松花粉青梅復合提取液的促消化功能研究

董旭 尹利端 杜芬 劉楚怡

摘要［目的］評價松花粉青梅復合提取液對功能性消化不良動物模型的作用。［方法］建立功能性消化不良小鼠的動物模型，并利用該模型考察松花粉青梅復合提取液對消化系統的促進能力。綜合評價松花粉青梅復合提取液對動物的食物利用率、小腸運動情況、消化酶分泌情況和胃排空試驗的影響。［結果］松花粉青梅復合提取液對體重增重、攝食量和食物利用率都有明顯促進作用，且能夠增加消化不良模型小鼠的墨汁推進率，增加胃蛋白酶活性和模型小鼠的胃排空率。［結論］松花粉青梅復合提取液能夠明顯提升小鼠的胃腸運動功能。

關鍵詞功能性消化不良；松花粉青梅復合提取液；動物模型；墨汁推進率

中圖分類號R 284文獻標識碼A

文章編號0517-6611（2023）24-0170-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.24.038

Study on Digestionpromoting Function of Compound Extract of Pine Pollen and Greengage

DONG Xu1，YIN Liduan2，DU Fen3 et al

（1.Key Laboratory of Marine Drugs，Ministry of Education，School of Medicine and Pharmacy，Ocean University of China，Qingdao，Shandong 266003;2.Yantai New Era Health Industry Chemical Co.，Ltd.，Yantai，Shandong 264006;3.Marine Biomedical Research Institute of Qingdao，Qingdao，Shandong 266001）

Abstract［Objective］To evaluate the effect of compound extract of pine pollen and greengage on digestive function of animal model.［Method］The animal model of functional dyspepsia in mice was established and used to investigate the promoting effect of compound extract of pine pollen and greengage on digestive system.The effects of pine pollen and greengage compound extract on food utilization，movement of small intestine，secretion of digestive enzymes and gastric emptying in rats were evaluated comprehensively.［Result］The compound extract of pine pollen and greengage had a significant promoting effect on weight gain，food intake and food utilization rate，and could increase the ink propulsion rate of dyspeptic mice，pepsin activity and gastric emptying rate of model mice.［Conclusion］The compound extract of pine pollen and greengage can significantly enhance the gastrointestinal motility of mice.

Key wordsFunctional dyspepsia;Compound extract of pine pollen and greengage;Animal model;Ink propulsive rate

近年來，隨著生活節奏的加快、飲食結構的變化，使得當今社會人們消化功能紊亂等疾病的發病率顯著上升。消化不良主要表現是由消化功能減弱、內部功能紊亂所引發的胃腸道不適的系統性疾病［1］。功能性消化不良疾病起源于胃十二指腸區域，表現為上腹部存在不適或慢性和復發性疼痛，是最常見的消化系統綜合征［2-3］。有數據顯示，目前門診疾病中消化內科疾病發病率高達23%［4-5］。

針對這類消化系統疾病，臨床上主要使用H2受體拮抗劑、促胃腸動力藥和質子泵抑制劑等合成藥［6］，長期治療副作用大，效果卻不理想［7-8］。從天然藥食同源植物中探索副作用小且具有促消化功能的原材料，進行有效配伍，并結合現代制劑技術開發產品，越來越受到人們的關注，具有良好的市場前景和較高的社會價值［9-10］。

松花粉多糖具有良好的免疫調節［11］以及降血糖、降血脂功能［12］，也被廣泛應用于功能制品中。前期研究發現松花粉也具有一定的促消化作用，并將其與青梅提取物進行最適比例的復配，獲得具有良好性狀與活性的復配提取物［13-14］。該研究旨在建立功能性消化不良動物模型，并利用該模型研究松花粉青梅復合提取物對功能性消化不良動物食物利用率、小腸運動情況、消化酶分泌情況和胃排空的影響，考察其促消化功能。

