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粉條兒菜總黃酮提取工藝優化及抗氧化、抗炎活性分析

2024-01-15 04:58:38劉頂鼎麻秀萍汪祖華
食品工業科技 2024年2期
關鍵詞:黃酮

楊 菁,劉頂鼎,陳 滕,劉 靜,麻秀萍,2,汪祖華,3,

(1.貴州中醫藥大學藥學院,貴州貴陽 550025;2.貴州中醫藥大學茶+大健康食品開發研究中心,貴州貴陽 550025;3.貴州中醫藥大學納米藥物技術研究中心,貴州貴陽 550025)

粉條兒菜為百合科植物粉條兒菜Aletris spicata(Thunb.)Franch.的全草[1],既可作為食品,也可作為藥品[2],為我省少數民族常用藥。其性味甘、苦、平,具有清肺止咳,活血調經,殺蟲的功效,用于治療咳嗽,咯血,百日咳,肺癰等[3]。粉條兒菜別名又叫肺筋草、小肺筋草、金線吊白米等,主要分布于自甘肅南延至華東和西南各省[4],通常生長在茂密的山坡、路旁或灌木叢中,喜潮濕、稍陰涼的環境,耐旱,適應性較強[5]。粉條兒菜在民間應用廣泛,在清明后可作為野生蔬菜食用[6],在食品及藥品領域具有較好的開發應用前景。

目前對粉條兒菜的基礎研究較薄弱,僅有少量關于化學成分的研究。通過查閱文獻可知,粉條兒菜含有生物堿、揮發油、甾體、黃酮等多類成分[7-11]。有學者從粉條兒菜中分離出美商陸酚A、異美商陸酚A[9]、5-羥基-3,7,4'-三甲氧基黃酮[10]、芹菜素[11]等黃酮類化合物。研究表明,多數黃酮類化合物具有抗氧化[12]、神經保護、抗心肌缺血、降壓、抗炎、抗腫瘤及降血糖等藥理作用[13-14],且多種疾病的發生均可能與炎癥及氧化應激反應有關。因此,粉條兒菜中以芹菜素為代表的黃酮類化合物可能為該植物抗炎及抗氧化的有效組分之一,具有一定的研究意義。

植物中總黃酮類化合物的提取方法主要有溶劑提取法、酶解提取法、回流提取法及超聲輔助提取法等[15],其中超聲輔助提取法是利用超聲波的空化、粉碎、攪拌等特殊作用,通過破壞植物體的細胞壁,同時促使顆粒破碎變小,有利于溶劑和底物之間的相互作用,使活性物質從植物體中釋放出來。較多研究者采用超聲輔助提取法結合響應面法對其工藝參數進行考察,以提高提取率。與其它提取方法相比,該提取方法具有提取時間短、提取效率高、操作簡單的優點,近年來多用于植物中有效成分的提取[16-17]。王念等[18]以干燥桑葉為原料,采用不同提取溶劑,對浸提法和超聲輔助提取法制備得到的桑葉提取物的提取率、提取物中總酚含量、抗氧化能力和對DPPH 自由基的清除能力進行了比較,發現超聲輔助提取法的提取率、提取物中總酚含量均高于浸提法,超聲輔助提取法制備得到的桑葉提取物清除DPPH 自由基的能力和總抗氧化能力略高于浸提法。張曉南等[19]通過超聲輔助法從拐棗種子中提取二氫楊梅素,采用單因素和Box-Behnken 響應面設計法考察了乙醇體積分數、超聲輻照功率、提取溫度、液料比和超聲輻照時間對二氫楊梅素得率的影響,獲取最佳提取工藝條件,這種提取方法簡單快速,效率高,有利于拐棗資源的綜合加工利用。

關于粉條兒菜中總黃酮的提取及抗氧化抗炎活性的研究未見相關報道。因此,本研究以粉條兒菜總黃酮為研究目標,采用超聲輔助提取法,結合單因素實驗和Box-Behnken 響應面法對總黃酮的提取工藝進行優化,同時對體外抗氧化抗炎活性進行初步研究,旨在為其在食品及醫藥行業的充分開發利用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

