銅魚華雙身蟲的宿主特異性及其寄生鰓的組織病理學

摘要：圓口銅魚（Coreius guichenoti）是國家二級保護動物，銅魚華雙身蟲（Sindiplozoon coreius）的寄生會引起圓口銅魚死亡，探明銅魚華雙身蟲的致病機理，可為圓口銅魚的人工馴養、繁殖等提供指導。通過對寄生銅魚華雙身蟲的圓口銅魚鰓進行病理組織切片研究，發現該雙身蟲的寄生會導致鰓小片相互粘連、鰓小片的上皮細胞增生和酸性粒細胞增多等炎癥反應，以及出現鰓絲擠壓變形的癥狀。此外，與圓口銅魚在同一養殖系統的齊口裂腹魚（Schizothoraxprenanti）和金沙鱸鯉（Percocypris pingi），以及廣西壯族自治區西江水系野生的烏原鯉（Procypris mera），均感染了雙身蟲，形態學和ITS2 及COI分子鑒定結果表明它們均為銅魚華雙身蟲。研究結果表明銅魚華雙身蟲的宿主特異性不高，要避免同一科屬的魚類混養而相互交叉感染。

關鍵詞：單殖吸蟲；銅魚華雙身蟲；組織病理學；宿主特異性

中圖分類號：Q18 文獻標志碼：A 文章編號：1674-3075（2024）03-0172-06

圓口銅魚（Coreius guichenoti）是長江上游珍稀特有魚類，由于過度捕撈、大壩修建和環境污染，其數量顯著下＼降（Xiong et al，2014），2021 年新調整的《國家重點保護野生動物名錄》增補圓口銅魚為國家二級保護野生動物。在圓口銅魚人工馴養過程中，發現其鰓部會寄生一種雙身蟲，嚴重時會導致魚類死亡。通過形態學測量和DNA 序列比對分析，鑒定為銅魚華雙身蟲（Sindiplozoon coreius）新種（Cao et al，2021）。華雙身蟲隸屬于扁形動物門（Platyhelminthes）單殖吸蟲綱（Monogenea）鉤鋏蟲目（Mazocraeidea）雙身蟲科（Diplozoidae）。單殖吸蟲通常具有幾丁質的后吸器，通過中央錨鉤和小鉤固著在魚鰓，攝食鰓上皮細胞和血液，刺激粘液分泌，影響魚類呼吸（Lu et al，2008）。為了進一步弄清銅魚華雙身蟲的致病機理，我們對病魚的鰓進行了組織病理學研究。

另外，在圓口銅魚發生雙身蟲病的同一養殖系統中，還混養有金沙鱸鯉（Percocypris pingi）、齊口裂腹魚（Schizothorax prenanti）和中華鱘（Acipenser si?nensis），經過2～3 年混養后，發現金沙鱸鯉和齊口裂腹魚也感染了雙身蟲。在西江水系采集的野生烏原鯉（Procypris mera）鰓部也發現了雙身蟲的感染。通過初步的形態學鑒定，這3 種魚寄生的雙身蟲與圓口銅魚寄生的銅魚華雙身蟲比較相似。

單殖吸蟲通常具有嚴格的宿主特異性（Whitting?ton et al，2000），雙身蟲的宿主特異性一般也比較高（Gao et al，2007），但有些種類的宿主特異性比較弱，如西伯利亞擬雙身蟲（Paradiplozoon homoion）可寄生15 種以上的鯉科魚類（Matejusova et al，2004）。那么寄生在同一養殖系統中不同宿主的雙身蟲是否為同一種？是否存在宿主轉移？本文通過收集金沙鱸鯉、齊口裂腹魚和烏原鯉的雙身蟲，并進行形態學和分子鑒定，以闡釋雙身蟲的宿主特異性。

1 材料與方法

1.1 雙身蟲收集及標本制作、測量

實驗魚采集于武漢某養殖場人工養殖的圓口銅魚、齊口裂腹魚和金沙鱸鯉，以及廣西壯族自治區西江水系的烏原鯉。從魚鰓上剝離雙身蟲，清水沖洗干凈后，在解剖鏡（LEICA PN：MDG33/10450123）下活體觀察、拍照和繪圖；一部分蟲體用多聚甲醛固定，用來制作標本；另外一部分蟲體用純酒精保存，用作分子鑒定。

甲醛固定的蟲體經洋紅染色、梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠固定后（Khotenovsky，1981），在顯微鏡（LEICA：DM2000）下觀察，測量后吸器和交配器幾丁質結構的大小。文中數據記錄除特別標明外，單位均為μm。