1材料與方法

1.1試驗材料

松花粉青梅復合提取液，煙臺新時代健康產業有限公司；乙醇、鹽酸、檸檬酸、乙醚北、淀粉、葡萄糖、羧甲基纖維素鈉，北京化學試劑公司；磷酸鹽緩沖液（PBS）、胃蛋白酶活性檢測試劑盒，索來寶公司；阿托品，Sigma公司；墨汁，榮寶齋；奶粉，飛鶴集團公司；生理鹽水；小鼠（18～22 g）、SD大鼠（120～150 g），濟南鵬悅動物繁育公司。

1.2試驗設備

SY21-NI4V恒溫水浴鍋，北京長風儀器儀表公司；GL-20B高速冷凍離心機，上海安亭實驗儀器廠；TS-1 渦旋振蕩器，其林貝爾儀器制造有限公司；AY220電子分析天平，日本島津公司；電熱恒溫鼓風干燥箱，上海市實驗設備廠； pHS-3C精密pH計，上海精密科學儀器有限公司；紫外可見分光光度計，UNICO公司；96孔培養板（平底），Gibico公司。

1.3試驗方法

1.3.1松花粉青梅復合提取液的制備。

將干燥松花粉按料液比1∶25（g∶mL）與純化水混合，經浸提、超聲處理后，過濾、濃縮得松花粉提取液；八成熟新鮮青梅果經清洗、熱燙、去核處理后，打漿，離心，過濾，得青梅汁；將松花粉提取液與青梅汁按照1∶1重量比混合，即得松花粉青梅復合提取液。

1.3.2松花粉青梅復合提取液對大鼠食物利用率的影響。

選用同性別120～150 g SD大鼠，每組8只，分為陰性對照組、松花粉青梅復合提取液人體推薦劑量5倍、10倍和20倍劑量組，經口給予對應受試樣品30 d，每7 d測2次體重和食物攝入量，計算體重增重、攝食量和食物利用率。

1.3.3松花粉青梅復合提取液促進大鼠消化酶分泌試驗。經口給予各組大鼠對應受試樣品30 d后，乙醚麻醉大鼠，幽門結扎法收集胃液，測定單位時間內胃液量和胃蛋白酶活，按以下公式計算胃蛋白酶排出量。

胃蛋白酶排出量（U/h）=胃蛋白酶活性×每小時胃液量

1.3.4松花粉青梅復合提取液促進小鼠小腸運動試驗。

選用體重在18～22 g同性別小鼠，每組10只，除空白組外，模型組和低、中、高劑量樣品組均用0.05%復方地芬諾酯造模，經口給予對應受試樣品30 d。最后一次給予受試樣品30 min 后給予復方地芬諾酯，30 min后再給予墨汁指示劑，25 min后處死動物，按以下公式計算墨汁推進率。

墨汁推進率=墨汁推進長度/小腸總長度×100%

1.3.5松花粉青梅復合提取液促進小鼠胃排空試驗。

經口給予各組大鼠對應受試樣品30 d后，各組小鼠腹腔注射1 mg/kg 阿托品，20 min 后每只灌胃0.8 mL半固體營養糊（10 g 羧甲基纖維素鈉、16 g 奶粉、8 g 糖、8 g 淀粉和 2 g 活性炭溶于 250 mL 蒸餾水），20 min 后脫頸處死小鼠，迅速剖腹進行全胃切除稱重，并洗去胃內容物后稱胃凈重，按以下公式計算胃內殘留率和排空率。

胃殘留率=（胃全重-胃凈重）/半固體營養糊質量×100%

胃排空率=1-胃殘留率

1.4數據分析

采用Microsoft Office Excel 2003 進行繪圖，統計學分析采用 SPSS 19.0軟件進行，以 t 檢驗進行顯著性分析，P<0.05 時表示有顯著性差異，P<0.01時表示有極顯著差異。所有數據均以±S表示。

