差異(P>0.05)。飼喂2、4周后，3組的濃、稀蛋白比例均無顯著差異。6周后10%茶飼料組的濃蛋白比例顯著低于對照組(P<0.05)。8周后，10%茶飼料組的濃蛋白比例顯著低于5%茶飼料組(P<0.05)，稀蛋白比例顯著高于其他兩組(P<0.05)。

*表示組間差異顯著(P<0.05)。

2.3 發酵茶飼料對產蛋后期蛋黃生化參數的影響

根據表3可知，飼喂8周后，相比于對照組，5%、10%茶飼料組蛋黃的TC含量顯著降低(P<0.05)，MDA含量顯著降低(P<0.05)，SOD含量顯著升高(P<0.05)，GSH-Px含量無顯著差異(P>0.05)。另外，這些參數在5%、10%茶飼料組之間無顯著差異(P>0.05)。

表3 發酵茶飼料對產蛋后期蛋黃生化參數的影響

3 討論

3.1 發酵茶飼料對產蛋后期蛋雞生產性能的影響

蛋雞產蛋后期的產蛋率快速下降，整體生產性能降低，同時蛋重逐漸增加[16-17]。丁小青等[18]發現使用4%生物發酵飼料代替豆粕能顯著提升320日齡仙居蛋雞產蛋率4.92%。吳慧敏等[19]在290日齡蛋雞飼糧中添加2%發酵茶渣能顯著提高產蛋率。已有研究報道飼喂200 mg/kg茶多酚可以提高蛋雞的產蛋率和飼料轉化率[20-21]。受原料、品種、環境等因素的影響，發酵茶飼料的實際效果略有不同。本試驗發現在產蛋后期蛋雞日糧中添加5%、10%發酵茶飼料8周后，產蛋率分別增多了2.54個百分點和3.67個百分點，且5%發酵茶飼料能使料蛋比顯著降低，因此，發酵茶飼料可以改善蛋雞生產性能。茶葉中具有茶多酚、生物堿和多肽等多種活性物質，其中多酚類物質占茶葉干重的18%～36%，是茶葉健康功效的主要活性物質[22]。兒茶素類占茶多酚總量的60%～80%是茶多酚的最主要成分[23]。研究表明茶多酚中的兒茶素進入機體后能夠調節腸道微生物菌群，從而促進營養物質吸收、提高飼料利用率，同時，類黃酮具有植物雌激素活性，能促進卵泡發育，提高產蛋率[24-25]。但是，高劑量茶多酚會造成蛋重降低[20，26]。本研究發現10%發酵茶飼料會造成蛋重顯著下降，這可能是因為茶多酚能夠抑制肉雞肝臟脂肪相關基因的表達，降低脂肪酸合成酶和乙酰-CoA羧化酶的活性[22]。同時有學者指出，兒茶素不易被消化吸收，經口服后在胃腸道中積累達到較高濃度，從而影響胃腸道膽固醇的吸收[27]。因此，腸道對于脂肪吸收的減少可能會導致蛋黃脂質形成的降低，進而使蛋重降低。因此，添加適宜劑量的發酵茶飼料更有利于提高蛋雞后期生產性能。

