小兒支原體肺炎血Th17/Treg細胞失衡與心肌損害發(fā)生的相關(guān)性*

國春柘 成芳 薛喬 孫世心 趙英免 南艷 安紅

(1.邢臺市人民醫(yī)院兒科,河北 邢臺 054000;2.河北大學附屬醫(yī)院結(jié)核科,河北 保定 071000)

肺炎支原體肺炎是由肺炎支原體感染引起的一種急性呼吸道及肺部炎癥[1-2]。研究顯示,小兒支原體肺炎發(fā)病率呈不斷上升趨勢,占兒科各種類型肺炎的10%以上,嚴重影響小兒身心健康[3]。伴隨疾病的發(fā)展,肺炎支原體肺炎可造成多系統(tǒng)免疫損傷,最常見為心肌損害,而支原體肺炎引起心肌損害除與病原體直接侵害外,并且還與機體免疫功能失衡、紊亂有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),促炎性Th17細胞與抑制性Treg細胞間平衡的打破,Treg缺失會造成效應Th12細胞過度增殖在很多自體免疫疾病及炎癥疾病密切相關(guān)[4-5]。因此,及時有效的診斷和治療小兒支原體肺炎所致的心肌損害尤為關(guān)鍵。基于此,本研究通過探討小兒支原體肺炎血Th17/Treg細胞失衡與心肌損害發(fā)生相關(guān)性,為診斷和治療心肌損害提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2020年3月—2022年3月于邢臺市人民醫(yī)院就診的支原體肺炎患兒137例作為觀察對象,其中男性78例,女性59例;年齡1～14歲,平均(5.98±1.65)歲。另選擇同期健康體檢兒童96例作為對照組,其中男性61例,女性35例;年齡1～14歲,平均(6.14±1.27)歲。支原體肺炎患兒納入標準:①符合《實用兒科學》[6]標準。②通過臨床表現(xiàn)、實驗室及影像學檢查證實為支原體肺炎。③無先天性心臟病史。④年齡1～14歲。⑤與患兒家屬簽署知情同意書。排除標準:①既往病史存在肝功能損害及心肌損害。②反復呼吸道感染患兒。③由于其他病原菌感染引起肺炎患兒。④存在凝血功能嚴重異常患兒。⑤嚴重精神疾病患兒。心肌損害判定標準[7]:臨床表現(xiàn)主要為胸悶、心慌、紫紺,部分伴呼吸困難、心功能衰竭、血壓明顯下降等;肌酸激酶同工酶(CK-MB)>24U/L;影像學檢查:心臟擴大,存在心腦綜合征、心源性休克或心功能不全;心電圖表現(xiàn):以R波為主的2個或2個以上主要導聯(lián)的ST-T改變持續(xù)4天以上伴動態(tài)變化,新近發(fā)現(xiàn)的房室、竇房傳導阻滯,完全性左束或右束支傳導阻滯,竇性停搏,多源性、多形性、成對或成聯(lián)律期前收縮,非房室結(jié)劑房室折返造成的異位性心動過速、異常Q波、QRS低電壓、心室顫動、心室撲動、心房顫動等。存在上述2項或以上判定為心肌損害。

1.2 收集臨床資料 包括心肌酶、影像學及心電圖情況。其中心肌酶水平測定:采集受試兒童靜脈血3 mL,離心10 min,收集血清,于-20 ℃保存待測。應用美國Beckman庫爾特有限公司全自動生化分析儀(型號:AU5800型)及配套試劑盒測定乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和CK-MB水平,嚴格依據(jù)試劑盒說明書標準測定。LDH正常范圍120～270 IU/L,CK正常范圍0～190 U/L,CK-MB正常范圍<25 U/L。

1.3 檢測Th17/Treg 采集受試兒童清晨空腹外周靜脈血3 mL,取100 μL全血肝素抗凝后加入CD127 PEMAB、CD8 APC-CY7、CD25 PE-CY7、CD3FITC抗體各10 μL,避光室溫孵育20 min,溶解紅細胞后固定共50 min,再加入IL-10、IL-17 ALEXA647標記抗體各10 μL,避光下50 min,PBS溶液洗滌細胞并重懸后,以流式細胞儀(美國BD公司)測定Th17細胞和Treg細胞占CD4+T細胞比例。

