宮頸癌組織GSTO1的表達(dá)與宮頸癌預(yù)后的相關(guān)性分析及其N(xiāo)-糖基化對(duì)宮頸癌惡性生物學(xué)行為的影響

于盼盼 ,楊 萍,孫倩玉,高瑋睿, 趙鄒宇,孫崇鳳

宮頸癌是惡性腫瘤之一,嚴(yán)重威脅全球婦女健康[1],每年超過(guò)30萬(wàn)人死于宮頸癌[2]。目前,宮頸癌篩查、接種HPV疫苗等可明顯降低宮頸癌患者的發(fā)病率,但其轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)仍是宮頸癌患者的重要死因[3]。糖基化是蛋白質(zhì)翻譯后修飾中最常見(jiàn)的類(lèi)型之一,主要包括N-糖基化和O-糖基化[4]。研究[5]顯示,蛋白質(zhì)糖基化與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶Omega-1(glutathione S-transferase omega-1,GSTO1)是一種谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶,對(duì)細(xì)胞代謝及凋亡具有調(diào)節(jié)作用[6]。臨床研究[7]顯示,GSTO1基因多態(tài)性與HPV感染易感性和宮頸癌的發(fā)生有明顯的相關(guān)性。數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)GSTO1蛋白存在多個(gè)潛在的N-糖基化修飾位點(diǎn)。該研究旨在探索宮頸癌組織腫瘤細(xì)胞中GSTO1的表達(dá)水平與宮頸癌患者臨床病理特征和預(yù)后的相關(guān)性及其 N-糖基化對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1臨床病理資料 選擇2010年11月—2019年12月石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科診斷和手術(shù)治療的82例Ⅰ-Ⅱ期(FIGO分期,2018)宮頸癌患者作為研究對(duì)象,另收集相近時(shí)間段內(nèi)33例因子宮良性疾病行全子宮切除術(shù)患者作為對(duì)照。82例宮頸癌患者中,年齡<50歲42例,年齡≥50歲40例;Ⅰ期48例,Ⅱ期34例;鱗癌65例,腺癌17例;高中分化72例,低分化10例;腫瘤直徑<2 cm 32例,腫瘤直徑≥2 cm 50例;間質(zhì)浸潤(rùn)深度(deep stromal invision,DSI)<1/2者42例,≥1/2者40例;有淋巴脈管間隙浸潤(rùn)(lymph vascular space invasion,LVSI)21例,無(wú)LVSI 61例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(lymph node metastasis,LNM)12例,無(wú)LNM 70例。對(duì)患者行術(shù)后隨訪,記錄患者總生存時(shí)間(overall survival, OS)。OS是指手術(shù)日至死亡日或末次隨訪日期的時(shí)間。該研究經(jīng)由石河子大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審查并批準(zhǔn)(批號(hào):KJ2020-065-01),所有患者均知情同意后納入本研究。

1.1.2主要材料與儀器 宮頸癌細(xì)胞株HeLa(貨號(hào):XF0314)購(gòu)于上海復(fù)祥生物科技有限公司;GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變慢病毒(貨號(hào):220519DZ)購(gòu)自上海吉瑪公司;GSTO1抗體(貨號(hào):201986)以及E-鈣黏蛋白抗體(貨號(hào):40772)、N-鈣黏蛋白抗體(貨號(hào):76011)和波形蛋白抗體(貨號(hào):72547)購(gòu)自英國(guó)Abcam公司;DMEM培養(yǎng)基(貨號(hào):C11995500BT)、胎牛血清(貨號(hào):10099141)購(gòu)自德國(guó)Gibco公司;胰蛋白消化酶(貨號(hào):SH30042.01B)購(gòu)自美國(guó)海克隆公司;細(xì)胞遷移侵襲Transwell小室(貨號(hào):3422)、Matrigel基質(zhì)膠(貨號(hào):354234)購(gòu)自美國(guó)康寧公司;EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(貨號(hào):K1075)和TBS粉末(貨號(hào):AR0144)購(gòu)自安徽白鯊生物科技公司;嘌呤霉素(貨號(hào):107R0440)、Tween-20(貨號(hào):85113)和二甲基亞砜(DMSO;貨號(hào):D8370)購(gòu)自北京索萊寶公司;衣霉素(貨號(hào):B7417)購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)公司;兔種屬來(lái)源二抗(貨號(hào):ZB-2305)和鼠種屬來(lái)源二抗(貨號(hào):ZB-2305)購(gòu)自北京中杉金橋公司;電泳儀(型號(hào):165-8001)和轉(zhuǎn)膜儀(型號(hào):170-3935)購(gòu)自美國(guó)伯樂(lè)公司;倒置顯微鏡(型號(hào):IX73P2F)購(gòu)自日本奧林巴斯公司;化學(xué)發(fā)光成像儀(型號(hào):5200)購(gòu)自上海Chemiscope公司。

