vWF抗原和活性聯合檢測對惡性腫瘤患者靜脈血栓事件的預測價值

閆彬 杜偉鵬 翟素平 胡天喜 陶林靜 葉亞平 周媛 孫星

1 南陽市中心醫院醫學檢驗科，南陽 473000；2 南陽市中心醫院腫瘤內科，南陽473000

《2015 年中國惡性腫瘤流行情況分析》指出，中國癌癥負擔總體仍呈現持續上升趨勢，防控形勢依然嚴峻［1］。現有研究已證實，D 二聚體增高是肺癌合并靜脈血栓的高危因素［2］。血管性血友病因子（von Willebrand factor，vWF）是一種調節血小板粘附和聚集的多聚體糖蛋白，已成為抗血栓研究的新靶點［3］。研究發現，在SD 大鼠下腔靜脈血栓模型中，vWF 表達水平隨深靜脈血栓形成而升高［4］。vWF 在體內起作用不僅僅依賴于其抗原水平的升高，更多的是其活性的增強。然而，筆者查閱文獻發現，鮮有針對vWF在惡性腫瘤患者發生靜脈血栓栓塞（venous thromboembolism，VTE）中的研究。本文旨在探討惡性腫瘤患者血漿vWF 抗原（vWF antigen，vWF：Ag）和活性（vWF activity，vWF：Ac）水平預測惡性腫瘤患者發生VTE事件的臨床價值。

資料與方法

1.研究對象

選取2020 年6 月至2021 年12 月在南陽市中心醫院就診的惡性腫瘤患者167 例作為惡性腫瘤組，其中呼吸系統腫瘤37 例（全部為肺癌），泌尿系統腫瘤25 例（含前列腺癌19 例、膀胱癌6 例），生殖系統腫瘤43 例（含乳腺癌31 例、宮頸癌12 例），消化系統腫瘤62 例（含結直腸癌34 例、食管癌14例、肝癌8例、胃癌6例）。納入標準參考各專業的診斷指南。其中男97 例，女70 例，年齡19～81（52.53±10.58）歲。所有惡性腫瘤患者中，共有33 例患者在確診后90 d 內發生了VTE 事件，其中發生下肢靜脈血栓患者23 例，肺栓塞3例，其他部位血栓7例。選取門診體檢正常、與病例組相匹配的135例志愿者［男91例，女44例，年齡（47.56±8.09）歲］作為健康對照組。排除標準：⑴有不明原因出血史；⑵6 個月內抗凝藥物服用史；⑶伴有嚴重肝病史。

本研究納入的人員均為隨機自愿入選，并簽署了知情同意書，同時獲得了南陽市中心醫院醫學倫理委員會的批準（SOP-IRB-001-0630）。

2.標本采集與處理

采集惡性腫瘤組（入院24 h內）和健康對照組3 ml靜脈血置于含3.8%的枸櫞酸鈉抗凝管，1 500 g 離心15 min，分離上層血漿于-80 ℃保存待用。

3.標本檢測

vWF：Ag、vWF：Ac檢測及其常規凝血指標（凝血酶原時間、活化部分凝血活酶時間、纖維蛋白原、凝血酶時間和D-二聚體）均采用日本希森美康全自動血凝分析儀CS5100 進行檢測，所有試劑均為原裝配套的德國西門子試劑。

4.統計學分析

采用SPSS 19.0統計軟件和MedCalc 軟件分析結果并繪圖。兩組計量資料比較，若為正態分布，采用單因素方差分析，用均數±標準差（）表示；若方差不齊或者偏態分布，則用M（Q1，Q3）表示，采用非參數Mann-WhitneyU檢驗。相關性分析采用Spearman秩相關分析。通過受試者工作特征曲線（ROC）評估vWF在惡性腫瘤患者發生VTE事件中的預測價值。采用Cox 比例風險模型和Kaplan-Meier 法進行患者預后因素分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

結果

1.惡性腫瘤組與健康對照組凝血指標、血漿vWF：Ag和vWF：Ac比較

與對照組相比，惡性腫瘤組血漿vWF：Ag、vWF：Ac 水平和vWF：Ac∕vWF：Ag比值均顯著升高，差異均有統計學意義（均P＜0.001），見表1。

表1 惡性腫瘤患者與健康對照組在凝血指標、vWF:Ag、vWF:Ac水平和vWF:Ac∕vWF:Ag比值比較

2.惡性腫瘤患者各亞組血漿vWF：Ag 和vWF：Ac 水平與健康對照組比較

呼吸系統腫瘤組、生殖系統腫瘤組和消化系統腫瘤組血漿vWF：Ag和vWF：Ac水平均高于健康對照組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；泌尿系統腫瘤組vWF：Ag 水平顯著高于健康對照組，差異有統計學意義（P=0.038），但兩組vWF：Ac 水平差異無統計學意義（P＞0.05）。呼吸系統腫瘤組、泌尿系統腫瘤組vWF：Ac∕vWF：Ag 比值與對照組比較，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；生殖系統腫瘤組、消化系統腫瘤組vWF：Ac∕vWF：Ag比值與對照組比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）。見表2。