粉條兒菜 采自貴州省安順市關嶺縣,經貴州中醫藥大學王波老師鑒定為百合科(Liliaceae)粉條兒菜屬(Aletris)植物粉條兒菜Aletris spicata(Thunb.)Franch.的全草,干燥后粉碎,過40 目篩,備用;芹菜素 標準品(純度≥98%)成都曼思特生物科技有限公司;DPPH(1,1-苯基-2-苦肼基自由基,純度≥98%)、ABTS(2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽,純度≥99.0%)、水楊酸 合肥干盛生物科技有限公司;L-抗壞血酸(純度≥99.5%)上海易恩化學技術有限公司;RAW264.7細胞株 武漢普諾賽生命科技有限公司;脂多糖 Sigma 公司;DMEM 高糖培養基 Gibco 公司;胎牛血清Biological 公司;CCK-8 試劑盒 上海陶術生物科技有限公司;一氧化氮試劑盒 碧云天生物技術;其他試劑均為分析純。

UV-5500 紫外可見分光光度計 上海元析儀器有限公司;PS-40AD 超聲清洗機 深圳市潔康洗凈電器有限公司;FA2204N 電子天平 上海菁海儀器有限公司;EX225DZH 電子天平 奧豪斯儀器常州有限公司;BB150 二氧化碳培養箱、1550 型全波長酶標儀 賽默飛世爾科技公司;CKX63 倒置相差顯微鏡 上海蠻吉光電科技有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 總黃酮含量測定

1.2.1.1 標準品溶液的制備 取干燥至恒重的芹菜素標準品5.500 mg,精密稱定,用40%乙醇溶解后轉移至100 mL 容量瓶中,定容至刻度,搖勻,即得55.00 μg/mL 芹菜素標準品溶液。

1.2.1.2 測定波長的選擇 分別精密移取標準品溶液和總黃酮供試品溶液各1.5 mL,置25 mL 容量瓶中,加入1.5%三乙胺乙醇溶液2.0 mL,搖勻,用40%乙醇溶液定容至刻度,在200~800 nm 范圍內進行光譜掃描,結果顯示兩種溶液在396 nm 處均有最大吸收,試樣空白在相應位置無干擾,故選擇396 nm 作為測定波長。

1.2.1.3 標準曲線的繪制 精密移取標準品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mL,分別置25 mL容量瓶中,按照“1.2.1.2”項下方法,以相應溶劑為空白,采用紫外-可見分光光度法,于396 nm 處測定吸光度。以芹菜素濃度為橫坐標(C),吸光度為縱坐標(A),繪制標準曲線,得回歸方程A=0.0825C+0.0131(R2=0.9998),且在2.20~8.80 μg/mL 濃度范圍內呈良好線性關系。

1.2.1.4 粉條兒菜總黃酮含量的計算 取粉條兒菜粉末0.2 g,精密稱定,置50 mL 錐形瓶中,精密加入25 mL 40%乙醇,稱定重量,在超聲功率為240 W,超聲頻率為40 kHz,常溫條件下超聲處理30 min,放冷至室溫,再稱定重量,用40%乙醇補足減失的重量,搖勻,濾過,取續濾液,按照“1.2.1.2”項下方法測定吸光度(A),根據回歸方程計算提取液中總黃酮的質量濃度(C),按式(1)計算粉條兒菜總黃酮得率。

式中,Y 為總黃酮得率,%;C 為測定樣品溶液中總黃酮的質量濃度,μg/mL;25 為測定樣品溶液體積,mL;25 為總黃酮提取液總體積,mL;1.5 為移取的總黃酮提取液體積,mL;W 為稱取粉條兒菜的質量,g。