1.2 方法

1.2.1生物信息學(xué)分析 利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)GENT2(http://gent2.appex.kr/gent2/)分析GSTO1 mRNA表達(dá)情況。根據(jù)NetNGlyc 1.0 Server (http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/)預(yù)測(cè)GSTO1潛在的N-糖基化修飾的氨基酸序列。

1.2.2蘇木精-伊紅染色與免疫組化 石蠟切片經(jīng)過(guò)脫蠟、水化處理,蘇木精浸染5 min后分化6 s,然后藍(lán)化5 min,最后用伊紅浸洗1 min,水洗不變色后烘干封片。石蠟切片經(jīng)脫蠟、水化后處理,8 min高溫高壓抗原熱修復(fù),置于過(guò)氧化物中避光10 min,滴加GSTO1一抗(1 ∶100)4 ℃冰箱過(guò)夜,然后滴加二抗(1 ∶500)室溫孵育30 min,DBA顯色后再用蘇木精復(fù)染,最后用中性樹(shù)膠封片。GSTO1蛋白在宮頸癌組織腫瘤細(xì)胞的胞漿中著色,免疫組化染色的結(jié)果由3位年資較高的病理科醫(yī)師進(jìn)行評(píng)分,根據(jù)強(qiáng)度分?jǐn)?shù)和百分比分?jǐn)?shù)的乘積計(jì)算腫瘤細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分分級(jí),評(píng)分0～6分者屬于低表達(dá)或不表達(dá),評(píng)分7～16分屬于高表達(dá)[8]。

1.2.3細(xì)胞轉(zhuǎn)染 本實(shí)驗(yàn)按照慢病毒轉(zhuǎn)染說(shuō)明書(shū)所示步驟進(jìn)行。將宮頸癌細(xì)胞HeLa鋪入6孔板中,待細(xì)胞融合度至50%～60% 時(shí)加入含有GSTO1 55位N-糖基化突變載體基因序列(N55Q組)、135位N-糖基化突變載體基因序列(N135Q組)和190位N-糖基化突變載體基因序列(N190Q組)以及GSTO1野生型載體基因序列(WT組)和空載體基因序列(Vector組),去除原有培養(yǎng)基,按每孔1 ml加入不完全培養(yǎng)基。大概12～16 h更換為完全培養(yǎng)基,待細(xì)胞融合度達(dá)到80% 左右時(shí)更換含嘌呤霉素(1 μg/ml)的完全培養(yǎng)基連續(xù)篩選7 d,篩選成功表達(dá)GSTO1 N-糖基化55位、135位、190位定點(diǎn)突變以及GSTO1野生型和空載體的細(xì)胞用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.4EdU增殖實(shí)驗(yàn) 將轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞均勻鋪入96孔板中(5 000個(gè)/孔),24 h后用EdU工作液孵育2 h,然后在3.7%甲醛中固定15 min。在室溫下加入含0.5% Triton? X-100的PBS通透液孵育20 min,每孔加入100 μl Click反應(yīng)液,室溫暗處培養(yǎng)30 min,最后每孔加入100 μl的1×Hoechst33342溶液,溫室暗處培養(yǎng)30 min。顯微鏡下拍照,判斷細(xì)胞增殖能力。

1.2.5劃痕愈合實(shí)驗(yàn) 將轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞均勻接種在6孔板中,待細(xì)胞融合度達(dá)到80%以上時(shí),用移液槍的槍頭垂直于6孔板底部劃線,清洗除去脫落細(xì)胞,然后用完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。最后,在0、48 h時(shí)用倒置顯微鏡拍照,比較細(xì)胞的遷移能力。

