肺腺癌組織及其癌旁組織TS、Src表達情況及與生存時間的相關性

許建強，印倩，宋正義，田秀文，謝東升，龔建化

1.長江大學附屬荊州醫院呼吸與危重癥醫學科，湖北荊州 434020；2.三峽大學第三臨床醫學院（國藥葛洲壩中心醫院）呼吸與危重癥醫學科，湖北宜昌 443002；3.三峽大學第三臨床醫學院（國藥葛洲壩中心醫院）病理科，湖北宜昌 443002；4.三峽大學第三臨床醫學院（國藥葛洲壩中心醫院）胸外科，湖北宜昌 443002；5.三峽大學第三臨床醫學院（國藥葛洲壩中心醫院）老年醫學科，湖北宜昌 443002

從基因組學、蛋白質組學角度出發，進行探索分析，是一種快捷的研發路徑，也是適應不同患者個性化治療需求、解決耐藥問題的重要思路[1-8]。長期以來，胸苷酸合成酶（thymidylate synthase, TS）、酪氨酸激酶（src tyrosine kinase, Src）均是腫瘤化療及抑制微生物生長的重要靶點[9-10]，相關研究資料逐漸增多，但學界更關注相關機制、基因多態性研究，肺腺癌組織及其癌旁組織中TS、Src表達特點及臨床意義的研究目前尚處于起步階段。本研究回顧性分析2020年1—12月在國藥葛洲壩中心醫院行手術切除治療的肺腺癌116例患者的臨床資料，主要觀察肺腺癌組織及其癌旁組織中TS、Src的表達情況，并探究TS、Src表達的臨床意義，以期探索TS、Src作為肺腺癌治療靶點的可行性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析在本院行手術切除治療的肺腺癌116例患者的臨床資料。其中男47例，女69例；年齡＜60歲76例，≥60歲40例；吸煙史42例；文化水平中學47例，中專/高中56例，大學及以上13例；基礎疾病：高血壓者15例，糖尿病17例，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）8例，血脂異常11例。

1.2 納入與排除標準

納入標準：標本涉及肺腺癌組織、癌旁組織（距離肺腺癌組織5 cm的陰性組織標本）、均經胸外科手術切除病灶，基因檢測證實為驅動基因陰性或未進行基因檢測患者；入組時未接受任何治療（放療、靶向治療等）；病歷資料齊全，且有超過5年的完整隨訪資料。

排除標準：復發性肺癌患者；術前接受過其他治療患者；確診其他部位惡性腫瘤患者；合并其他肺部疾病患者；臨床資料殘缺患者；精神疾病患者。

1.3 方法

對TS、Src蛋白均采用微量凱氏（Kjeldahl）定氮法進行檢測，同時分析其在肺腺癌組織及癌旁組織中的表達，及其與患者生存時間的相關系。

1.4 觀察指標

統計TS及Src在肺腺癌組織及癌旁組織中的表達情況，分析肺腺癌組織TS及Src表達與患者總生存期（overall survival, OS）與無病生存期（disease free survival, DFS）的關系。其中TS及Src蛋白在肺腺癌組織、癌旁組織中均有表達，相關表達均位于細胞胞漿中，TS及Src蛋白表達通過免疫組織化學染色（IHC）以染色劑作用后的顏色變化為標準，如觀察到TS及Src蛋白呈現棕黃色或棕褐色顆粒，可認為是TS及Src蛋白高表達，提示為陽性，則納入本研究陽性例數統計。

1.5 統計方法

使用SPSS 20.0統計學軟件處理數據，符合正態分布的計量資料以（）表示，兩組間差異比較用t檢驗。計數資料以例數（n）和率（%）表示，組間差異比較采用χ2檢驗。采用Pearson 相關性系數進行相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺腺癌組織及癌旁組織中TS及Src表達情況比較

免疫組化染色發現，肺腺癌組織中TS表達陽性率為41.38%，高于癌旁組織的10.34%，差異有統計學意義（P＜0.05）。肺腺癌組織中Src表達陽性率為59.48%，高于癌旁組織的15.52%，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 肺腺癌組織及癌旁組織中TS及Src表達情況比較[n(%)]