1.4 觀察指標 ①觀察支原體肺炎患兒心肌損害發(fā)生情況。②觀察各組Th17細胞占CD4+T細胞比例、Treg細胞占CD4+T細胞比例及Th17/Treg。③觀察各組心肌酶水平變化。④分析Th17/Treg與心肌酶相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 心肌損害情況 137例支原體肺炎患兒中,發(fā)生心肌損害72例為心肌損害組,無心肌損害65例為無心肌損害組。

2.2 3組心肌酶情況比較 心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于無心肌損害組和對照組,且無心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于對照組(P<0.05),見表1。

表1 3組心肌酶水平比較

2.3 3組Th17/Treg水平比較 心肌損害組Th17細胞占CD4+T細胞比例和Th17/Treg高于無心肌損害組和對照組,且Treg細胞占CD4+T細胞比例低于無心肌損害組和對照組(P<0.05);無心肌損害組Th17細胞占CD4+T細胞比例和Th17/Treg高于對照組,且Treg細胞占CD4+T細胞比例低于對照組(P<0.05),見表2。

表2 3組Th17/Treg水平比較

2.4 Th17/Treg與心肌酶的相關(guān)性 采用Pearson相關(guān)性分析顯示,Th17/Treg與LDH、CK和CK-MB呈線性正相關(guān)(P<0.05),見表3。

表3 Th17/Treg與心肌酶的相關(guān)性

3 討論

支原體在生命結(jié)構(gòu)上處于病毒和細菌之間,主要經(jīng)空氣、飛沫傳播;目前,關(guān)于支原體肺炎的致病機制尚未完全明確[7-11]。支原體肺炎主要是由于呼吸道功能障礙而引起心肌缺氧性損傷,加重心肌損害[12-14]。此外,有學者認為,支原體肺炎造成肺外組織損害病理生理基礎可能是平滑肌上皮、腎、肺及心有自身抗體存在,肺受肺炎支原體感染后可導致多種血清學反應,即支原體肺炎造成的感染免疫反應。心肌酶譜是評價心肌損害的重要指標[15-17]。LDH主要存在在人體所有組織細胞內(nèi),用于心肌疾病的檢查。在病理情況如CK、CK-MB水平增高,提示心肌受損。本研究結(jié)果顯示,心肌損害組血清LDH、CK和CK-MB水平高于無心肌損害組和對照組,由此可見支原體肺炎心肌損害患兒血清LDH、CK和CK-MB水平明顯增高。分析其原因可能是由于支原體肺炎侵入呼吸道后復制,造成心肌損害,隨著患兒心肌損害程度加重,則會導致各項指標呈增高趨勢。

Treg細胞和Th17細胞是重要的兩類CD4+T細胞,在免疫功能正常維持方面具有重要作用[18-21]。Treg細胞主要是可調(diào)節(jié)其他免疫細胞功能的一種細胞亞型,并且在機體免疫功能穩(wěn)定維持方面具有重要作用。Th17細胞能夠分泌IL-17,在抗感染對抗病原體侵襲中具有重要作用[22-23]。Th17細胞與Treg細胞功能和分化相互遏制,二者數(shù)量的表達失衡則會使病毒復制水平受影響,對心肌損害發(fā)展和轉(zhuǎn)歸起關(guān)鍵作用。Treg細胞的免疫調(diào)節(jié)作用在減輕心肌損害、保護心肌自身耐受性方面發(fā)揮關(guān)鍵作用;Th17細胞具有促炎作用,并且在心肌免疫損傷中占主導地位。本研究表明,心肌損害組Th17/Treg高于無心肌損害組和對照組,由此可見支原體肺炎心肌損害患兒Th17/Treg細胞比例明顯升高,Th17/Treg細胞比例明顯失衡。此外,本研究也表明,Th17/Treg與LDH、CK和CK-MB呈正相關(guān)。調(diào)節(jié)Th17/Treg細胞比例平衡,可作為防治心肌損害的新靶點,但其具體作用機制尚未完全明確,還需后續(xù)進一步深入探討,進一步證實和明確Th17/Treg與心肌酶譜之間的關(guān)系。

4 結(jié)論

小兒支原體肺炎心肌損害發(fā)生率較高,且Th17/Treg細胞比例失衡,及與LDH、CK和CK-MB正相關(guān)。但本研究樣本量相對較小,還需后續(xù)增加樣本量進行多中心、多樣本深入研究,為臨床提供可靠的參考依據(jù)。