濃縮生長因子治療雄激素性禿發的回顧性研究

劉 燕 龐 靜 張雪青 劉建新 董 璐 李建可 王秀環 劉鑫洲 劉國艷

1山東第一醫科大學附屬皮膚病醫院,山東濟南,250022;2山東省皮膚病性病防治研究所,山東濟南,250022;3山東中醫藥大學,山東濟南,250014

雄激素性禿發(androgenetic alopecia,AGA)是以毛囊微型化改變為特征的非瘢痕性脫發。AGA在我國男性中的總體患病率為21.3%,女性為6%[1］。目前,米諾地爾和非那雄胺是美國食品藥品監督管理局(U.S. Food and Drug Administration,FDA)唯一批準的相關藥物,但該傳統療法療效欠佳。濃縮生長因子(concentrated growth factor,CGF)作為第三代富血小板濃縮物,富含多種高濃度生長因子、CD34陽性細胞群及纖維蛋白等活性成分,可以維持細胞存活、增殖和分化,加速組織再生和修復[2］。CGF作為一種自體生物材料,已被用于口腔頜面外科、骨科、整形美容、創面修復領域[3］。但目前國內外尚無關于CGF脫發區域皮下注射治療AGA的臨床研究報道,因此本研究回顧性分析60例AGA患者采用CGF治療的療效和安全性。

1 對象與方法

1.1 入選與排除標準 本研究采用回顧性隊列研究的方法,共納入60例于山東第一醫科大學附屬皮膚病醫院就診并使用CGF治療的AGA患者。入選標準：①年齡18～60歲,男女不限;②根據《中西醫結合診療雄激素性禿發專家共識2021》,臨床診斷為AGA;③脫發程度男性符合Norwood-Hamilton 分級中Ⅱ～Ⅵ級標準,女性符合Sinclair分級法(改良版)中Ⅱ～Ⅴ級標準;④接受3次CGF治療。排除標準：①合并斑禿、白癜風等其他自身免疫性疾病者;②病歷資料缺失者;③有凝血功能障礙等血液系統疾病,或合并頭皮銀屑病、嚴重毛囊炎、嚴重感染等患者;④首次就診前6個月內接受過系統性脫發相關治療者。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床資料收集 通過門診電子病歷系統回顧性收集患者的年齡、性別、就診日期、病史、臨床癥狀、診斷、分型、既往史、家族史、治療方案、實驗室檢查、毛發鏡圖像和不良反應等,治療前后臨床大體拍照均在固定角度由同一專業醫生進行拍攝。

1.2.2 CGF制備過程 CGF是抽取靜脈血通過全自動不間斷變速離心模式制備而成。該模式能促進血小板之間的碰撞,胞吐α顆粒釋放細胞生長因子。制備過程如下：抽取患者自體靜脈血于含有肝素鈉抗凝劑的Vacuette真空負壓采血管(9 mL)中,立即放入專用離心裝置(Medifuge 200,Silfradent,意大利)中變速離心約13 min：首先加速30 s,速度達到2700 r/min后,維持旋轉2 min;再降速至2400 r/min,維持旋轉4 min;然后加速至2700 r/min維持旋轉4 min;最后再加速至3300 r/min維持旋轉3 min后減速36 s至停止。離心結束后分為三層：上層貧血小板血漿(Platelet poor plasma, PPP)層;中層濃縮血小板和生長因子層(CGF);下層紅細胞(Red blood cell, RBC)層。抽取中間層進行注射。每9 mL自體靜脈血可制備2.5 mL CGF有效成分進行皮損內注射。

1.2.3 CGF治療方案 在脫發區域皮下注射CGF,每次注射劑量為0.1 mL/cm2,注射深度為5 mm,每月注射一次,連續注射3次。本研究納入60例患者共分為兩組,48例患者屬于CGF聯合治療組：CGF注射+口服非那雄胺(男性5 mg/d)/螺內酯(女性80 mg/d)+外用米諾地爾酊(5%每日1次)。12例患者只注射了CGF進行治療,屬于CGF治療組。每月隨訪一次,分別在治療前和3次治療結束后1個月進行療效評估。

1.2.4 療效評價

1.2.4.1 客觀評價 評價治療前和治療3個月后單位毛發密度和毛囊單位密度改善程度,以及毛發鏡圖像特征變化,包括毛周褐色征、黃點征、空毛囊。毛發鏡檢查由專人針對頭頂部正中(前發際線正中至發璇部連線中點)同一部位采集三次圖像,[(毛發鏡放大倍數為50×),采集視野面積為35 mm2(5 mm×7 mm),即0.35 cm2],計數后取平均值。

