高效液相色譜法測定25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑

洪陳艷，顏高俊，王學林，安燕萍

(昆明農藥有限公司，云南 昆明 650401)

硝磺草酮(英文通用名：mesotrione)屬于HPPD抑制劑，廣譜苯胺類除草劑，主要用于玉米田防除蒼耳、藜、薺菜、稗草、龍葵、繁縷、馬唐等雜草，對磺酰脲類除草劑產生抗性的雜草有效[1]。

莠去津(英文通用名：atrazine)又名阿特拉津，是一種三氮苯類除草劑，除草范圍廣，效果好，對植物安全，殘效期短。莠去津是選擇性內吸傳導型苗前、苗后除草劑，用于玉米、高粱、甘蔗、茶樹及果園、林地防除一年生禾本科雜草和闊葉雜草[2]。

25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑有效成分硝磺草酮和莠去津可分別采用液相色譜法和氣相色譜法進行分析檢測。本文通過實驗研究建立了一種操作快捷、方便準確的高效液相色譜分析方法，該方法在同一根C18色譜柱上能同時對25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中的有效成分硝磺草酮和莠去津進行同柱液相色譜分離和定量測定，分析方法的精密度和準確度滿足定量分析的要求。

1 實驗部分

1.1 試劑

硝磺草酮標樣(w=99.01%)；莠去津標樣(w=99.30%)；甲醇：分析純；乙腈：色譜純；冰乙酸：分析純；水：蒸餾水(新蒸二次蒸餾水)。

1.2 儀器

高效液相色譜儀：具可變波長紫外檢測器；色譜數據處理機；色譜柱：250 mm×φ4.6 mm 不銹鋼柱，內裝C18填充物，粒徑 5 μm；過濾器；濾膜孔徑 0.45 μm；微量進樣器：50 μL；超聲波清洗器。

1.3 高效液相色譜操作條件

柱溫：室溫(溫差變化應不大于 2 ℃)；流動相：乙腈+水=50+50(體積)，水用冰乙酸調試pH到3.0，經濾膜過濾并超聲脫氣；檢測波長：254 nm；流速：0.8 mL/min；進樣體積：5 μL。

1.4 操作步驟

1.4.1 配制標樣溶液

準確稱取 0.02 g 硝磺草酮標樣、莠去津標樣 0.08 g(精確至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，搖勻備用。

1.4.2 配制試樣溶液

準確稱取25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑試樣 0.4 g(精確至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，超聲波振蕩 5 min，冷卻至室溫，搖勻備用。

1.4.3 測定

在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰兩針標樣溶液中的硝磺草酮、莠去津響應值變化小于1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣進行分離測定[1]。25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑高效液相色譜圖(如圖1)。保留時間(min)：硝磺草酮約5.5，莠去津約7.0。

1.硝磺草酮(5.5 min)；2.莠去津(7.0 min)。圖1 25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑高效液相色譜圖

1.4.4 計算

將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積分別進行平均。試樣中硝磺草酮(莠去津)的質量分數X1(%)按公式計算：

式中：A2為試樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積的平均比值；m1為標樣硝磺草酮(莠去津)的質量，g；w為標準品硝磺草酮(莠去津)的質量分數，%；A1為標樣溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面積的平均比值；m2為試樣的質量，g；X1為試樣硝磺草酮(莠去津)的質量分數，%。

1.4.5 允許差

硝磺草酮、莠去津兩次平行測定結果之差應分別不大于0.1%和0.4%，取其算術平均值作為測定結果。

2 結果與討論

2.1 液相色譜操作條件的選擇

為了保證25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中辛硝磺草酮和莠去津的峰型能夠較好地分離，分別取了不同配比的乙腈和水為流動相進行分析檢測，通過比較和對比分析硝磺草酮和莠去津以及雜質峰的峰型、出峰時間、分離完全度等因素，確定使用乙腈+水=50+50(體積)為流動相時，樣品色譜圖基線平穩，峰型好，分離效果較好，出峰時間適宜，因此確定選用乙腈+水=50+50作為流動相。

2.2 波長的選擇

使用使用紫外可變波長檢測器，在不同波長下對25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑樣品中硝磺草酮和莠去津進行掃描，當掃描波長為 254 nm 時，硝磺草酮和莠去津的響應值最大，并且能與雜質峰分離徹底，因此選擇 254 nm 作為檢測波長。

2.3 溶劑的選擇

根據硝磺草酮和莠去津的性質，當選用甲醇為試樣溶劑時，能較好地溶解試樣，且峰型分離較好，滿足試劑的選擇條件。

2.4 分析方法線性關系測定

配制一系列質量濃度梯度的硝磺草酮、莠去津混合標樣溶液，按本文1.3、1.4中的方法進行分析檢測，每個質量濃度分析兩次，求其峰面積的平均值，得出了一系列色譜峰面積(表1、表2)。以硝磺草酮(莠去津)質量濃度為橫坐標，以硝磺草酮(莠去津)平均峰面積為縱坐標繪制標準曲線。測得硝磺草酮標準曲線線性方程為：y=1.0(107x+35341，相關系數為：R2=0.9997；莠去津標準曲線線性方程為：y=3.0(106x-1322.9，相關系數為：R2=0.9996，結果表明本方法對硝磺草酮(莠去津)的分析具有良好的線性相關性，可以滿足定量分析的要求。

表1 不同質量濃度硝磺草酮標樣與對應的峰面積

表2 不同濃度莠去津標樣與對應的峰面積

2.5 分析方法的精密度測定

分別稱取5個平行試樣，按上述色譜條件和測定步驟進行測定，硝磺草酮和莠去津的標準偏差分別為0.19%、0.37%；變異系數分別為3.77%、1.83%，結果(表3)。

表3 分析方法的精密度測定結果

2.6 分析方法準確度測定

稱取硝磺·莠去津可分散油懸浮劑試樣配制成試樣溶液，分別稱取相同體積的上述溶液制備7份相同的樣品。其中，6份分別加入一定量的硝磺草酮(莠去津)標樣。如此配制成6個混合樣品溶液和1個空白溶液，按本標準操作條件進行分析，分別測定每個樣品的硝磺草酮(莠去津)總質量，計算回收率，測定結果見(表4)，表明該方法確確度較高。

表4 分析方法的準確度測定結果

3 結論

實驗表明，本文建立的高效液相色譜法測定25%硝磺草酮·莠去津可分散油懸浮劑中有效成分硝磺草酮、莠去津質量分數的分析方法，具有良好的線性關系、分離度高，操作方法方便、快捷，已滿足定量分析要求，適用于該劑型質量分數檢測和質量控制。