血清腫瘤異常蛋白與堿性成纖維細胞生長因子在宮頸癌中的表達水平及臨床意義探討

苗琴，劉亞敏

濟南市第八人民醫院病理科，山東濟南 271104

宮頸癌（cervical cancer，CA）是女性發病率、病死率均居于前列的惡性腫瘤，受到女性的廣泛關注[1]。CA的發病與初次性生活年齡、不良性行為、人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染等多種因素相關[2-3]。CA的預后與發現是否及時相關，早期CA患者的預后相對較好[4]。CA的篩查一般是通過腫瘤標志物指標、影像學，但其中依然有部分患者未能檢出，導致錯過最佳的干預時機[5-6]。血清腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）是近年來腫瘤領域的新熱點，有機會成為腫瘤診斷的標志物指標[7]。堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）是調節神經、血管形成的多肽生長因子，在機體中分布較廣，可對多種細胞的生長、分化起到調節作用[8]。本研究選取2021年3月—2023年6月在濟南市第八人民醫院接受CA篩查的87例患者為研究對象，探討TAP與bFGF在CA中的表達情況及臨床意義。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于本院接受CA篩查的87例受檢者為研究對象，其中37例經病理學確診為CA，29例患者是非CA的上皮內瘤變（intraepithelial neoplasia，IN）患者，21例健康者。受檢者年齡25～74歲，平均（54.82±14.91）歲；有性生活史72例，無性生活史15例；有生育史46例，無生育史41例。其中：CA患者年齡25～72歲，平均（55.19±12.71）歲；有性生活史31例，無性生活史6例；有生育史21例，無生育史16例。IN患者年齡28～74歲，平均（54.29±12.52）歲；有性生活史24例，無性生活史5例；有生育史17例，無生育史12例。健康者年齡25～71歲，平均（54.67±12.29）歲；有性生活史例17，無性生活史4例；有生育史8例，13無生育史例。對比分析3組受檢者的一般資料，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。患者均簽署知情同意書，本研究已通過醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①CA患者經病理學診斷得到證實；②所有患者均接受TAP、bFGF的篩查。

排除標準：①入組前已經接受化療、放療、免疫治療者；②合并其他惡性腫瘤者；③合并嚴重精神性疾病者。

1.3 方法

①TAP 采集患者的空腹靜脈血，離心機分離血清。使用TAP試劑盒并按照操作步驟（上?？瓢┥铮┨幚?，再利用檢測傳統圖像分析儀進行觀察，能夠發現不規則類型圓形晶體顆粒、顆粒為淡綠色、淡黃色、棕色，且中心存在屈光性，四周因混合物較多呈黑色或墨綠色為陽性；無顆粒檢出則為陰性。TAP凝聚物面積如＜121 μm2：視為正常，無明顯的凝聚物；凝聚物面積121～225 μm2：視為凝聚物較小，建議進行腫瘤的進一步排查；凝聚物面積＞225 μm2：視為凝聚物較大，建議進行腫瘤的進一步排查。

②bFGF 采用免疫組織化學染色法檢測，試劑購買自Santa Cruz公司，bFGF稀釋濃度為1∶500。采集的組織標本使用多聚甲醛固定，石蠟包埋，制作成4 μm厚度的切片，切片后以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer solution，PBS）沖洗，3 min，再以3%過氧化氫室溫孵育10 min，PBS沖洗3 min，加入5%牛血清孵育10 min。滴加一抗，在4℃下孵育過夜，沖洗后滴加二抗室溫孵育20 min，沖洗后加入鏈親和素-過氧化物酶孵育20 min，沖洗后以二氨基聯苯胺顯色，蘇木精復染，再經脫水、透明、封片處理完成制片。使用顯微鏡對切片進行觀察，陽性為細胞質呈彌散的棕黃色，1個視野范圍內陽性細胞≥10%；陰性為1個視野范圍內陽性細胞＜10%。參考范圍：0～64 U/mL。

1.4 觀察指標

①對比各組患者的TAP、bFGF表達情況。

②分析不同TAP、bFGF 的 CA患者臨床特征，包括年齡、FIGO分期、病理類型、浸潤情況、淋巴結轉移。

1.5 統計方法

采用SPSS 22.0統計學軟件進行數據處理，符合正態分布的計量資料以（）表示，行t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組受檢者TAP、bFGF對比

CA患者的TAP、bFGF的水平均高于IN患者、健康者，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組受檢者TAP、bFGF對比()

表1 3組受檢者TAP、bFGF對比()

組別CA（n=37）IN（n=29）健康者（n=21）tCA vs IN值PCA vs IN值tCA vs健康者值PCA vs健康者值tIN vs健康者值PIN vs健康者值TAP（μm2）251.26±25.96 135.15±12.93 56.93±8.53 22.015＜0.001 33.191＜0.001 24.144＜0.001 bFGF（U/mL）92.53±11.72 45.93±11.82 21.29±5.72 15.972＜0.001 26.077＜0.001 8.817＜0.001

2.2 TAP與CA患者臨床特征的表達分析

不同FIGO分期、浸潤情況、淋巴結轉移不同的宮頸患者TAP、bFGF對比，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 CA患者TAP、bFGF臨床特征的表達分析

3 討論

TAP是癌細胞異常增生過程中表現出的特征，由癌基因和抑癌基因突變后表達產生[9]。在腫瘤惡性病變的過程中，糖基轉移酶、糖苷酶等逐漸失去活性，或受到外部因素影響，導致失去活性的酶被再次激活，這期間的過程會引起“異常糖基化”[10]。本研究對TAP實施檢測，結果顯示CA組患者的TAP達到（251.26±25.96）μm2，提示CA患者大部分TAP呈陽性表達，同時凝聚物面積較大。王亞通等[11]的研究中也分析了CA患者的TAP檢出情況，其結果顯示陽性率為87.72%，再次證實CA患者的TAP大多呈陽性表達。TAP陽性表達說明異常糖基化的程度高，反映此過程與CA的發病、進展密切相關。

bFGF屬于撕裂原活性的多肽因子，可促進成纖維細胞、血管內皮細胞增殖，進而促進組織異常增生和腫瘤新生血管形成[12]。機體正常狀態下bFGF呈陰性或弱陽性表達，而在腫瘤的形成和發展中，通過增加bFGF分泌可達到促進腫瘤增殖的作用[13]；其次，bFGF可促進新生血管形成，為腫瘤生長提供更多能量，也能夠達到促進腫瘤生長的作用[14]。本研究中CA患者的bFGF表達水平相較IN、健康者均更高（P＜0.05），提示bFGF也參與了CA的發病、發展過程。劉松格等[15]的研究中，CA組的bFGF的陽性率為88.14%、瘤變組為59.15%、對照組為6.00%，反映出bFGF在CA的發病、發展過程中扮演重要作用。

綜上所述，本研究結果表明CA患者大多TAP、bFGF呈現陽性表達，并且與臨床特征存在一定相關性，提示TAP、bFGF可作為CA診斷、病情評估、預后預測的重要參數。