1.2.6Transwell實(shí)驗(yàn) 將200 μl 轉(zhuǎn)染后各組細(xì)胞懸液(包含2×104個(gè)細(xì)胞)加入上室,下室加入800 μl含20% 胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,恒溫孵育48 h,去除原有培養(yǎng)基,在4%多聚甲醛固定液中將細(xì)胞固定15 min,PBS清洗后加入結(jié)晶紫染色30 min。最后,在倒置顯微鏡下隨機(jī)選取多個(gè)不同視野拍照并計(jì)數(shù),比較細(xì)胞的遷移能力。此外,Transwell實(shí)驗(yàn)還用于測(cè)定細(xì)胞侵襲能力,在上室加入細(xì)胞懸液之前,在小室的底部先加入基質(zhì)膠,其余操作均與細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)相同。

1.2.7Western blot實(shí)驗(yàn) 將宮頸癌HeLa細(xì)胞接種于6孔板中,待細(xì)胞融合度達(dá)到80%時(shí),分別用衣霉素(濃度0.1 μg/ml)、DMSO處理24 h后提取總蛋白質(zhì),進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn)。衣霉素用DMSO進(jìn)行稀釋,因此以DMSO組作為試劑對(duì)照組,以宮頸癌HeLa原株細(xì)胞作為空白對(duì)照。取出轉(zhuǎn)染后各組長(zhǎng)滿(mǎn)細(xì)胞的6孔板,除去原有培養(yǎng)基,加入細(xì)胞裂解液(RIPA ∶PMSF=99 ∶1),提取細(xì)胞內(nèi)總蛋白質(zhì)。每組蛋白樣品取10 μl,行SDS-PAGE檢測(cè),電泳結(jié)束后蛋白由凝膠傳遞至PVDF膜,然后與5% 脫脂奶粉一起封閉2 h,最后將PVDF膜分別放入含有GSTO1(1 ∶2 000)、EMT相關(guān)抗體E-cadherin(1 ∶3 000)、N-cadherin(1 ∶2 000)和Vimentin(1 ∶2 000)的脫脂奶粉中,在4 ℃下孵育過(guò)夜。第二天,取出PVDF膜,用TBST緩沖液浸洗30 min(平均5 min/次),隨后置于對(duì)應(yīng)種屬的二抗(1 ∶20 000)中,室溫下繼續(xù)孵育2 h。最后,置于化學(xué)發(fā)光成像儀中,按照流程曝光并保存圖片,統(tǒng)計(jì)灰度值并比較蛋白表達(dá)的差異。本研究中所有Western blot實(shí)驗(yàn),均進(jìn)行3次重復(fù)實(shí)驗(yàn)并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 GSTO1在宮頸癌組織中的表達(dá)首先,利用生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)GENT2檢索 GSTO1在宮頸癌組織和正常宮頸組織中表達(dá)的差異,結(jié)果顯示114例宮頸癌組織樣本中GSTO1 mRNA的表達(dá)明顯高于11例正常宮頸組織(P<0.01)(圖1A)。免疫組化結(jié)果顯示82例宮頸癌患者組織樣本中GSTO1高表達(dá)組有53例(64.6%),低表達(dá)組(陰性和低表達(dá)者)有29例(35.4%);33例對(duì)照的正常宮頸組織上皮細(xì)胞中GSTO1均呈陰性表達(dá),二者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=39.562,P<0.001)(圖1B-M)。

圖1 正常宮頸組織和宮頸癌組織中GSTO1的mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)情況

2.2 GSTO1表達(dá)與宮頸癌患者臨床病理特征的關(guān)系DSI≥1/2、有LVSI、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者腫瘤細(xì)胞中GSTO1高表達(dá)率高于DSI<1/2、無(wú)LVSI、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌患者腫瘤細(xì)胞,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 GSTO1在宮頸癌組織腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)與患者臨床病理特征的關(guān)系[n(%)]

2.3 GSTO1高表達(dá)對(duì)宮頸癌患者預(yù)后的影響隨訪納入研究的82例宮頸癌患者,隨訪截止時(shí)間是2022年10月25日,中位隨訪時(shí)間為60個(gè)月(9～144個(gè)月),其中12例(14.6%)失訪,13例(15.8%)復(fù)發(fā),12例(14.6%)死亡。Kaplan-Meier生存曲線顯示,GSTO1高表達(dá)組的5年累計(jì)OS率(37.7%, 20/53)低于GSTO1低表達(dá)組的OS率(55.2%, 16/29),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.029)。見(jiàn)圖2A。單因素Cox回歸分析結(jié)果顯示,FIGO分期(HR: 5.678, 95%CI: 1.583～20.366,P=0.008)、間質(zhì)浸潤(rùn)深度(HR: 3.806, 95%CI: 1.061～13.659,P=0.040)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(HR: 0.147, 95%CI: 0.051～0.424,P<0.001)和GSTO1表達(dá)是影響宮頸癌患者OS(HR: 7.763, 95%CI: 1.013～59.484,P=0.049)的關(guān)鍵因素。見(jiàn)表2。多因素Cox回歸分析顯示,FIGO分期(HR: 4.125, 95%CI: 1.112～15.308,P=0.034)、DSI(HR: 6.113, 95%CI: 1.329～28.112,P=0.020)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(HR: 4.749, 95%CI: 0.596～37.835,P=0.001)是影響宮頸癌患者OS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。見(jiàn)表2。

