火針聯合刺絡放血治療帶狀皰疹的療效及對外周血Thl7 Treg細胞比例及其相關細胞因子的影響

謝蘭清, 王建鋒, 張虹亞, 秦曉明

(1.皖南醫學院第二附屬醫院皮膚性病科, 安徽 蕪湖 241000 2.安徽中醫藥大學第一附屬醫院, 安徽 合肥 230022)

帶狀皰疹(Herpes zoster,HZ)是由水痘-帶狀皰疹病毒(VZV)引起的感染性皮膚病,約有20%～40%患者會遺留神經痛[1-2]。西醫多采用抗病毒藥物治療,但長期抗病毒治療存在不良反應、耐藥性等,導致治療效果降低[3]。中醫學認為HZ屬“纏腰火丹”、“蜘蛛瘡”、“蛇串瘡”等范疇,本病多因正氣虛弱、濕熱邪毒、脾失健運而致病[4]。火針以熱引熱,具有引氣發散之功,其結合刺絡放血療法,可促使火熱濕毒邪得以外泄,且具有祛腐生新、生肌斂瘡作用,且經臨床驗證療效肯定,但作用機制尚未明確[5]。輔助性T細胞17(Thl7)、調節性T細胞(Treg)與HZ發病密切相關。目前針灸治療在體液及細胞免疫功能方面的報道相對較少,關于火針聯合刺絡放血治療HZ對Thl7、Treg細胞因子影響的研究尚未開展,因此本研究通過分析火針聯合刺絡放血治療HZ前后外周血Th17、Treg細胞及相關細胞因子變化,分析Thl7、Treg細胞及相關細胞因子在HZ發病中的作用,探討火針聯合刺絡放血治療HZ的可能作用機制,為針灸特色治療HZ提供科學新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料:選取2019年1月至2020年12月本院收治的HZ患者80例為研究對象,采用隨機單、雙數分配原則將患者分為對照組40例、研究組40例。兩組一般資料均衡可比(P>0.05),見表1。本研究經本院倫理委員會審核批準(20190023)。

表1 兩組患者的一般資料比較

1.2納入與排除標準:納入標準:符合HZ西醫診斷標準[6];符合HZ中醫診斷標準[7]:主癥表現為皮損鮮紅、灼熱疼痛、泡壁繃緊,次癥表現為口苦舌干、胸脅脹痛、大便干結、小便短赤、舌紅苔黃膩;未接受抗病毒治療者;初診者;精神認知正常且可配合治療者;簽署知情同意書。排除標準:病情危重且難以確切評價治療效果、安全性;近1個月內接受免疫抑制劑治療者;伴有頓挫型帶狀皰疹等特殊類型帶狀皰疹者;合并代謝系統障礙者;其他原因所致神經痛;需長期服用免疫調節劑、糖皮質激素者。

1.3方 法

1.3.1治療方法:對照組給予伐昔洛韋(山東新時代藥業有限公司,國藥準字H20073866,規格:0.3g)、甲鈷胺(江西青峰藥業有限公司,國藥準字H20051440,規格:0.5mg)、加巴噴丁(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司,國藥準字H20030662,規格:0.1g)治療,口服伐昔洛韋,0.3g/次,2次/d;口服甲鈷胺,0.5mg/次,3次/d;口服加巴噴丁,0.1g/次,3次/d,連續治療7d。研究組在對照組基礎上予以火針、刺絡放血治療,取適宜體位,常規消毒后涂抹萬花油,手持火針(4.0cm×0.8mm)置于酒精燈外焰處,待針體下1/3處燒至發白后刺入水皰:①依據皮疹出現順序分別針刺,針刺皮損阿是穴,針刺深度依據為水皰大小,以刺破水皰達到基底層為度,采用粗火針點刺較大水皰,針刺后使用無菌棉擠干皰液,火針散刺疼痛區;②針刺夾脊穴,使用火針淺刺3下(深度約為0.1mm)后涂抹萬花油,用干棉球按壓淺刺處30s;③針刺后選用消毒火罐進行負壓吸拔、放血,以火罐可罩住皰疹簇為度,留罐時間≤5min,放血標準為皮疹變暗、變黑,起罐后若出現血皰需再次點刺后消毒,1次/d,連續治療7d。

