14%蟲螨腈?虱螨脲懸浮劑的高效液相色譜分析

摘 " " "要： 利用高效液相色譜儀，以甲醇-0.1%磷酸水（體積比85∶15）為流動(dòng)相，使用C18為填料的不銹鋼柱和DAD檢測(cè)器，在254 nm波長(zhǎng)下對(duì)14%蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑中的有效成分進(jìn)行定性和定量分析。該方法條件下，蟲螨腈、虱螨脲的相關(guān)系數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)偏差、變異系數(shù)以及加標(biāo)回收率等方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)均滿足相應(yīng)要求，證明該方法適用于蟲螨腈和虱螨脲復(fù)配而成的農(nóng)藥制劑分析。

關(guān) "鍵 "詞：蟲螨腈；虱螨脲；高效液相色譜；分析方法

中圖分類號(hào)：TQ450.7 " " 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A " " 文章編號(hào)： 1004-0935（2023）04-0613-04

蟲螨腈又名溴蟲腈，是一種芳基吡咯類殺蟲劑、殺螨劑，主要是胃毒作用，有部分觸殺活性，常用于棉花、蔬菜、柑橘、頂果、藤蔓和大豆上害蟲及害螨的防治。虱螨脲是一種苯甲酰脲類殺蟲劑、殺螨劑，其主要通過攝入發(fā)揮作用，攝入后幼蟲不能蛻皮并停止進(jìn)食，也可以通過卵巢發(fā)揮作用，減少產(chǎn)卵和卵孵化，常用于棉花、玉米和蔬菜上的鱗翅目和鞘翅目幼蟲的防治[1]。蟲螨腈和虱螨脲二者復(fù)配而成的殺蟲劑，具有胃毒、觸殺作用，且具有一定的殺卵作用，對(duì)甘藍(lán)甜菜夜蛾具有很好的防治效果[2-3]。

當(dāng)前，已報(bào)道蟲螨腈和虱螨脲單劑或與其他有效成分復(fù)配而成的制劑分析方法[4-9]，但同時(shí)分析測(cè)定蟲螨腈和虱螨脲的高效液相色譜方法鮮有報(bào) " 道[10]。本文建立了一種對(duì)14%蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑中有效成分進(jìn)行同時(shí)定性、定量的高效液相色譜分析方法，該方法擁有良好的分離度和線性關(guān)系，方法學(xué)驗(yàn)證指標(biāo)均符合要求，適用于企業(yè)和監(jiān)管部門對(duì)相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。

1 "試驗(yàn)部分

1.1 "儀器與試劑

安捷倫1260II型反相高效液相色譜儀，搭配二級(jí)陣列管檢測(cè)器；梅特勒-托利多XSE105DU型電子分析天平；默克-密理博純水儀；超聲波清洗器； 0.45 μm微孔濾膜。上海安譜HPLC級(jí)甲醇、天津市科密歐AR級(jí)磷酸、Milli-Q超純水、99.0%蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)品、98.4%虱螨脲標(biāo)準(zhǔn)品、98.0%蟲螨腈原藥、97.0%虱螨脲原藥、14%蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑及制劑空白。

1.2 "高效液相色譜操作條件

流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸水（體積比85∶15），柱溫為30 ℃，流速為1.0 mL·min-1，進(jìn)樣體積為5 μL，檢測(cè)器波長(zhǎng)為254 nm，色譜柱為島津Shim-pack GIST C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），蟲螨腈保留時(shí)間約為6.6 min，虱螨脲保留時(shí)間約為8.1 min，如 "圖1、圖2所示。

1.3 "實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 "標(biāo)樣溶液的配制

稱取0.05 g蟲螨腈標(biāo)準(zhǔn)品、0.02 g虱螨脲標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL的容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，配制成一定濃度蟲螨腈和虱螨脲的混合標(biāo)樣儲(chǔ)備液，置于室溫保存。

1.3.2 "工作溶液的配制

用甲醇稀釋1.3.1配制的蟲螨腈標(biāo)樣溶液，分別配制一系列梯度濃度的混合標(biāo)樣工作溶液。

1.3.3 "試樣溶液的配制

稱取約0.5 g14%蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑，置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，過濾待測(cè)。

1.3.4 "測(cè)定

在1.2高效液相色譜操作條件下，平衡基線，連續(xù)進(jìn)針標(biāo)準(zhǔn)品溶液，直至相鄰2針蟲螨腈和虱螨脲的峰面積變化lt;1.5%后，按照標(biāo)、樣、樣、標(biāo)的序列進(jìn)行測(cè)定。

1.3.5 "計(jì)算

將測(cè)得的兩針被試物溶液以及被試物前后兩針對(duì)照物溶液中峰面積分別進(jìn)行平均。被試物中蟲螨腈（虱螨脲）質(zhì)量分?jǐn)?shù)X1按下式計(jì)算：