圖2 宮頸癌腫瘤細(xì)胞中GSTO1不同表達(dá)的宮頸癌患者的生存曲線

表2 宮頸癌患者OS的單變量和多變量Cox回歸分析結(jié)果

2.4 宮頸癌HeLa細(xì)胞中GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)GSTO1表達(dá)量的影響根據(jù)NetNGlyc 1.0 Server數(shù)據(jù)庫(kù)預(yù)測(cè)GSTO1潛在的N-糖基化修飾的氨基酸序列,其中N55(P=0.67)、N135(P=0.62)、N190(P=0.69)位N-糖基化修飾的陽(yáng)性率較高(圖3C)。用N-糖基化抑制劑衣霉素處理宮頸癌HeLa細(xì)胞,Western blot檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)衣霉素(0.01 μg/ml)能夠抑制癌細(xì)胞中GSTO1的蛋白表達(dá)(t=5.203,P<0.05)(圖3A-B)。構(gòu)建GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變載體(圖3D),通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染獲得穩(wěn)定表達(dá)GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變的宮頸癌HeLa細(xì)胞,Western blot檢測(cè)其GSTO1的蛋白表達(dá)量,結(jié)果顯示N-糖基化定點(diǎn)突變組GSTO1的蛋白表達(dá)量明顯降低(tN55Q=4.272,tN135Q=4.325,tN190Q=5.713,均P<0.05)(圖3E-F)。

圖3 GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)GSTO1表達(dá)量的影響

2.5 GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響EdU增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,與Vector組相比,N55Q、N135Q、N190Q三個(gè)突變組的細(xì)胞增殖能力下降(tN55Q=5.20,tN135Q=4.77,tN190Q=6.51,均P<0.001)(圖4A-B)。Transwell侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與野生型相比,GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)HeLa細(xì)胞遷移(tN55Q=8.89,tN135Q=10.68,tN190Q=17.55,均P<0.001)和侵襲(tN55Q=14.80,tN135Q=5.644,tN190Q=9.810,均P<0.001)能力具有抑制作用(圖4C-E)。同時(shí),劃痕愈合實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與野生型相比,突變組細(xì)胞遷移愈合能力降低(tN55Q=8.22,tN135Q=5.36,tN190Q=11.66,均P<0.001)(圖4F-G)。

圖4 GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響

2.6 GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)宮頸癌HeLa細(xì)胞的EMT轉(zhuǎn)化的影響HeLa細(xì)胞中轉(zhuǎn)染GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變的慢病毒,Western blot檢測(cè)EMT標(biāo)志因子E-鈣黏蛋白、N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá)發(fā)現(xiàn),與野生型相比,GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變均明顯增強(qiáng)E-鈣黏蛋白(tN55Q=163.70,tN135Q=61.22,tN190Q=153.40,均P<0.001)的表達(dá),同時(shí)均明顯抑制N-鈣黏蛋白(tN55Q=2.49,tN135Q=8.87,tN190Q=10.24,均P<0.05)和波形蛋白(tN55Q=2.05,tN135Q=4.32,tN190Q=4.81,均P<0.05)的表達(dá)。見(jiàn)圖5A-B。

圖5 GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變后EMT標(biāo)志因子的蛋白表達(dá)及灰度值統(tǒng)計(jì)分析柱狀圖

3 討論

在世界范圍內(nèi),宮頸癌位居女性惡性腫瘤第4位[9],盡管宮頸癌的診療策略有所改善,但是宮頸癌的病死率仍在逐年增加,腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移對(duì)宮頸癌的治療具有阻礙作用。

