肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L、補體C3、IgE水平變化及與病情和炎癥反應程度的關系*

覃軍，陳玲，鄧蓉蓉，胡荊江

（長江大學附屬荊州醫院 兒科，湖北 荊州 434020）

哮喘是一種氣道慢性炎癥反應性疾病，急性發作時可引起患者呼吸困難，反復發作可引起氣道重構和肺功能下降[1]。肺炎支原體肺炎（mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP）是由肺炎支原體感染所致，好發于兒童和青少年，可引起陣發性、刺激性干咳和發熱。MPP 是哮喘急性發作的重要誘因，MPP合并哮喘患兒的治療更加棘手[2]。

血清維生素D 不僅是人體必需維生素，還參與調節兒童機體免疫功能[3]。CD5 抗原樣蛋白（CD5 antigen like protein,CD5L）表達于免疫細胞表面，與配體結合后可激活抗原提呈細胞，參與機體免疫炎癥反應[4]。補體C3 升高常見于急性炎癥、傳染性疾病。免疫球蛋白E（Immunoglobulin E,IgE）介導I 型變態反應，刺激各種細胞因子、炎性介質釋放，引起呼吸道炎癥反應[5]。本研究探討MPP 合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L、補體C3、IgE 的水平變化及其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2020年1月—2022年6月長江大學附屬荊州醫院確診的55 例MPP 合并支氣管哮喘患兒為觀察組，另隨機選取同期來本院就診的55 例MPP 但無支氣管哮喘患兒為對照組。納入標準：①年齡3～12 歲；②支氣管哮喘患兒的診斷標準參考《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南（2016年版）》[6]，患兒接受X 射線片、支氣管舒張試驗檢查確診；③MPP 患兒的診斷標準參考《諸福棠實用兒科學》[7]，患兒肺炎支原體IgM 抗體（MP-IgM）滴度≥ 1∶80；④患兒在本院全程完成治療。排除標準：①有肺結核感染；②入院時患兒已經接受激素、茶堿、抗感染藥物相關藥物治療；③HIV 感染、免疫功能障礙；④伴白血病、心肝腎疾病；⑤支氣管畸形、先心病；⑥合并其他系統的重大疾病。兩組性別、年齡、身高、體重、病程比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）（見表1）。本研究經醫院醫學倫理學委員會批準，患兒及家屬均簽署知情同意書。

表1 兩組一般資料比較 （n=55）

1.2 方法

1.2.1 肺功能和血清學檢查于清晨抽取患兒外周血標本5 mL，以3 000 r/min 離心10 min。通過RT-96A 型酶標儀（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司）采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清的維生素D、CD5L、補體 C3、補體 C4、免疫球蛋白 G（Immunoglobulin G,IgG）、IgM、IgE、、血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、轉化生長因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、基質金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）、MMP-9 水平。試劑盒購自上海森雄科技實業有限公司。采用肺功能儀（日本CHEST 公司）檢測患兒用力肺活量（forced vital capacity,FVC）、第1 秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in the first second,FEV1）、呼氣流量峰值（percentage of peak expiratory flow rate in predicted value,PEF）。

1.2.2 抗體滴度檢測于清晨抽取觀察組患兒外周血標本2 mL，以3 000 r/min 離心10 min。取血清采用被動凝集法檢測MP-IgM 水平，MP-IgM ≥ 1∶160為高滴度，MP-IgM ≥ 1∶80～＜1∶160 為低滴度，并作為高滴度組和低滴度組，分別有34 和21 例。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS 21.0 統計軟件。計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；計數資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗；相關性分析用Pearson 法。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組與對照組維生素D、CD5L、補體、免疫球蛋白水平比較

觀察組與對照組維生素D、CD5L、補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），觀察組維生素D、CD5L 低于對照組，補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 高于對照組。見表2。

表2 觀察組與對照組維生素D、CD5L、補體、免疫球蛋白水平比較 （n=55，±s）

表2 觀察組與對照組維生素D、CD5L、補體、免疫球蛋白水平比較 （n=55，±s）

組別觀察組對照組t 值P 值維生素D/（ng/mL）14.61±3.70 22.67±5.02-9.585 0.000 CD5L/（ng/mL）176.8±19.4 195.0±21.3-4.685 0.000補體C3/（g/L）2.87±0.60 2.34±0.57 4.749 0.000補體C4/（g/L）0.89±0.21 0.63±0.20 6.649 0.000 IgG/（g/L）124.9±17.5 110.2±15.8 4.624 0.000 IgM/（g/L）6.8±1.2 5.4±0.9 6.922 0.000 IgE/（g/L）128.3±16.0 105.7±14.3 7.811 0.000