1.2.2 單因素實驗

1.2.2.1 乙醇濃度對總黃酮得率的影響 參照“1.2.1.4”項下方法進行提取,固定料液比1:125 g/mL,提取時間30 min,超聲功率為240 W,超聲頻率為40 kHz,考察不同乙醇濃度(30%、40%、50%、60%、70%)對總黃酮得率的影響。

1.2.2.2 料液比對總黃酮得率的影響 參照“1.2.1.4”項下方法進行提取,固定乙醇濃度40%,提取時間30 min,超聲功率為240 W,超聲頻率為40 kHz,考察不同料液比(1:75、1:100、1:125、1:150、1:175 g/mL)對總黃酮得率的影響。

1.2.2.3 提取時間對總黃酮得率的影響 參照“1.2.1.4”項下方法進行提取,固定料液比1:125 g/mL,乙醇濃度40%,超聲功率為240 W,超聲頻率為40 kHz,考察不同提取時間(10、20、30、40、50 min)對總黃酮得率的影響。

1.2.3 響應面試驗 在單因素實驗基礎上,利用Design-Expert 8.0.6 軟件,以乙醇濃度(A)、料液比(B)、提取時間(C)為影響因素,總黃酮得率(Y)為評價指標進行響應面試驗,因素與水平見表1。

表1 響應面試驗因素與水平設計Table 1 Factors and levels of response surface experiment

1.2.4 抗氧化活性測定 將提取得到的粉條兒菜總黃酮提取液濃縮至總黃酮濃度為0.50 mg/mL,即得用于抗氧化活性測定的樣品溶液。

1.2.4.1 DPPH 自由基清除能力的測定 參考文獻[20-21]的方法并做出適當調整。分別精密移取0.025、0.05、0.1、0.5、1.0 mL 樣品溶液,置10 mL 容量瓶中,用蒸餾水補至1 mL,加入3.5 mL 0.2 mmol/L DPPH 乙醇溶液,用乙醇定容至刻度,避光反應30 min,在517 nm 處測定吸光度值;以不加樣品的溶液在同一波長下測定DPPH 溶液吸光度值;以不加DPPH 的溶液在同一波長下測定樣品吸光度值;用同濃度水平VC溶液作為陽性對照,計算清除率。

式中,A1為樣品溶液反應后的吸光度值;A2為不加DPPH 的溶液吸光度值;A0為不加樣品的溶液吸光度值。

1.2.4.2 ABTS+自由基清除能力的測定 參考文獻[22-23]方法并略作修改。將7 mmol/L ABTS+溶液與2.45 mmol/L 過硫酸鉀溶液按體積1:1 混合,室溫避光下靜置過夜,即得ABTS+儲備液,在12~16 h內,將其用蒸餾水稀釋10 倍,得到ABTS+工作液。

分別精密移取0.025、0.1、0.5、1.0、1.5 mL 樣品溶液,置10 mL 容量瓶中,各加入2.5 mL ABTS+工作液,加蒸餾水定容至刻度,室溫下避光反應10 min,在734 nm 處測定吸光度;以不加樣品的溶液在同一波長下測定ABTS+工作液吸光度;以不加ABTS+工作液的溶液在同一波長下測定樣品吸光度;用同濃度水平VC溶液作為陽性對照,計算清除率。

式中,A1為樣品溶液反應后的吸光度值;A2為不加ABTS+工作液的溶液吸光度值;A0為不加樣品的溶液吸光度值。

1.2.4.3 羥基自由基清除能力的測定 按陳佳敏等[24]報道的方法。精密移取0.3、0.6、0.9、1.2、1.5 mL 樣品溶液,置10 mL 容量瓶中,用蒸餾水補至1.5 mL,各加入1 mL4.5 mmol/L FeSO4溶液和1 mL 4.5 mmol/L 水楊酸-乙醇溶液,再加入1 mL 4.4 mmol/L H2O2溶液1 mL,于37 ℃水浴反應30 min,在510 nm 處測定吸光度;以不加樣品的溶液在同一波長下測定羥基自由基溶液吸光度;以不加H2O2的溶液在同一波長下測定樣品吸光度;用同濃度水平VC溶液為陽性對照,計算清除率。