1.2.4.2 主觀評價 醫生滿意度評價(由不參與此研究的同一專業醫生參照臨床照片進行評估)和患者滿意度評價采用整體美容改善量表(GAIS量表)[4］。

-1分：改善程度為“更糟糕(不滿意)”,改善比例為“比治療前更差”;0分：改善程度為“無變化(一般)”,改善比例為“0～25%的改善”。1分：改善程度為“稍有改善(滿意)”,改善比例為“26%～50%的改善”;2分：改善程度為“明顯改善(非常滿意)”,改善比例為“51%～75%的改善”。3分：改善程度為“完全改善(極其滿意)”,改善比例為“76%～100%的改善”。

另外評估患者自覺癥狀的改善,包括脫發、頭油、頭屑、瘙癢等。

1.2.5 安全性評估 不良反應的發生例數。在隨訪期間,記錄局部注射部位狀態(如疼痛、紅腫、瘙癢等)及全身癥狀(如頭暈、惡心等)。

2 結果

2.1 基線特征 本研究共納入60例使用CGF治療的AGA患者,48例患者屬于CGF聯合治療組,其中男21例(43.8%),女27例(56.2%),中位年齡28.5(23,34)歲,中位病史3.5(2,5)年,有AGA家族史患者12例(25%),無AGA家族史患者36例(75%),馬拉色菌陽性患者38例(79.2%),馬拉色菌陰性患者10例(21.8%)。12例患者為CGF治療組,其中男8例(66.7%),女4例(33.3%),中位年齡30.5(24.25,35.75)歲,中位病史3.5(2,5.75)年,有AGA家族史者7例(58.3%),無AGA家族史者5例(41.7%),馬拉色菌陽性患者9例(75%),馬拉色菌陰性患者3例(25%),見表1。

城鄉居民基本醫保管理人員業務量繁重、工作壓力大，必然產生顧此失彼現象[7]。面對新管理理念和形勢，委托商保公司經辦城鄉居民基本醫保制度設計和實施，推進了政府部門的職能轉變，一定程度上實現了管辦分離，發揮了管理中心的監督管理職能，還可直接利用商保公司的服務網點和管理平臺，發揮專業化、信息化的優勢，起到良好的補充作用[8-10]，相關理論成果為本制度設計奠定了重要的理論基礎。

表1 基線期人口統計學特征與臨床特征 例

2.2 療效評估 治療3次后兩組患者毛囊單位密度、毛發密度均明顯增加。CGF聯合治療組治療3次后的平均毛囊單位密度較治療前增加了(18.04±11.15)個/cm2(P<0.05);平均毛發密度較治療前增加了(36.43±21.18)根/cm2(P<0.05)。CGF治療組治療3次后的平均毛囊單位密度較治療前增加了(8.81±5.77)個/cm2(P<0.05);平均毛發密度較治療前增加了(16.19±12.62)根/cm2(P<0.05)。治療3次后CGF聯合治療組的毛發密度與毛囊單位密度均高于CGF治療組,兩組之間在改善毛發密度上差異具有統計學意義(P<0.05),在改善毛囊單位密度上差異無統計學意義(P>0.05,表2)。

經過3次CGF治療后,兩組患者的毛發鏡特征較治療前毛周褐色征、黃點征和空毛囊均有明顯改善,且第一次治療后就有明顯新生發(圖1),但兩組之間差異均無統計學意義(均P>0.05,表3)。

1a：治療前,鏡下見大量毛囊周圍褐色征(紅色箭頭所指)、黃點征(黃色箭頭所指);1b：治療1次后,鏡下見大量新生發(綠色箭頭所指);1c：治療3次后,毛囊周圍褐色征、黃點征較治療前明顯減少,且毛發密度、毛囊單位密度顯著增加

表3 毛發鏡特征變化 例

滿意度調查結果顯示,治療3次后CGF聯合治療組與CGF治療組的醫生與患者滿意率均達到90%以上(表4)。

表4 GAIS評估結果

臨床照片顯示,患者經過CGF治療后,頭發覆蓋率增加,發縫寬度得到改善 (圖2、3)。

圖2 CGF治療組治療過程臨床圖片

圖3 CGF聯合治療組治療過程臨床圖片

隨訪得知,經過治療以后患者的脫發、頭油、頭屑、瘙癢等自覺癥狀均得到緩解。治療1個月后,60例患者中有42例患者訴脫發明顯減少,尤其在洗發時脫發量顯著減少,31例患者訴頭油減輕,由治療前每日需洗頭縮短為每兩日洗頭一次,且瘙癢程度減輕,頭皮屑減少。治療3個月以后,54例患者脫發得到顯著控制,51例患者頭皮油膩程度降低至每三日洗頭一次,頭皮僅輕度瘙癢,無明顯頭皮屑。

2.3 安全性評估 CGF注射有著良好的耐受性且副作用少,僅有少數患者出現了輕微不適癥狀。60例患者中僅有2例患者局部注射部位疼痛明顯,3例患者注射后出現頭皮瘙癢,但這些癥狀在治療完成后的第2～3天內未經處理即可消失。其余患者未出現頭暈、惡心,注射部位紅腫、感染等不良反應。