1.3.2采集血液樣本:分別于治療前、治療3d、7d后采集兩組研究對象空腹靜脈血9mL,分為3部分,一部分置于肝素抗凝試管內進行外周血Thl7、Treg細胞比例檢測;一部分室溫靜置30min后行常規離心后取血清,用于檢測血清白細胞介素-6(IL-6)、白細胞介素-17(IL-17)、轉化生長因子β1(TGF-β1)水平;一部分經常規離心后留取血清,用于檢測血清前列腺素E2(PGE2)、5-羥色胺(5-HT)水平。

1.4觀察指標

1.4.1臨床療效:治療7d后比較兩組臨床療效:以療效指數為依據,療效指數=治療前后視覺模擬量表(VAS)分值差/治療前VAS評分×100%,痊愈:臨床癥狀完全消失,療效指數≥95%;顯效:臨床癥狀明顯改善,75%≤療效指數<95%;有效:臨床癥狀有所好轉,30%≤療效指數<75%;無效:不符合上述標準,總有效率為痊愈、顯效、有效比例之和。

1.4.2比較兩組康復進程:治療結束后比較兩組止皰、結痂、脫痂時間,其中皰疹停止增長時間、結痂面積≥50%皮損時間、痂皮全部脫落時間分別與開始起皰時間的差值,分別記為止皰時間、結痂時間、脫痂時間。

1.4.3HZ癥狀積分:治療前、治療3d、7d后比較兩組HZ癥狀積分,包括紅斑、水皰、皮損疼痛,每項癥狀分值為0～4分,0、1、2、3、4分別表示無、輕微、中度、重度、非常嚴重。

1.4.4外周血Thl7、Treg細胞比例及其相關細胞因子:治療前、治療3d、7d后比較兩組外周血Thl7、Treg細胞比例及其相關細胞因子(IL-6、IL-17、TGF-βl)水平,①Thl7、Treg細胞檢測:分離單核細胞后采用磷酸緩沖液重懸細胞,應用CytoFLEX流式細胞儀(美國貝克曼庫爾特公司)檢測Thl7、Treg細胞比例;②采用ELISA法檢測血清IL-6、IL-17、TGF-β1水平,試劑盒購自武漢伊萊瑞特生物科技股份公司。

1.4.5神經疼痛因子:治療前、治療3d、7d后比較兩組血清神經疼痛因子[前列腺素E2(PGE2)、5-羥色胺(5-HT)]水平,采用ELISA法檢測血清PGE2、5-HT水平,試劑盒購自南京建成生物工程研究所,檢測儀器為SpectraMax i3X多功能酶標儀(上海美谷分子儀器有限公司)。

1.4.6疼痛程度(VAS評分):治療前、治療3d、7d后比較兩組VAS評分:依據自我感覺標出自己疼痛程度,總分為10分,分值與疼痛程度成正比。

2 結 果

2.1治療效果:研究組治療總有效率高于對照組(P<0.05),見表2。

表2 兩組患者的治療效果比較n(%)

2.2兩組康復進程比較:研究組止皰時間、結痂時間、脫痂時間短于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組患者的康復進程比較

2.3兩組HZ癥狀積分比較:重復測量方差分析:紅斑、水皰、皮損疼痛積分組間-時間交互作用比較,差異有統計學意義(P<0.05);組間比較,研究組治療3d、7d后紅斑、水皰、皮損疼痛積分低于對照組(P<0.05);組內比較,兩組治療前、治療3d、7d后紅斑、水皰、皮損疼痛積分呈逐漸降低趨勢(P<0.05)。見表4。典型病例治療前后圖片見圖1、2。

圖1 典型病例1治療前后圖片

圖2 典型病例2治療前后圖片

表4 兩組患者治療前后HZ癥狀積分比較分)

2.4Thl7、Treg細胞比例及其相關細胞因子:重復測量方差分析:外周血Thl7、Treg細胞比例、血清IL-6、IL-17、TGF-β1水平組間-時間交互作用比較,差異有統計學意義(P<0.05);組間比較,研究組治療3d、7d后外周血Thl7、Treg細胞比例、血清IL-6、IL-17水平低于對照組,TGF-β1水平高于對照組(P<0.05);組內比較,兩組治療前、治療3d、7d后外周血Thl7、Treg細胞比例、血清IL-6、IL-17水平呈逐漸降低趨勢,TGF-βl水平呈逐漸升高趨勢(P<0.05)。見表5。

表5 兩組患者治療前后Thl7 Treg細胞比例及其相關細胞因子比較

2.5神經疼痛因子:重復測量方差分析:血清PGE2、5-HT水平組間-時間交互作用比較,差異有統計學意義(P<0.05);組間比較,研究組治療3d、7d后血清PGE2、5-HT水平低于對照組(P<0.05);組內比較,兩組治療前、治療3d、7d后血清PGE2、5-HT水平呈逐漸降低趨勢(P<0.05)。見表6。