表2 惡性腫瘤患者各亞組與健康對照組vWF:Ag、vWF:Ac水平和vWF:Ac∕vWF:Ag比值比較

3.惡性腫瘤患者血漿vWF：Ag 和vWF：Ac 之間的相關性分析

對167 例惡性腫瘤患者的血漿vWF 水平分析發現，其vWF：Ag 與vWF：Ac 呈正相關（r=0.783，P＜0.001）。進一步分析各亞組腫瘤患者vWF 指標發現：37 例呼吸系統腫瘤患者血漿vWF：Ag 與vWF：Ac 呈正相關（r=0.787，P＜0.001）；25 例泌尿系統腫瘤患者血漿vWF：Ag 與vWF：Ac 呈正相關（r=0.878，P＜0.001）；43 例生殖系統腫瘤患者血漿vWF：Ag與vWF：Ac 呈正相關（r=0.606，P＜0.001）；62 例消化系統腫瘤患者血漿vWF：Ag與vWF：Ac呈正相關（r=0.746，P＜0.001）。

4.vWF檢測對惡性腫瘤患者發生VTE事件的預測價值

發生VTE 事件組vWF：Ag 和vWF：Ac 水平高于未發生VTE 事件組［432.38%（248.14%，539.55%）比183.00%（126.96%，246.02%），Z=5.65，P＜0.001；258.38%（174.11%，373.84%）比175.42%（122.05%，251.00%），Z=3.89，P＜0.001］。Cox 多因素回歸分析顯示，vWF：Ag 是患者90 d 發生VTE 事件的獨立影響因素（風險比=1.03，P＜0.001）。在評估惡性腫瘤患者發生VTE 事件的診斷效能時，vWF：Ag和vWF：Ac 對VTE 事件預測價值的曲線下面積（area under the curve，AUC）分別為0.818、0.719，靈敏度分別為78.8%、69.7%，特異度分別為75.4%、67.9%，其對應的截斷值分別為244.98%、225.25%，兩者聯合檢測的預測價值更高（AUC=0.825），見圖1 和表3。此外，Kaplan-Meier 生存分析顯示，vWF：Ag≥244.98%的惡性腫瘤患者的總體VTE 事件發生時間早于vWF：Ag＜244.98% 的患者（χ2=20.49，P＜0.001）。

圖1 vWF檢測對167例惡性腫瘤患者發生靜脈血栓栓塞事件的預測價值

表3 vWF檢測對167例惡性腫瘤患者發生靜脈血栓事件的診斷價值

討論

我國惡性腫瘤負擔日益加重，VTE 事件也成為國內外腫瘤患者死亡的重要原因［5］，而vWF 在促進血栓形成［6］、腫瘤轉移［7］中發揮著重要作用。本研究發現，與健康對照組相比，惡性腫瘤患者vWF：Ag 水平顯著升高，這一改變同樣存在于呼吸系統、泌尿系統、生殖系統和消化系統腫瘤患者中，這與以往的研究結果一致［8-9］。本研究發現惡性腫瘤患者vWF：Ac 活性顯著升高（P＜0.001），表明vWF 可通過活化的血小板參與腫瘤的發生發展，使其逃避機體的免疫攻擊［10］。這為研發抑制腫瘤細胞轉移藥物提供了新的思路。

惡性腫瘤患者血漿中vWF分子數量增多，活性也增強。本研究中vWF：Ac 與vWF：Ag 呈現了較好的相關性（P＜0.001），且這一相關性在各惡性腫瘤亞組中也依然存在。這就提示我們，vWF 數量和質量的變化不僅在惡性腫瘤患者體內廣泛存在，并且有著相一致的變化。目前，多數醫院尚未開展vWF 的活性檢測項目，該發現將為這些醫院根據vWF：Ag 水平預估vWF 活性提供一定的參考，從而在現有條件下適當降低患者的就診成本。

門劍龍等［11］分析了多種血栓標志物后發現，與惡性腫瘤患者vWF：Ag 水平高于健康對照組。本研究結果與之一致，同時也進一步發現惡性腫瘤患者的vWF：Ac 水平較高，vWF：Ag 和vWF：Ac 對VTE 事件均有較好的預測價值，且兩者聯合使用效能更高。本研究中vWF：Ag 是惡性腫瘤患者90 d 發生VTE 事件的獨立影響因素，高水平vWF：Ag（≥244.98%）意味著總體VTE事件發生時間更早。vWF的變化表明血小板在介導腫瘤患者血栓形成中的作用［12］。因此，臨床醫生在抗腫瘤治療時也要兼顧預防VTE 事件的發生［13］。

本研究也有一定的不足之處：⑴未能收集相關的腫瘤標志物數據，缺乏vWF與腫瘤標志物的共同分析比較；⑵納入的病例組樣本量較小，今后應利用醫聯體平臺，進行大樣本多中心的分析，系統評估vWF在腫瘤中的作用。總之，本研究發現了多種不同惡性腫瘤患者血漿vWF：Ag 和vWF：Ac 水平均升高，且這種升高之間具有一致性。vWF：Ag 是惡性腫瘤患者發生VTE 事件的獨立影響因素；這可為惡性腫瘤患者積極采取抗栓預防和診治提供一定的思路。

利益沖突所有作者聲明無利益沖突。

作者貢獻聲明閆彬：課題設計、論文撰寫；杜偉鵬、翟素平：結果解釋，行政支持；胡天喜、陶林靜：數據收集與分析；葉亞平、周媛：標本檢測、結果分析；孫星：結果解釋，篩查病例