式中,A1為樣品溶液反應后的吸光度值;A2為不加H2O2的溶液吸光度值;A0為不加樣品的溶液吸光度值。

1.2.5 抗炎活性測定

1.2.5.1 細胞活力檢測 將RAW264.7 細胞復蘇于培養瓶中,在37 ℃、5%的CO2培養箱中培養。當細胞生長密度至80%左右時進行傳代,用移液槍輕輕將貼壁的細胞吹打下來。

參照文獻[25-26],取對數生長期的RAW 264.7細胞,將細胞濃度調整為5×104個/mL 接種于96 孔板中,每孔100 μL,于37 ℃、5% CO2培養箱中培養24 h。分別設置空白組、對照組及給藥組,空白組及對照組加入DMEM 培養基100 μL,且空白組不含細胞,給藥組以不同質量濃度(12.5、25、50、100、150 μg/mL)粉條兒菜總黃酮提取物,每組設置6 個復孔,培養24 h 后,每孔加入10 μL CCK-8 試劑,培養箱孵育2 h,用酶標儀在450 nm 處測量96 孔板的OD 值,以細胞存活率表示毒性大小。

1.2.5.2 NO 釋放量檢測 試驗分為空白組(僅含DMEM 無細胞),LPS 模型組(LPS 1.0 μg/mL)及粉條兒菜總黃酮提取物組(LPS 1.0 μg/mL 和12.5、25、50、100 μg/mL 總黃酮提取物),每孔加入體積為100 μL,于37 ℃ CO2培養箱中孵育24 h。用培養基稀釋亞硝酸鹽(NaNO2)對照品,收集96 孔板細胞上清液50 μL,室溫靜置5 min,分別加入50 μL Griess 試劑Ⅰ和50 μL Griess 試劑Ⅱ,540 nm 處測量96 孔板的OD 值,代入NaNO2對照曲線計算產生的NO 量。

1.3 數據處理

所有試驗均平行操作3 份,采用Design-Expert 8.0.6 軟件進行響應面試驗設計及數據處理;采用IBM SPSS Statistics25 軟件對數據進行差異性顯著分析,P<0.05 表示差異顯著;采用Excel 2010 和GraphPad Prism 8.3.0 軟件繪圖。

2 結果與分析

2.1 單因素實驗結果

2.1.1 乙醇濃度對總黃酮得率的影響 如圖1 所示,粉條兒菜總黃酮得率隨乙醇濃度的增大呈現先升后降的趨勢,當乙醇濃度為40%時,總黃酮得率達最大,為1.25%,之后隨著乙醇濃度的增大,總黃酮得率逐漸降低。其原因可能是在低濃度范圍內,即小于40%時,根據相似相溶原理,粉條兒菜中極性較大的黃酮類化合物易溶于大極性溶劑中,且由于乙醇的強滲透力,隨著乙醇濃度的增大,粉條兒菜總黃酮得率逐漸上升;但乙醇濃度繼續增大后,一方面是溶劑極性變小,另一方面是一些醇溶性、脂溶性或其它低極性雜質也同時被提出,從而導致總黃酮得率下降[27]。

圖1 乙醇濃度對總黃酮得率的影響Fig.1 Effect of ethanol concentration on the yield of total flavonoids

2.1.2 料液比對總黃酮得率的影響 如圖2 所示,粉條兒菜總黃酮得率隨著料液比增加而先升后略降,在1:125 g/mL 時達到最大值,為1.24%,但繼續增加時總黃酮得率反而略有降低。其原因可能是在提取溶劑體積較小時,固液間的接觸面積較小,得到總黃酮較少,而后當料液比大于1:125 g/mL 時,過多的提取溶劑會消耗部分超聲波的能量,導致作用于粉條兒菜粉末中的超聲波能量減弱,降低了黃酮類成分從細胞中溶出的能力,使得總黃酮得率下降[28]。

