玻璃化法超低溫高效保存‘Gala’蘋果組培苗

徐娜,陳桂玲,楊磊,朱子涵,陳麗,韓亞丁,劉飛

玻璃化法超低溫高效保存‘Gala’蘋果組培苗

徐娜,陳桂玲,楊磊,朱子涵,陳麗,韓亞丁,劉飛*

濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院, 山東 日照 276800

本試驗(yàn)以蘋果‘Gala’蘋果為材料，從低溫鍛煉時(shí)間、預(yù)培養(yǎng)基蔗糖濃度、預(yù)培養(yǎng)時(shí)間和玻璃化溶液及處理時(shí)間4個(gè)方面優(yōu)化玻璃化超低溫保存體系，獲得‘Gala’蘋果莖尖超低溫保存的最佳體系。結(jié)果表明，將生長(zhǎng)30 d的組培苗在4 ℃的條件下低溫鍛煉5周，剝?nèi)∏o尖，將其置于含0.4 mol/L蔗糖的預(yù)培養(yǎng)基中培養(yǎng)5 d，滲透裝載液滲透30 min，0 ℃的條件下用PVS3玻璃化溶液處理60 min，放入液氮中冷凍24 h，取出后置于40 ℃水浴中1 min快速化凍，卸載液清洗2次，每次10 min，然后在恢復(fù)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，莖尖的再生率最高達(dá)到96.6%且生長(zhǎng)穩(wěn)定性好。本試驗(yàn)成功建立了‘Gala’蘋果的玻璃化法超低溫保存體系，為蘋果種質(zhì)資源的長(zhǎng)期保存提供了一條有效途徑。

‘Gala’蘋果; 超低溫處理; 組培

蘋果富含糖類、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、維生素和微量元素等多種有益于身體健康的物質(zhì)，是深受大眾喜愛的一種水果。中國(guó)是野生蘋果主要起源地之一，也是世界上最大的蘋果生產(chǎn)國(guó)[1,2]。農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，一個(gè)優(yōu)良的品種是決定蘋果產(chǎn)量與品質(zhì)的關(guān)鍵因素。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前世界上的蘋果品種約有1000個(gè)，其中已有幾十個(gè)品種在生產(chǎn)中廣泛栽培，但沒(méi)有一個(gè)品種能夠完全滿足生產(chǎn)者和消費(fèi)者的所有需求。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)許多具有優(yōu)良性狀的自然突變體，并將其引入到生產(chǎn)中，成功改善了蘋果的品質(zhì)。蘋果的野生種、半野生種和栽培種等種質(zhì)資源，是蘋果傳統(tǒng)育種和基因工程育種的基礎(chǔ)，也是培育優(yōu)良蘋果品種的保障[3]。……