2.2 不同TS表達組OS及DFS比較

TS低表達組OS及DFS均顯著長于TS高表達組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同TS表達組OS及DFS比較[()，年]

表2 不同TS表達組OS及DFS比較[()，年]

組別低表達組（n=27）高表達組（n=33）t值P值DFS 1.46±0.23 1.05±0.21 7.208＜0.001 OS 2.47±0.41 1.92±0.40 5.240＜0.001

2.3 不同Src表達組OS及DFS比較

Src低表達組OS及DFS均顯著長于Src高表達組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 不同Src表達組OS及DFS比較[()，年]

表3 不同Src表達組OS及DFS比較[()，年]

組別低表達組（n=31）高表達組（n=56）t值P值DFS 1.49±0.24 1.01±0.25 7.532＜0.001 OS 2.42±0.48 1.75±0.43 5.698＜0.001

2.4 TS及Src表達情況與DFS、OS相關性分析

TS及Src蛋白表達情況與DFS、OS均呈負相關性，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 TS及Src表達情況與DFS、OS相關性分析

3 討論

近年針對惡性腫瘤靶向治療的興起，并體現出良好應用前景，在此背景下，開發肺腺癌組織靶點，用于治療新型靶向分子治療藥物，對于提升肺腺癌臨床治療效果，進一步延長患者的生命具有重要意義[11-12]。目前，已有大量研究證實TS、Src可以作為惡性腫瘤治療靶點[13]，有望進一步推動惡性腫瘤分子治療發展。現今階段，國內外針對肺腺癌患者TS、Src表達的相關研究資料較少，對于TS、Src具體表達特點及臨床意義尚未明確，無法有效指導臨床為肺腺癌患者制訂個性化治療方案。本研究以116例肺腺癌患者手術切除病理組織為例，進行免疫組化實驗，觀察TS、Src表達情況，并分析TS、Src表達與患者生存情況之間的關系。

本研究以免疫組化實驗方法，分別檢測116例肺腺癌患者肺腺癌組織、癌旁組織TS、Src表達情況。觀察肺腺癌組織、癌旁組織中Src表達情況，發現均有陽性表達情況，表達于細胞胞漿和/或細胞核中，以細胞胞漿為主，呈現棕黃色或棕褐色顆粒。其中肺腺癌組織中Src表達陽性率為59.48%，高于癌旁組織的15.52%（P＜0.05）。由此判斷，Src在肺腺癌組織中呈現高表達特點。肺腺癌組織中Src陽性表達率升高，多種生長因子受體信號通路可以通過激活Src表達，促進惡性腫瘤的發生與發展，參與肺腺癌進展過程。由此判斷，Src可以作為肺腺癌治療靶點，抑制Src表達能夠控制肺腺癌細胞生長與增殖，促進腫瘤細胞凋亡。本研究認為肺腺癌組織Src表達情況與患者的癥狀體征密切相關，提示Src可能能夠用于評估肺腺癌患者病情嚴重程度，進而指導臨床合理制訂治療方案。最后本研究發現116例肺腺癌組織中，TS陽性表達48例，其中93.75%（45例）同時Src陽性；TS陰性表達68例，其中64.71%（44例）同時Src陰性。該結果與郭秀華[14]研究認為的肺腺癌組織中TS蛋白陽性表達率為91.73%，同時Src陽性相一致。由此可知，TS和Src表達密切相關，兩者可能共同參與惡性腫瘤的發生及發展過程，相互調節，協調作用，共同影響患者預后生存率。

同時本研究發現TS和Src低表達組的OS及DFS均顯著長于TS和Src高表達組（P＜0.05）。TS蛋白影響肺腺癌患者預后生存的具體機制尚不明確，可能與TS的基因多態性有關。目前已有大量研究證實，TS基因多態性會影響惡性腫瘤治療（尤其是化療）的敏感性，進而影響預后生存情況。同時Src參與腫瘤細胞浸潤、侵襲、轉移過程，使腫瘤細胞進展速度加快、惡性程度升高，增加死亡風險，影響臨床預后[15]。

綜上所述，肺腺癌組織中TS、Src陽性表達率均升高，且TS、Src表達水平越高，其DFS和OS均越短。