圖2 料液比對總黃酮得率的影響Fig.2 Effect of material liquid ratio on the yield of total flavonoids

2.1.3 提取時間對總黃酮得率的影響 如圖3 所示,隨著提取時間的增加,粉條兒菜總黃酮得率在10~30 min 呈直線上升趨勢,30 min 時得率達最大,為1.31%,隨著提取時間的繼續延長,總黃酮得率反而出現下降的趨勢。其原因可能是當提取時間過短時,粉條兒菜中的黃酮類成分沒有被完全溶出,總黃酮得率較低,在30 min 之后,隨著提取時間的增加,其它雜質逐漸被溶出,或由于長時間超聲波振蕩的影響,粉條兒菜中一些不穩定黃酮類成分被破壞,導致總黃酮的得率減少[29]。

圖3 提取時間對總黃酮得率的影響Fig.3 Effect of extraction time on the yield of total flavonoids

2.2 響應面試驗結果

2.2.1 響應面模型的建立與分析 在單因素實驗基礎上,以乙醇濃度(A)、料液比(B)、提取時間(C)為影響因素,總黃酮得率(Y)為評價指標進行響應面分析。結果見表2。

表2 試驗設計及結果Table 2 Experiment design and results

根據Box-Behnken 響應面法得到的試驗結果,利用Design-Expert 8.0.6 軟件對實驗數據進行多元二次回歸,得出總黃酮得率:Y=0.27+0.026A+6.959×10-3B+0.013C-1.614×10-4AB-4.621×10-3AC+5.883×10-3BC-0.042A2-0.011B2-0.028C2,對回歸模型進行方差分析,結果見表3。

表3 方差分析結果Table 3 Results of ANOVA

由表3 可知,模型F=16.35,P=0.0007<0.01,說明該回歸模型效果極顯著,失擬項P=0.4514>0.05,說明模型與數據擬合程度良好;R2=0.9546,表明相關性較強;R2adj和R2pred在合理范圍內一致,差異小于0.4,表明模型可很好地解釋大部分因素變化引起的響應值變化,可用此模型對粉條兒菜總黃酮的最佳提取工藝條件進行預測。

根據各影響因素的F值可知,各因素對粉條兒菜總黃酮得率的影響程度不同,由高到低依次為乙醇濃度(A)>提取時間(C)>料液比(B)。其中模型一次項B,模型交互項AB、AC、BC 以及模型二次項B2,影響不顯著(P>0.05);模型一次項C 影響顯著(P<0.05),模型一次項A,模型二次項 A2、C2,影響極為顯著(P<0.01)。

2.2.2 響應面交互作用分析 各因素交互作用對粉條兒菜總黃酮得率的響應面和等高線如圖4 所示。響應面越陡峭的一方,對總黃酮得率的影響越大。由圖4 可知,乙醇濃度對總黃酮得率的影響大于料液比和提取時間的影響;提取時間對總黃酮得率的影響大于料液比的影響。由此可得,乙醇濃度對總黃酮得率的影響最大,其次是提取時間,最后是料液比,與方差分析所得結論一致。

圖4 各因素交互作用對總黃酮得率的響應面和等高線圖Fig.4 Response surface and contour plot of interactive effects on the yield of total flavonoids

2.2.3 最佳提取工藝的確定與驗證 通過Design-Expert 8.0.6 軟件進行計算,得到粉條兒菜總黃酮最佳提取工藝為:乙醇濃度43.1%、料液比1:134.62 g/mL、提取時間32.54 min,理論上粉條兒菜總黃酮得率為1.32%。結合實際情況,將提取條件定為:乙醇濃度40%、料液比1:125(g/mL)、提取時間30 min。取粉條兒菜粉末0.2 g,按此工藝條件進行提取,平行實驗3 次。結果測得粉條兒菜總黃酮得率分別為1.34%、1.35%、1.34%,平均得率為1.34%(RSD=0.27%),與模型預測值接近,說明用該數學模型對粉條兒菜總黃酮得率進行預測是可行的。