3.2 發酵茶飼料對雞蛋質量參數的影響

雞蛋質量是指雞蛋內外部特性，涉及眾多指標[28]。蛋清中的濃蛋白呈高黏度的膠狀結構，由卵粘蛋白分泌產生。研究表明濃、稀蛋白比例與蛋重、哈氏單位、蛋白高度呈正相關，是判定雞蛋新鮮度的可靠指標[29-30]。Ding等[31]研究認為茶多酚可以與蛋白質和多糖形成復合物，增加蛋白凝膠化，從而提高了蛋白高度和哈氏單位。Wang等[26]發現200 mg/kg茶多酚能夠提高64周齡白來航的蛋白高度和哈氏單位。Xia等[32]在20周齡仙居雞的日糧中添加1%綠茶粉，發現蛋白高度、哈氏單位增加。而Ariana等[33]發現0.5%茶多酚和1.5%綠茶粉對蛋品質無顯著影響。但本研究發現，飼喂10%發酵茶飼料會造成濃蛋白比例降低、稀蛋白比例顯著升高，即蛋清變稀、品質降低。可能由于茶葉中的咖啡因和茶多酚能夠增強機體能量代謝[22]，從而抑制濃蛋白合成，其作用機制還需要后續進一步深入研究。另外，本研究發現，飼喂發酵茶葉對蛋黃比例、蛋殼比例、蛋形指數、蛋黃顏色無顯著影響。前3個指標主要受遺傳因素影響，而蛋黃顏色與飼料營養關系密切[17]。有報道指出綠茶粉能夠顯著提高蛋黃顏色[13]。但本研究尚未觀察到發酵茶飼料對蛋黃顏色的影響，這是因為綠茶中葉綠素及其衍生物以及類胡蘿卜素經過發酵后發生降解反應[34]。

3.3 發酵茶飼料對蛋黃生化參數的影響

雞蛋營養豐富，但是蛋黃膽固醇含量(200～400 mg/枚)相對較高[35]。盡管當前關于雞蛋膽固醇增加人體健康風險的論述仍存在爭議，但是專家建議患有心血管疾病的人群應該控制蛋黃膽固醇的攝入量[36]。Kuhn等[37]證實茶多酚通過降低低密度脂蛋白受體使得人體血漿膽固醇降低。何柳青等[38]發現飼喂200、400 mg/kg茶多酚4周，使蛋黃膽固醇含量分別顯著降低16.5%、31.4%。Chen等[13]發現1%綠茶粉飼喂12周后，蛋黃膽固醇含量顯著下降13.9%。盧垚[39]研究發現飼喂300 mg/kg茶多酚4周后，蛋黃膽固醇含量下降18.06%。本研究觀察到飼喂5%和10%發酵茶飼料8周后的蛋黃膽固醇含量分別顯著下降13.37%、10.98%，與上述結果研究一致。有學者研究認為茶葉中的茶多酚能夠通過調控血漿中胰島素的水平和肝臟膽固醇代謝相關核受體和轉錄因子表達，促進蛋雞脂質分解代謝，抑制低密度脂蛋白膽固醇，減少卵細胞從血漿中對于膽固醇的獲取，最終降低蛋黃中的膽固醇含量[39]。

蛋黃富含多不飽和脂肪酸，特別是產蛋后期階段，更易受到自由基的攻擊，引起脂質過氧化反應，不利于雞蛋儲存保鮮[36，40]。茶多酚中兒茶素B環和C環上的酚羥基具有供氫體的活性，能夠在氧化過程中生成鄰醌類及聯苯酚醌，使其具有強大的抗氧化能力[41]。本研究發現發酵茶飼料能顯著降低蛋黃中MDA含量，提高SOD含量。這一結果與之前使用綠茶粉或茶多酚能減少禽蛋中脂質過氧化的研究結果相同[40，42]。動物機體內的抗氧化酶之間相互影響和相互作用，形成機體對抗自由基的第一道防線。在蛋雞日糧中添加茶多酚能夠提高血漿中GSH-Px含量，降低了MDA含量[39]，而兒茶素分子量小有利于吸收，經血液轉移至卵巢后提升蛋黃的抗氧化能力。

總之，本試驗研究認為給予產蛋后期母雞發酵茶飼料可以降低蛋黃膽固醇含量和脂質過氧化反應，使其表現出更好的營養價值和儲存特性，進一步提升蛋品質等級。

4 結論

日糧中添加5%發酵茶飼料能提高55周齡新楊黑羽蛋雞的生產性能和蛋品質，表現在產蛋率提高、料蛋比降低、蛋黃膽固醇含量和脂質過氧化水平降低；添加10%發酵茶飼料在一定程度上能提高生產性能，但同時會造成蛋重和蛋品質下降。因此，在蛋雞生產過程中，日糧中添加5%發酵茶飼料為宜。