類風濕性關節炎患者血清ASC NLRP3水平及意義

姜永森, 趙春楠, 張澤智, 劉艷伶, 丁佩劍, 耿學麗

(承德醫學院附屬醫院檢驗科, 河北 承德 067000)

類風濕性關節炎(RA)是一種慢性炎癥性關節疾病,可導致軟骨和骨損傷以及殘疾。RA的全球平均患病率范圍為0.5%～1.0%,好發于60歲以上的老年人[1]。RA的病因尚不清楚,可能與多種因素有關,早期診斷是獲得最佳治療成功的關鍵。目前認為其發病機制與體內免疫細胞和炎性小體激活有關。ASC參與炎癥小體的激活,其中炎性小體NLRP3的激活受到ASC調控。有研究指出,血清NLRP3參與了RA的發生發展,同時ASC也參與了RA的發生發展,兩者聯合研究較少[2]。故而本研究選取88例RA患者作為研究對象,深入探討RA與ASC、NLRP3的相關性。結果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2021年11月至2023年6月于承德醫學院附屬醫院收治的88例RA患者、男74例,女14例,年齡(53.88±12.33)歲,范圍18～ 80 歲,體質指數(25.04±2.76) kg/m2;88例健康體檢者,男73例,女15例,年齡(54.34±11.43)歲,范圍18～ 80歲;體質指數(25.64±3.70)kg/m2,范圍18.05～30.64kg/m2。納入排除標準:納入標準:①RA患者符合美國風濕學會《類風濕性關節炎的診斷標準》[3];②年齡≥18歲;③無急性疾病。排除標準:①患有其他關節炎或關節疾病;②肝腎功能損害或代謝性疾病(如甲狀腺、甲狀旁腺疾病影響骨代謝);③嚴重心腦血管疾病;④腫瘤及骨轉移;⑤服用抗癌藥物或其他影響骨代謝的藥物;⑥懷孕或哺乳期婦女;⑦其他自身免疫性疾病。兩組一般資料比較,差異無統計學意義。

1.2儀器、試劑和方法:血清ASC、NLRP3水平檢測:采集患者晨起空腹4mL靜脈血,室溫下于無抗凝劑的真空管中靜置30min自然凝血,3500r/min離心15min,取三份上清500μL放入EP管中,置于-80℃超低溫冰箱冷凍保存。并在收集充足病例數后解凍后統一采用武漢紀寧生物ELISA試劑盒(編號:EH1511;JN17614)測量表達水平。RA患者的關節腫脹和壓痛由兩名經驗豐富的風濕免疫學專家記錄。采用DAS28方法評估RA患者的疾病活動度,計算DAS28評分。

2 結 果

2.1兩組患者血清ASC、NLRP3水平比較:RA組血清ASC、NLRP3水平高于健康對照組。差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組患者血清ASC NLRP3水平比較

2.2兩組患者一般資料比較:兩組性別、年齡,體質指數、吸煙史、飲酒史等資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 兩組患者一般資料比較

2.3RA患者血清ASC、NLRP3水平與DAS28評分的相關性:Spearman相關性分析:顯示,RA患者血清ASC、NLRP3水平與DAS28評分呈正相關(rs=0.714;rs=0.254,P<0.05)。見圖1。

圖1 RA患者血清ASC、NLRP3水平與DAS28評分的線性散點圖

2.4二元Logistic回歸分析:以是否為RA患者為因變量(1=是,0=否),以“ASC、NLRP3、年齡、性別”為協變量,納入Logistic回歸中分析,結果顯示ASC、NLRP3水平升高是影響RA患者的獨立危險因素(P<0.05)。年齡、性別不是影響RA患者的獨立危險因素。見表3。

表3 RA患者Logistic回歸分析

3 討 論

類風濕性關節炎(RA)是一種全身性多關節慢性自身免疫疾病,易導致關節和關節周圍結構損傷以及全身炎癥,主要導致手足畸形[4]。RA病情呈慢性進行發展,關節畸形使患者活動受限,嚴重影響患者的生活質量。雖然風濕藥物(DMARD)在類風濕性關節炎的治療方面有著緩解作用[5],但目前臨床對于RA發病機制尚不能完全闡明。其中免疫細胞和炎性小體在RA的發生發展起至關重要的作用。因此,發現新的診斷標志物對治療RA患者和闡明RA發病機制具有非常重要的意義。

含有半胱天冬酶募集結構域(ASC)的凋亡相關斑點樣蛋白由PYCARD基因編碼構成,是一種22kDa小分子,ASC斑點存在于慢性炎癥性疾病患者的體循環,被認為是炎癥的相關血液生物標志物,其主要參與炎癥、細胞焦亡和細胞凋亡[6]。本研究結果顯示,血清ASC水平升高是RA的獨立危險因素,在RA中ASC可能參與炎性小體的活化。

NLRP3炎性小體是一種多聚蛋白復合物是NLR家族成員之一,在NLR家族復合物中,NLRP3炎癥小體是迄今為止研究最多的炎癥小體。NLRP3炎性體是調節宿主免疫防御以抵抗感染性微生物和細胞損傷的關鍵因素,NLRP3炎癥小體在類風濕性關節炎(RA)疾病的發病機制中發揮著重要作用[7],本研究結果顯示,血清NLRP3水平升高是RA的獨立危險因素。

ASC與NLRP3存在復雜關系,ASC的聚合過程中需要吡啶N端子同源域PYD,NLRP3通過PYD結構域結合銜接蛋白ASC,ASC泛素化,能促進炎癥小體NLRP3激活,還能介導NLRP3的信號傳遞,并有助于誘導巨噬細胞增生[8-9]。

本研究通過相關性分析發現,ASC、NLRP3與DAS28評分呈正相關,提示ASC、NLRP3可能共同參與RA的發生發展,ASC在RA的進展中激活了NLRP3,促進了RA的發病。Logistic回歸分析結果顯示ASC、NLRP3水平升高是影響RA患者的獨立危險因素。年齡、性別不是影響RA患者的獨立危險因素,提示血清ASC、NLRP3水平兩項指標對RA患者有潛在的診斷價值。

綜上所述,RA患者血清ASC、NLRP3水平明顯升高,二者可能共同參與RA發生發展,可能成為RA診斷的新標志物,其對RA及其疾病活動度的診斷價值有待進一步評價。