2.2 觀察組與對照組肺功能指標、炎癥指標比較

觀察組與對照組FVC、FEV1、PEF、TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），觀察組FVC、FEV1、PEF 低于對照組，TNF-α、MMP-2、MMP-9 高于對照組。觀察組與對照組TGF-β1水平比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 觀察組與對照組肺功能指標、炎癥指標比較 （±s）

表3 觀察組與對照組肺功能指標、炎癥指標比較 （±s）

組別觀察組對照組t 值P 值FVC/%70.51±8.83 74.02±7.16-2.290 0.024 FEV1/%66.84±10.20 71.70±9.81-2.547 0.012 PEF/%57.83±7.00 61.04±6.93-2.417 0.017 TNF-α/（pg/mL）44.71±5.96 38.04±8.83 4.643 0.000 TGF-β1/（pg/mL）32.77±5.03 31.42±5.63 1.326 0.188 MMP-2/（ng/L）318.9±76.4 240.3±55.0 6.192 0.000 MMP-9/（ng/L）146.3±34.0 95.6±21.3 9.372 0.000

2.3 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補體免疫球蛋白水平比較

、

高滴度組與低滴度組維生素D、補體C3、IgG、IgM、IgE 水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），高滴度組維生素D 低于低滴度組，補體C3、IgG、IgM、IgE 高于低滴度組。高滴度組與低滴度組CD5L、補體C4 水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表4。

表4 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補體、免疫球蛋白水平比較 （±s）

表4 高滴度組與低滴度組維生素D、CD5L、補體、免疫球蛋白水平比較 （±s）

組別高滴度組低滴度組t 值P 值n 34 21維生素D/（ng/mL）12.01±3.31 18.82±3.46-7.287 0.000 CD5L/（ng/mL）173.9±18.2 178.6±17.5 0.944 0.349補體C3/（g/L）3.08±0.55 2.74±0.51-2.289 0.026補體C4/（g/L）0.90±0.19 0.87±0.17 0.592 0.557 IgG/（g/L）129.6±16.7 117.3±16.1 2.690 0.010 IgM/（g/L）7.2±1.0 6.1±0.9 4.114 0.000 IgE/（g/L）133.0±14.8 120.7±12.8 3.148 0.003

2.4 高滴度組與低滴度組肺功能指標、炎癥指標比較

高滴度組與低滴度組FVC、FEV1、PEF、TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），高滴度組FVC、FEV1、PEF 低于低滴度組患者，TNF-α、MMP-2、MMP-9 高于低滴度組。高滴度組與低滴度組TGF-β1比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。見表5。

表5 高滴度組與低滴度組肺功能指標、炎癥指標比較 （±s）

表5 高滴度組與低滴度組肺功能指標、炎癥指標比較 （±s）

組別高滴度組低滴度組t 值P 值n 34 21 FVC/%68.14±8.13 74.35±7.43-2.842 0.006 FEV1/%64.56±7.81 70.53±8.66-2.642 0.011 PEF/%56.21±5.92 60.45±6.34-2.512 0.015 TNF-α/（pg/mL）46.71±5.47 41.47±5.68 3.402 0.001 TGF-β1/（pg/mL）33.41±4.78 31.73±5.32 1.213 0.231 MMP-2/（ng/L）331.6±60.2 298.3±58.4 2.016 0.049 MMP-9/（ng/L）152.7±29.6 135.9±25.5 2.152 0.036

2.5 相關性分析

Pearson 相關性分析顯示，MPP 合并哮喘患兒血清維生素D 與TNF-α、MMP-2 和MMP-9 呈負相關（r=-0.471、-0.663 和-0.682，均P=0.000）；CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 呈負相關（r=-0.502、-0.610和-0.634，均P=0.000）；TNF-α 與補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 測定值水平無相關性（r=0.201、0.114、0.238、0.217 和0.226，P=0.181、0.401、0.161、0.174 和0.168）；TGF-β1與維生素D、CD5L、補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 無相關性（r=-0.083、-0.112、0.233、0.172、0.132、0.094 和0.104，P=0.443、0.442、0.154、0.281、0.352、0.382 和0.387）；MMP-2 與補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 無相關性（r=0.182、0.158、0.192、0.216 和0.171，P=0.276、0.317、0.287、0.173 和0.254）；患兒MMP-9 與補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 無相關性（r=0.169、0.134、0.207、0.236 和0.185，P=0.295、0.342、0.178、0.164 和0.231）。