GSTO1是GST家族中Omega類(lèi)的成員之一,具有獨(dú)特的半胱氨酸位點(diǎn)和多種還原酶活性[10]。GSTO1在結(jié)直腸癌[11]、非小細(xì)胞肺癌[12]、皮膚惡性黑色素瘤[10]等惡性腫瘤中高表達(dá)。其中研究[11]表明敲除結(jié)直腸癌腫瘤細(xì)胞的GSTO1可以提高其順鉑化療效果,可能成為結(jié)直腸癌化學(xué)治療的靶點(diǎn)。在非小細(xì)胞肺癌中,GSTO1可激活JAK/STAT3信號(hào)通路,促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移并抑制其凋亡[12]。此外,GSTO1可通過(guò)EMT促進(jìn)皮膚黑色素瘤腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移[10]。本研究結(jié)果表明,與正常組織相比,GSTO1在宮頸癌組織腫瘤細(xì)胞中表達(dá)較高,其高表達(dá)與宮頸癌患者的DSI、LVSI和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理特征顯著相關(guān),且FIGO分期、DSI、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和GSTO1高表達(dá)是影響宮頸癌患者預(yù)后的關(guān)鍵因素。因此,GSTO1可能是一個(gè)潛在的靶點(diǎn),可用于預(yù)測(cè)宮頸癌預(yù)后以及惡性程度,為腫瘤的診療帶來(lái)了新思路。

蛋白質(zhì)糖基化在惡性腫瘤等疾病中具有重要的意義,糖基化通過(guò)多種復(fù)雜的信號(hào)通路決定腫瘤性質(zhì)。腫瘤細(xì)胞的凋亡、遷移、血管生成和腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)的黏附等均與糖基化有關(guān)[13]。本研究證實(shí)GSTO1的3個(gè)N-糖化修飾位點(diǎn),即Asn55、Asn135、Asn190,并且發(fā)現(xiàn)突變其中任意一個(gè)糖基化位點(diǎn)均會(huì)導(dǎo)致GSTO1的表達(dá)水平降低,提示N-糖基化對(duì)于維持其表達(dá)水平密切相關(guān)。最新研究[14]報(bào)道,SGK196在乳腺癌細(xì)胞中主要發(fā)生N-糖基化修飾,且SGK196 N-糖基化通過(guò)PI3K/AKT/GSK3β信號(hào)通路發(fā)揮調(diào)控功能,在乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮抑制作用。本研究通過(guò)EdU增殖實(shí)驗(yàn)、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell實(shí)驗(yàn)表明,GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變對(duì)宮頸癌細(xì)胞的增殖及侵襲遷移能力具有明顯的抑制作用。以上均提示N糖基化修飾可參與不同腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。

EMT是腫瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中的重要機(jī)制之一。在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中,EMT可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為具有間充質(zhì)特征的細(xì)胞,從而賦予腫瘤細(xì)胞更強(qiáng)的侵襲和轉(zhuǎn)移能力。通過(guò)調(diào)控EMT的分子機(jī)制可以有效地抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移,從而達(dá)到治療腫瘤的效果。E-鈣黏蛋白、N-鈣黏蛋白和波形蛋白是EMT過(guò)程中的三個(gè)關(guān)鍵分子,它們分別代表了上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞的特征,在調(diào)控細(xì)胞形態(tài)和功能轉(zhuǎn)變方面具有重要作用,對(duì)于EMT的發(fā)生和發(fā)展有著重要的意義[15]。本研究通過(guò)Western blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),去除GSTO1 N-糖基化修飾,可以增加E-鈣黏蛋白的表達(dá),抑制N-鈣黏蛋白和波形蛋白的表達(dá),表明GSTO1 N-糖基化定點(diǎn)突變可抑制宮頸癌細(xì)胞的EMT轉(zhuǎn)化。

本研究揭示了GSTO1在宮頸癌組織腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)及其與患者的不良預(yù)后相關(guān)。此外,GSTO1 N-糖基化參與宮頸癌的增殖和轉(zhuǎn)移并且可能影響癌細(xì)胞中EMT的轉(zhuǎn)化,這對(duì)于探討宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)生的機(jī)制,尋求宮頸癌防治新策略,具有重要指導(dǎo)意義。但目前本研究尚未明確GSTO1 N-糖基化在宮頸癌侵襲轉(zhuǎn)移過(guò)程中作用的特定分子機(jī)制,因此,未來(lái)需要進(jìn)一步探究。