表6 兩組患者治療前后神經疼痛因子比較

2.6疼痛程度:治療3d、7d后兩組VAS評分低于治療前,且研究組低于對照組(P<0.05)。見表7。

表7 兩組患者治療前后疼痛程度比較分)

3 討 論

HZ發生發展可能與機體免疫抵抗力降低、炎性反應等有關,HZ治愈后VZV仍會潛伏于脊髓后根神經節,病毒再次激活可誘發HZ[8]。中醫認為HZ病機在于肝經郁熱、脾虛蘊濕、血瘀氣滯,肝氣郁結、郁結而化熱,脾失健運、濕濁之氣內停,風火濕毒之氣郁結于肝膽,HZ初期正氣尚足,邪氣入侵時邪正交織,遂發于肌表,不通則痛,故以益氣活血、通絡止痛、祛濕風邪為治療原則[9]。

西醫治療可選擇性抑制病毒DNA合成,修復受損神經,但不同個體差異較大,藥物不良反應多,易遺留后遺神經痛[10]。火針首見于《黃帝內經》,可用于治療經筋寒痹。火針點刺皰液引流,具有引熱外達、清熱解毒之效;刺絡放血法具有活血化瘀、消炎止痛之功,火針聯合刺絡放血法治療,毒邪外泄后氣血通暢運行,共奏泄火拔毒、溫通經絡、祛瘀活血、消腫止痛之功。現代藥理學認為火針刺絡放血可改善病灶局部微循環,加快病灶周圍組織代謝、內毒素排出,提高機體抵抗力,促進炎性吸收,加快新陳代謝。本研究結果顯示,研究組療效高于對照組,止皰時間、結痂時間、脫痂時間短于對照組。其原因可能為火針刺絡放血治療以神經、內分泌、免疫系統為主,可降低神經元對損傷刺激興奮性,促使機體免疫力快速恢復,縮短疾病病程。火針刺絡放血治療可消退皮膚水皰、潰破等,可能清除超氧陰離子,改善血液循環,優化神經末梢、神經纖維微環境,減輕皮損疼痛程度。本研究結果顯示,研究組治療后癥狀積分呈下降趨勢,其原因可能為火針刺絡放血治療可溫熱刺激局部病變皮膚,加速新陳代謝,并可能作用于神經系統、淋巴循環系統,改善淋巴細胞吞噬能力,以此提高痛閾。

病毒感染后CD4+T細胞缺乏,促使HZ皮疹擴散,Thl7、Treg細胞屬于CD4+T細胞重要亞群,可維持機體免疫平衡,Thl7可分泌IL-6、IL-17等炎性因子,而Treg細胞可分泌TGF-βl等抑制性因子,其比例失衡可能影響機體免疫功能。TGF-βl可維持自身耐受性,抑制過激免疫反應,減輕組織損傷;IL-6、IL-17與疼痛區感覺缺失呈正相關,其水平升高可提高神經元興奮性,誘發疼痛。本研究結果顯示,研究組治療后外周血Thl7、Treg細胞比例、血清IL-6、IL-17水平低于對照組,TGF-βl水平高于對照組,提示火針刺絡放血治療可糾正Thl7/Treg細胞失衡狀態。分析其機制可能為火針刺絡放血治療可吸出帶皰液、局部血液,抑制炎性局灶內VZV沉積,平衡Thl7、Treg細胞及其相關因子,保護機體免疫防御機制,減輕神經損傷及疼痛反應。PGE2可增強微循環通透性,引起免疫功能紊亂,促使神經系統受損,誘發神經病理疼痛;5-HT在中樞神經系統中發揮鎮痛作用,而在外周神經系統中發揮致痛作用。本研究結果顯示,研究組治療后血清PGE2、5-HT水平低于對照組,且VAS評分低于對照組,提示火針聯合刺絡放血治療可降低血清神經疼痛因子水平,減輕疼痛程度。這可能是因為火針聯合刺絡放血治療可抑制PGE2、5-HT等因子生成,改變局部微循環血流、毛細血管通透性,降低疼痛感。

綜上所述,火針聯合刺絡放血治療HZ療效顯著,可改善臨床癥狀,加快康復進程,降低神經疼痛因子水平,減輕疼痛程度,其作用機制可能與調節Thl7、Treg細胞比例及其相關細胞因子水平有關。