2.3 抗氧化活性測定

2.3.1 DPPH 自由基清除能力 如圖5 所示,在1.25~25.00 μg/mL 范圍內,隨著VC和粉條兒菜總黃酮濃度的升高,清除DPPH 自由基能力均逐漸增強,且總黃酮清除率與其濃度表現出明顯的劑量效應關系,但此濃度范圍內總黃酮對DPPH 自由基清除能力弱于同濃度VC。當濃度大于25.00 μg/mL 時,隨著濃度繼續增大,清除率趨于平緩,總黃酮的清除率與VC接近,在濃度為50.00 μg/mL 時,VC的清除率為99.75%,總黃酮的清除率為97.37%。經計算得VC的IC50值為2.76 μg/mL,總黃酮的IC50值為5.46 μg/mL,表現了較好的DPPH 自由基清除能力。

圖5 總黃酮提取物對DPPH 自由基清除率Fig.5 DPPH scavenging activities of total flavonoids extracts

2.3.2 ABTS+自由基清除能力 如圖6 所示。在2.5~50.00 μg/mL 范圍內,VC和粉條兒菜總黃酮清除ABTS+自由基的能力均隨著濃度的升高而逐漸增強,與濃度呈正相關,之后其清除ABTS+自由基的能力趨于平緩。VC在50.00 μg/mL 時,清除率達最大(96.05%),IC50值為4.39 μg/mL;而總黃酮在濃度為75.00 μg/mL 時,清除率達到最大,為77.07%,其IC50值為21.69 μg/mL。由此可見,粉條兒菜總黃酮具有一定的ABTS+自由基清除能力,但效果低于VC。

圖6 總黃酮提取物對ABTS+自由基清除率Fig.6 ABTS+ scavenging activities of total flavonoids extracts

2.3.3 羥基自由基清除能力 如圖7 所示。VC在20.00~80.00 μg/mL 時,清除羥基自由基的能力隨濃度的增加呈上升趨勢(57.69%~99.63%),濃度繼續增加,清除率趨于穩定,并達到最大值,其IC50值為18.56 μg/mL。粉條兒菜總黃酮清除羥基自由基的能力隨濃度的增加而明顯上升(13.52~94.04%),在濃度為100.00 μg/mL 時,清除率最大,為94.04%,與VC的最大清除率接近(99.88%),IC50值為56.01 μg/mL。雖然粉條兒菜總黃酮清除率比VC較弱,但仍表現出一定的抗氧化能力。

圖7 總黃酮提取物對羥基自由基清除率Fig.7 Hydroxyl free radical scavenging activities of total flavonoids extracts

2.4 抗炎活性測定

2.4.1 細胞活力檢測 采用LPS 誘導巨噬細胞RAW264.7 構建炎癥反應細胞模型,測定粉條兒菜總黃酮提取物在不同濃度下對 RAW264.7 細胞存活率的影響。結果如圖8 所示,與對照組比較,總黃酮提取物濃度在12.5~100 μg/mL 范圍內對細胞存活率的影響無顯著差異,細胞存活率可達85%以上,說明此濃度范圍內的總黃酮提取物對細胞基本無毒性。當濃度達150 μg/mL 時細胞存活率顯著(P<0.05)下降,降到了42%,說明在此濃度下總黃酮提取物產生細胞毒性。因此選取12.5~100 μg/mL 濃度范圍內的總黃酮提取物進行后續實驗。

圖8 不同濃度總黃酮提取物對LPS 誘導的RAW264.7 巨噬細胞存活力的影響Fig.8 Effect of different mass concentrations of total flavonoids extracts on LPS-induced cell survival in RAW264.7 macrophages