3 討論

雄激素性禿發已成為嚴重影響人們身心健康的脫發類疾病,不僅影響美觀,而且使患者自卑、焦慮,甚至造成社交障礙[5］。目前,AGA的病因與發病機制尚未明確,主要與雄激素受體、炎癥、細胞因子、Wnt/β-catenindeng等信號通路、基因表達等相關[6］。二氫睪酮對毛乳頭細胞(dermal papilla cells, DPCs)的影響被認為是毛囊衰老的潛在原因。功能異常的DPCs會產生毛囊干細胞(hair follicle stem cells,HFSCs)的抑制因子[7］。在AGA脫發區域,HFSC的數量與未脫發區域保持一致,但增殖活躍的CD34+和CD200+干細胞數量明顯減少,表明在干細胞受損的同時,HFSC并沒有損傷。這一事實證明AGA具有可逆性[8,9］,屬于非瘢痕性脫發。因此,AGA作為一種慢性進行性疾病,不僅要抑制其進展,而且要應用修復毛囊損傷以及促進毛囊干細胞增殖的治療[5］。

CGF是通過變速離心血液得到的血小板濃縮物,血小板變速離心活化后釋放出多種生長因子：胰島素樣生長因子(IGF)、轉化生長因子(TGF)、血小板衍生生長因子(PDGF)、成纖維細胞生長因子(FGF)和人類肝細胞生長因子(HGF)等,與富血小板血漿(PRP)的不同之處是CGF含有CD34陽性細胞群[10,11］,其具有干細胞的活性,與多種生長因子一起參與基質重塑和血管生成,而且促進細胞增殖和分化。多項研究[7,12-14］表明CGF含有的生長因子可以刺激毛囊干細胞、促進毛囊發育及調控毛囊生長周期,誘導毛發再生;IGF-1刺激循環Ki67+基底角質形成細胞增殖,而TGF-β1通過抑制細胞生長和末端分離來確保基底角質形成細胞的增殖能力;PDGF-AA與FGF-2聯合使用時,可增加毛乳頭細胞的毛發誘導作用;PDGF-BB通過刺激傷口內巨噬細胞和成纖維細胞排出TGF-β1等內源性生長因子,促進合成新的膠原蛋白。Qi等[15］的研究證明,HGF通過增加β-catenin連環蛋白的表達而促進毛囊的生長。

CD34陽性細胞群在血管維護與再生、組織修復、免疫調節、細胞增殖分化等方面作用顯著[16-18］,而且可以促進頭皮局部血供,改善毛囊周圍微環境,調控毛囊進入并延長生長期,進而促進毛發再生[6］。在AGA患者的頭頂部脫發區域,毛囊干細胞表達標志物CK15和CD34表達含量都較低[19］。因此,我們推測CD34的缺失是AGA發病機制之一,CGF可以通過增加AGA脫發區域CD34的表達來治療AGA。

本研究將CGF注射到脫發區域皮下,生長因子、細胞因子等活性物質能有效逆轉毛囊損傷加速修復,促進頭皮血供,為毛囊毛發生長提供營養與動力。本研究結果顯示CGF既可以增加毛囊單位密度也可以增加毛發密度,兩組均是毛發密度的增加量高于毛囊單位密度,因此CGF改善毛發密度的效果更為顯著。兩組在改善毛囊單位密度方面差異無統計學意義,聯合組在改善毛發密度方面優于CGF組,可能與口服和外用藥物使用3個月已經開始起效相關,因此,CGF可以作為口服、外用藥物的有效補充治療。

毛囊周圍褐色征、黃點征和空毛囊是AGA特征性毛發鏡表現,與病情嚴重程度密切相關[20,21］。兩組患者CGF治療前后毛發鏡下毛囊周圍褐色征、黃點征和空毛囊均明顯改善,且兩組無統計學意義,因此該皮膚鏡特征可輔助評價CGF的臨床療效。兩組的醫生與患者滿意度均達到了90%,說明CGF治療效果得到醫生與患者的一致好評。

因CGF中含有的生長因子等成分無法抑制雄激素受體及基因表達等,尚無法完全替代口服藥物。但與其他治療方法相比,CGF具有多項優勢。與米諾地爾相比不僅不會出現“狂脫期”,且止脫效果快速顯著。Stanca等[10］首次報道了CGF中多種生物活性因子隨時間的持續和長期釋放,表明CGF適用于促進復雜而漫長的組織再生過程,而且數據表明28天是 CGF 釋放因子的最長時間,因此CGF治療可以做到快速顯著止脫,而且每月注射一次效果更好。CGF是從自體血分離得到的非全血細胞成分,不存在感染、免疫排斥和疾病傳播的風險。因此CGF與傳統療法聯合治療,可以相輔相成,增強治療效果與安全性。

綜上所述,CGF治療AGA安全有效,且制備簡便、易于掌握,可作為 AGA 的新型療法,在毛發再生領域有著廣闊前景。