X_1=（A_2×m_1×P）/（A_1×m_2×f）×100%。 " " "（1）

式中：A1—對(duì)照物溶液中蟲螨腈（虱螨脲）峰面積的平均值；

A2—被試物溶液中蟲螨腈（虱螨脲）峰面積的平均值；

m1—蟲螨腈（虱螨脲）對(duì)照物的質(zhì)量，g；

m2—被試物的質(zhì)量，g；

f—稀釋因子：1；

P—蟲螨腈（虱螨脲）對(duì)照物的純度，%。

2 "結(jié)果與討論

2.1 "分析條件的確定

使用二級(jí)陣列管檢測(cè)器將檢測(cè)波長(zhǎng)調(diào)整為波長(zhǎng)掃描范圍為190～400 nm并對(duì)蟲螨腈和虱螨脲標(biāo)樣進(jìn)行3D譜圖掃描并得到紫外吸收光譜，見圖3、4。

兼顧2組分的含量及響應(yīng)大小，讓2組分峰型更好的呈現(xiàn)，同時(shí)避免雜質(zhì)和溶劑吸收的干擾，最終選擇檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，且在該波長(zhǎng)條件下， " 2組分的峰純度值均大于990，符合定量分析關(guān)于特異性的相關(guān)要求，見圖5。

經(jīng)過反復(fù)測(cè)試的結(jié)果顯示：使用島津Shim-pack GIST C18進(jìn)行分析，當(dāng)流動(dòng)相比例為85%甲醇+15%的0.1%磷酸水溶液、1.0 mL·min-1流速時(shí)，基線平穩(wěn)，2組分峰型對(duì)稱，分離效果較好，能滿足分析要求。

2.2 "選擇性（非分析物干擾）測(cè)定

在1.2高效液相色譜條件下，對(duì)制劑空白、蟲螨腈原藥、虱螨脲原藥逐一進(jìn)行色譜分析，分析結(jié)果顯示，目標(biāo)分析物能有效分離，制劑空白和原藥在目標(biāo)分析物出現(xiàn)的區(qū)域無干擾峰存在，見圖6。

2.3 "線性相關(guān)性測(cè)定

在1.2的液相色譜條件下，將1.3.2中的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液上機(jī)分析。結(jié)果顯示，當(dāng)蟲螨腈在質(zhì)量濃度在50～1 000 mg0 -1范圍時(shí)，質(zhì)量濃度與色譜峰面積成良好線性關(guān)系，得到蟲螨腈的線性回歸方程為y=7.423x+31.222，線性相關(guān)系數(shù)R2為0.999 9；當(dāng)虱螨脲在質(zhì)量濃度20～400 mg量濃-1范圍時(shí)，質(zhì)量濃度與色譜峰面積成良好線性關(guān)系，得到虱螨脲的線性回歸方程為y=9.1426x+15.553，線性相關(guān)系數(shù)R2為0.999 9；以蟲螨腈和虱螨脲質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，見圖7。

2.4 "分析方法的精密度

取1.3.3中配制的試樣溶液用于方法精密度試驗(yàn)，在1.2的液相色譜條件下重復(fù)分析5次，結(jié)果滿足《農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認(rèn)指南》（NT/T 2887—2016）3.3制劑中有效成分和相關(guān)雜質(zhì)關(guān)于精密度（重復(fù)性）的要求，分析結(jié)果見表1。

2.5 "分析方法的準(zhǔn)確度

按照配方比例要求，稱取5份適量空白制劑，按制劑標(biāo)稱值，分別在空白制劑中添加已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)的蟲螨腈原藥（98.0%）和虱螨脲原藥（97.0%），制成準(zhǔn)確度試驗(yàn)樣品，用甲醇將上述5分試驗(yàn)樣品分別定容至100 mL容量瓶刻度，過膜分析，分析結(jié)果見表2。

3 "結(jié) 論

本試驗(yàn)建立了14%蟲螨腈·虱螨脲懸浮劑的高效液相色譜分析方法，該方法操作簡(jiǎn)單，擁有良好的分離效果和線性關(guān)系，且精密度和回收率均符合要求，適用于對(duì)蟲螨腈和虱螨脲二者復(fù)配而成制劑的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定。

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Determination of 14% Chlorfenapyr and Iufenuron

Suspension Concentrate by HPLC

RAN Yan， ZHOU Ran-hao， ZHOU Shi-yang， WANG Rui

（Guizhou Testing Technology Research and Application Center， Guiyang Guizhou 550014， China）

Abstract： The effective components in 14% chlorfenapyr and iufenuron suspension concentrate were qualitatively and quantitatively analyzed by HPLC with methanol-0.1% phosphoric acid water（volume ratio 85∶15） as mobile phase， C18 stainless steel column and DAD detector at 254 nm. Under the conditions of this method， the correlation coefficient， standard deviation， coefficient of variation， standard addition recovery and other methodological validation indexes of chlorfenapyr and chlorfenapyr met the corresponding requirements， which proved that this method was suitable for the analysis of pesticide formulations composed of chlorfenapyr and iufenuron.

Key words： Chlorfenapyr; Iufenuron; HPLC; Analysis method