2.4.2 NO 釋放量檢測 NO 參與多種生理功能調節,與炎癥密切相關,在LPS 誘導的巨噬細胞急性炎癥模型過程中起重要作用[30]。粉條兒菜總黃酮提取物對LPS 誘導的RAW264.7 巨噬細胞分泌NO 的結果見圖9 所示,LPS 1.0 μg/mL 作用于細胞24 h后,與對照組比較,模型組細胞培養液中的NO 含量顯著提高(P<0.01),為44.19 μg/mL,是對照組的29 倍,說明細胞炎癥模型是成功的;與模型組比較,各濃度總黃酮提取物的細胞培養液中NO 含量顯著降低(P<0.05),并且隨著濃度的增加,NO 釋放量呈現減少的趨勢,IC50為6.95 μg/mL,這說明粉條兒菜總黃酮具有較好的抗炎活性,且表現出一定的濃度依賴性。

圖9 總黃酮提取物對LPS 誘導的RAW264.7 巨噬細胞分泌NO 的影響Fig.9 Effect of total flavonoids extracts on LPS-induced NO production in RAW264.7 macrophages

3 結論

本文首次對粉條兒菜總黃酮的提取工藝及抗氧化抗炎活性進行研究。采用黃酮類化合物應用較多的超聲輔助提取法,通過單因素和Box-Behnken 響應面法對粉條兒菜總黃酮進行提取工藝考察,同時結合實際得到的最佳提取工藝為:乙醇濃度40%、料液比1:125 g/mL、超聲提取時間30 min,測得粉條兒菜總黃酮平均得率為1.34%;與模型預測值(1.32%)接近,說明用該數學模型對粉條兒菜總黃酮得率進行預測是可行的,符合超聲輔助提取法省時節能、保護熱不穩定性成分、效率高的特點,可用于粉條兒菜總黃酮的提取。

常用的抗氧化活性評價方法為自由基清除能力測定,是在自由基溶液中加入抗氧化劑,根據所產生的光學差異來反映抗氧化活性[31]。實驗中以DPPH自由基、ABTS+自由基、羥基自由基清除能力為指標,對粉條兒菜總黃酮抗氧化活性進行了分析。結果表明,粉條兒菜總黃酮具有較強的還原力,對DPPH、ABTS+及羥基自由基表現出較好的清除能力,并呈現劑量效應??梢姺蹢l兒菜總黃酮有著作為植物黃酮資源的挖掘潛力和應用價值,可作為一種天然的抗氧化劑開展深入研究。

據文獻[32-33]報道,粉條兒菜中的黃酮化合物美商陸酚A 和芹菜素均具有一定的抗炎活性。因此本實驗中使用LPS 誘導的RAW264.7 巨噬細胞對粉條兒菜總黃酮進行抗炎活性研究,其結果表明一定濃度(12.5、25、50、100 μg/mL)總黃酮提取物能使細胞培養液中NO 含量顯著(P<0.05)降低,且隨著提取物濃度的增加,NO 釋放量減少,這說明粉條兒菜總黃酮提取物具有較好的抗炎活性。

此外,本研究僅對粉條兒菜總黃酮的提取工藝、體外抗氧化抗炎活性進行了考察,由于目前總黃酮中已知成分較少,因此后續還需要對總黃酮中的未知成分進行深入挖掘,并結合體內實驗研究粉條兒菜總黃酮抗氧化抗炎的物質基礎和作用機制,為進一步開發和應用粉條兒菜總黃酮提供理論依據,并為粉條兒菜資源的充分開發利用及提高應用價值奠定基礎。

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DAD-HPLC法同時測定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
正交法優化王不留行中王不留行黃酮苷的超聲提取工藝
哈爾濱醫藥(2016年1期)2017-01-15 13:43:16
黃酮抗癌作用研究進展
瓜馥木中一種黃酮的NMR表征
UV法和HPLC法測定甘草總黃酮混懸液中總黃酮和查爾酮含量
安徽醫藥(2014年12期)2014-03-20 13:15:15
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