2結果與分析

2.1松花粉青梅復合提取液對大鼠食物利用率的影響

試驗過程中，各試驗組大鼠在30 d內體重變化統計結果如表1所示。從表1可以看出，試驗過程中，各試驗組動物均未出現拒食現象，體重均呈現逐漸增加的趨勢。前21 d，與對照組相比各組大鼠體重均不存在顯著差異；但自24 d后，中、高劑量組與對照組相比體重呈現顯著差異；27 d后，各劑量組與對照組相比體重均呈現極顯著差異，說明松花粉青梅復合提取液對大鼠的體重增加有顯著作用。

對大鼠體重增重、攝食量和食物利用率分析結果見表2。從體重增重來看，與對照組相比，低、中、高劑量組大鼠體重增重均極顯著增加（P＜0.01），但不同劑量試驗組間不存在顯著差異（P＞0.05），說明松花粉青梅復合提取液對大鼠體重增加會產生顯著影響，但在設定的試驗劑量范圍內不存在劑量依賴關系。

在攝食量方面，與對照組相比，低、中、高劑量組攝食量均極顯著增加（P＜0.01），且隨著松花粉青梅復合提取液攝入劑量的增加，大鼠的食物攝入量也逐漸增加，這說明松花粉青梅復合提取液能夠顯著增加大鼠食欲且增加攝食量。松花粉青梅復合提取液組大鼠食物利用率與對照組相比均有所增加，其中低劑量組能夠極顯著提高其食物利用率（P＜0.01），但與攝入量不存在線性關系，且不同劑量試驗組間不存在顯著差異（P＞0.05）。

2.2松花粉青梅復合提取液對小鼠小腸運動的影響

松花粉青梅復合提取液對小鼠小腸運動影響結果如表 3所示。與對照組相比，模型組的墨汁推進率明顯降低，差異有統計學意義（P<0.01），表明小鼠在灌胃給予復方地芬諾酯后，腸蠕動抑制模型建立成功。在模型成立的條件下，松花粉青梅復合提取液的高、中、低劑量給藥組墨汁推進率與模型組比較均具有顯著差異（P<0.01），表明松花粉青梅復合提取液能增加小鼠小腸的蠕動。

2.3松花粉青梅復合提取液對大鼠消化酶分泌的影響

從表4可以看出，與對照組相比，低、中、高劑量組大鼠的胃蛋白酶活性、胃液量和胃蛋白酶排出量均有所增加（P＜0.05），且不同劑量試驗組間不存在顯著差異（P＞0.05）。說明促消化功能產品會增加大鼠的胃蛋白酶活性和胃液分泌，能夠較好地促進動物消化。

參照《保健食品檢驗與評價技術規范（2020 版）》規定，動物體重、體重增重、攝食量，小腸運動試驗和消化酶測定指標中任2個結果陽性即可判定該受試樣品結果陽性。因此，松花粉青梅復合提取液具有促消化功能。

安徽農業科學2023年

2.4松花粉青梅復合提取液對小鼠胃排空的影響

功能性消化與胃排空障礙和胃容受性舒張功能紊亂密切相關［7-8］，因此，該研究增加了胃排空試驗考察松花粉青梅復合提取液對胃腸道功能障礙的影響。從表5可以看出，對照組、模型組小鼠的胃排空率分別為61.61%、38.12%，對照組的胃排空率極顯著高于模型組（P<0.01），表明小鼠胃動力抑制模型建立成功。而與模型組相比，松花粉青梅復合提取液低、中、高劑量組小鼠固體食物胃排空率均有極顯著增加（ P＜0.01），且隨著添加劑量增加，胃排空率逐漸增高。這說明松花粉青梅復合提取液可顯著提升小鼠的胃運動功能。

3結論

該研究建立了功能性消化不良大鼠動物模型及小鼠動物模型，并利用該模型研究了松花粉青梅復合提取液對消化功能的促進能力。松花粉青梅復合提取液對大鼠的體重增重、攝食量和食物利用率都有明顯促進作用，對大鼠的胃蛋白酶活性和胃液分泌有顯著促進作用，且能夠增加消化不良模型小鼠的墨汁推進率和胃排空率，說明松花粉青梅復合提取液能夠明顯提升小鼠的胃腸運動功能。

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