3 討論

MPP 是兒童常見的呼吸道感染性疾病，而哮喘患兒氣道處于高敏狀態，呼吸道感染可誘發急性發作，因此在臨床工作中MPP 合并哮喘的情況并不鮮見，兩種疾病相互影響、相互促進，導致病情復雜化[8]。本研究結果發現，MPP 合并支氣管哮喘患兒FVC、FEV1、PEF 低于單純MPP 患兒。提示MPP 合并哮喘患兒的肺功能較單純MPP 患兒更差，可能與哮喘反復發作引起氣道重構、影響肺通換氣功能有關，這與楊能等[9]的研究結果一致。

本研究結果發現，MPP 合并支氣管哮喘患兒維生素D、CD5L 測定值低于單純MPP 患兒。上述結果提示，MPP 合并哮喘患兒機體免疫炎癥反應更加嚴重。維生素D 不僅是人體必需的維生素，還參與機體免疫調節，代樹棟等[10]研究認為，支原體肺炎合并哮喘患兒血清維生素D 水平較低。維生素D 及其受體對免疫反應具有雙向調節作用，參與維持Th1/Th2平衡，維生素D 水平降低導致這一調節作用減弱而易誘發感染。CD5L 屬于巨噬細胞凋亡抑制因子，多表達于巨噬細胞，其在哮喘、氣道感染等疾病中低表達，可能在上述疾病的發病過程中發揮重要的作用[11-13]。本研究結果還發現，MPP 合并哮喘患兒血清補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 測定值及TNF-α、MMP-2、MMP-9 測定值高于單純MPP 患兒。眾所周知，補體C3、補體C4 是補體系統的重要成分，其增高常見于組織損傷、炎癥性疾病及各種傳染病。孫京煥等[14]研究認為，肺炎支原體感染并發支氣管哮喘患者的補體表達水平高于單純肺炎患者，與本研究結果一致。IgG、IgM、IgE 是人體重要的免疫球蛋白，在機體免疫炎癥反應中發揮重要作用[15-16]。TNF-α 是重要的促炎因子，可引起其他促炎因子釋放，而引起組織炎癥損傷[17-18]。MMP-2、MMP-9 可降解細胞外基質，與氣道重構有關[19-20]。合并哮喘患者本身存在氣道高反應性，機體免疫紊亂狀態更加嚴重，因此補體C3、補體C4、IgG、IgM、IgE 及TNF-α水平更高。此外，哮喘反復發作時患兒出現氣道重塑，MMPs 水平也會升高，同時伴有細胞因子和炎性介質大量釋放。

本研究對比了不同滴度MPP 合并支氣管哮喘患兒肺功能及血清指標的差異，發現抗體高滴度組FVC、FEV1、PEF 測定值低于低滴度組；高滴度組維生素D 測定值低于抗體低滴度組；抗體高滴度組補體C3、IgG、IgM、IgE 測定值高于抗體低滴度組；抗體高滴度組TNF-α、MMP-2、MMP-9 測定值高于抗體低滴度組。結果提示病毒抗體滴度水平高的患兒肺功能更差，機體免疫紊亂狀態更加嚴重，主要是由于肺炎支原體感染后可損傷氣道上皮細胞，刺激TNF-α 等促炎因子釋放，激活補體系統，促進免疫球蛋白合成，增加氣道高反應。

本研究中的相關性分析結果表明，MPP 合并哮喘患兒的血清維生素D 與TNF-α、MMP-2、MMP-9呈負相關；CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 呈負相關。上述結果提示，MPP 合并哮喘患兒血清維生素D、CD5L 水平越低，機體炎癥反應和氣道重構情況就越嚴重。今后可通過檢測血清維生素D、CD5L 與TNF-α、MMP-2、MMP-9 水平來輔助診斷和評估病情。

綜上所述，MPP 合并哮喘患兒維生素D、CD5L水平降低，補體C3、IgE 水平升高，并且與患兒病毒抗體滴度水平、炎癥反應程度有一定的關系。今后臨床上可通過檢測上述指標水平綜合評估MPP 合并哮喘患兒的病情，并指導臨床合理用藥。